慢病毒载体介导的过表达FOXO1对人肝癌细胞HepG2中水通道蛋白9表达的影响

摘要

目的：观察慢病毒载体介导的FoxO1基因过表达对水通道蛋白9(AQP9)在人肝癌细胞HepG2中表达的影响。
　　方法：构建含FOXO1编码序列的过表达慢病毒载体pWPI-FOXO1；采用慢病毒载体pWPI-FOXO1感染人肝癌细胞HepG2，流式细胞仪荧光分选稳定表达GFP的HepG2细胞；实验分为空白对照组、pWPI组和pWPI-FOXO1组，采用实时荧光定量PCR及Western blot方法验证FOX01在pWPI-FOXO1组HepG2细胞中的过表达；应用实时荧光定量PCR及Western blot方法检测FOXO1过表达后，AQP9在人肝癌细胞HepG2中的表达变化。
　　结果：成功构建含FOX01编码序列的过表达慢病毒载体pWPI-FOXO1；成功分选感染慢病毒载体pWPI-FOXO1及空载体pWPI后稳定表达GFP的HepG2细胞；pWPI-FOX01组FOX01 mRNA及蛋白水平较pWPI组和空白对照细胞中明显增强(P<0.05)，AQP9的mRNA及蛋白水平在稳定过表达FOXO1的HepG2细胞中亦明显升高(P<0.05)。
　　结论：慢病毒载体介导的FoxO1基因过表达对AQP9在人肝癌细胞HepG2中表达具有确切的影响，AQP9 mRNA和蛋白的表达随FoxO1表达增强而升高，表明FOXO1在AQP9的表达调控中起到一定的作用，但其具体机制有待进一步研究。