CIK细胞在体外对肝癌细胞株HEP-G2杀伤作用的研究

摘要

目的：1、了解异体CIK细胞对肝癌细胞株HEP-G2的杀伤作用
　　2、探讨异体CIK细胞是否通过Fas/FasL途径诱导肿瘤细胞自身产生 caspase介导的级联反应，从而导致肿瘤细胞的凋亡。
　　方法：（1）采用MTT法测OD值，了解不同效靶比，不同作用时间CIK细胞对肝癌细胞株 HEP-G2的杀伤情况。
　　（2）采用 JC-1染色荧光法检测肝癌细胞株HEP-G2的凋亡。
　　（3）利用蛋白免疫印记（Western-bloting）技术定性分析凋亡蛋白caspase-3在HEP-G2细胞中的表达情况。
　　（4）利用SPSS17.0统计分析软件，采用方差分析，P<0.05认为有统计学意义。
　　结果：
　　（1）异体CIK细胞在体外对肝癌细胞株HEP-G2有明显的聚集作用。
　　（2）异体CIK细胞在体外对肝癌细胞株HEP-G2有杀伤作用，效靶比20:1，互相作用48小时达最佳杀伤率75.29％（P<0.05）。
　　（3）利用JC-1荧光染色法，显示凋亡细胞，更加证明异体CIK对肝癌细胞株HEP-G2具有杀伤作用。
　　（4）通过Western-bloting技术，检测到了凋亡蛋白caspase-3的表达，证实异体CIK细胞启动了Fas/FasL凋亡途径，从而诱导肝癌细胞株HEP-G2的凋亡。
　　结论：
　　（1）CIK细胞对肝癌细胞株HEP-G2有明显的杀伤作用，效靶比20:1，作用48小时达最佳杀伤效果，与临床上回输CIK治疗患者的时间相一致。
　　（2） CIK细胞、肝癌细胞株HEP-G2互相作用后，可以检测到凋亡蛋白caspase-3的表达，且明显高于对照组，表明CIK细胞杀瘤机制有可能是通过Fas/FasL凋亡途径，引起下游凋亡蛋白caspase-3的表达，从而引发肿瘤细胞凋亡。

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1 材料与试剂

2 方法

3 结果

4 讨论

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