二聚体蝎型探针定量检测HCV方法的建立

摘要

目的：利用二聚体蝎型荧光探针技术，建立一种能广泛应用于临床而且稳定、敏感、特异的荧光定量PCR检测HCV方法。 方法：构建重组质粒pMDl8-T-HCV-5'-NCR作为标准品。自行设计二聚体蝎型探针，优化定量PCR体系，并进行方法学评价。 结果：1)成功构建了重组质粒pMDl8-T-HC~-5'-NCR；2)建立了利用二聚体蝎型荧光探针的荧光定量PCR方法，其线性范围：101．10l~copies／gl；灵敏度：lOcopies／[d；重复性：批内CV为6．36％，批间CV为6．63％，天间CV为8．27％；特异性：100％；与紫外定量方法比较，结果差异无显著性，且高度相关；3)初步临床应用证明：该方法比利用TaqMan技术建立的方法灵敏度更高，检测时间更短和成本也明显降低。 结论：在国内外首次建立了以二聚体蝎型荧光探针为平台的丙型肝炎病毒荧光定量PCR检测方法，为新型试剂盒的开发奠定了坚实的基础，同时也促进新型探针技术的应用。

目录

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英汉缩略语名词对照

摘要

前言

第一部分pMD18-T-HCV-5'-NCR标准品的制备

第二部分二聚体蝎型探针定量检测HCV方法的建立及初步临床应用

总结

参考文献

文献综述：基因芯片在感染性疾病研究中应用

致谢

攻读学位期间发表的论文