人载脂蛋白M下调诱导细胞死亡的DFF45样效应因子C表达及其分子机制的初步研究

摘要

动脉粥样硬化（Atherosclerosis，AS）是威胁人类健康的常见心脑血管疾病，在全球死亡因素中排在第二位，其发病机制至今仍未完全阐明，脂质代谢紊乱是其发生的重要原因。肝细胞脂质代谢紊乱使过多的甘油三酯（Triglyceride，TG）聚集在细胞内，导致高甘油三酯血症的发生，进而引发动脉粥样硬化。人载脂蛋白M（apolipoprotein M，apoM）是新近发现的一种载脂蛋白，主要在肝细胞和肾小管上皮细胞表达，参与前β-HDL的形成及胆固醇逆向转运而具有抗AS的作用，并对PPARγ（ Peroxisome Proliferator-Activated Receptor Gamma）的表达有影响。在小鼠细胞中，PPARγ又可结合于脂肪特异性蛋白27(Fat Specific Protein27， FSP27)启动子区，进而调节其表达。诱导细胞死亡的DFF45样效应因子 C（cell death-inducing DNA fragmentation factor45-like c，cidec）在小鼠体内又叫FSP27，最先在小鼠脂肪细胞中分离得到，随后在人肝细胞、脂肪细胞等细胞中相继发现，与动脉粥样硬化有密切关系，迄今为止cidec的表达机制还不清楚。本研究的目的是为了探究在人细胞中apoM通过PPARγ而调节cidec基因表达的分子机制，为动脉粥样硬化等疾病的治疗提供新的靶标。在前面研究的基础上，首先分离纯化人apoM蛋白，检测其对PPARγ表达的调节，进而构建cidec启动子区域不同长度片段的报告基因质粒，转染人HepG2细胞中，进行报告基因实验探究PPARγ对cidec表达的分子机制。
　　实验结果如下：⑴离子交换层析法比超速离心法分离纯化人apoM的效率高；⑵人apoM蛋白能够下调人肝癌细胞中PPARγ的表达；⑶PPARγ能结合于人cidec启动子区-2289～-1800bp区域而调节cidec的表达。

目录

英文缩写一览表

1文献综述

1.1 简介

1.2 cidec在脂肪代谢中的作用

1.3 cidec与脂滴的形成和发展

1.4 cidec对细胞凋亡的调节作用

1.5 展望

2 引 言

2.1论文的立题依据

2.2 论文的技术路线

3 人血浆apoM的分离纯化及其在肝细胞中对PPARγ表达的影响

3.1 实验材料及仪器

3.2实验方法

3.3 实验结果

3.4 实验讨论

4 PPARγ上调cidec基因表达分子机制的初步研究

4.1 实验材料及仪器

4.2实验方法

4.3 实验结果

4.4 实验讨论

参考文献

附录：作者攻读硕士学位期间发表论文及科研情况

致谢

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