磷脂酶D在常温货架期间冷藏荔枝褐变过程中的作用

摘要

荔枝是我国广东省盛产的佳果。市场上保藏采后荔枝的方法主要采用冷藏,荔枝果皮薄,冷藏期间易受冷害,冷藏荔枝转常温货架存放时特别易发生褐变和霉烂,严重制约了荔枝产业的发展。膜脂系统在细胞中有着重要作用,而磷脂酶 D能水解磷脂,破坏膜脂系统,造成细胞衰老。本论文从荔枝果实品质、果皮酚类物质代谢、果皮活性氧代谢、膜脂功能结构变化以及磷脂酶D基因表达等方面,研究磷脂酶D在常温货架期间冷藏荔枝果实褐变中的作用。
　　在荔枝果实品质方面，利用磷脂酶D专一抑制剂正丁醇处理过的采后荔枝果实,与空白对照组的荔枝果实品质进行比较,发现正丁醇处理能显著抑制处于常温货架期的冷藏荔枝果皮中磷脂酶 D活性,推延荔枝果皮褐变以及霉变的发生,提高荔枝果实品质。但在常温货架期间,正丁醇处理对在常温货架期冷藏荔枝果实的可溶性固形物含量影响不大。
　　在荔枝果实酚类物质代谢方面,荔枝果实的总酚含量在冷藏后常温货架期间呈下降趋势,正丁醇处理对冷藏10天后和20天后常温货架期间的荔枝总酚含量和PPO活性影响不显著,但在荔枝冷藏30天后,正丁醇处理维持处于常温货架期的冷藏荔枝果皮中总酚含量,显著抑制处于常温货架期间冷藏荔枝中PPO活性。正丁醇处理能极显著抑制冷藏荔枝果实常温货架期间的PO D活性。
　　在荔枝果皮活性氧代谢方面,正丁醇处理能显著抑制冷藏荔枝果实常温货架期间的超氧阴离子含量和过氧化氢含量的积累,刺激在常温货架期的冷藏荔枝果皮中SOD活性升高,有效消除在常温货架期的冷藏荔枝果皮中MDA含量的累积。
　　在荔枝果皮膜脂功能结构变化方面,通过测定细胞膜相对渗透率、细胞膜的流动性、气相测定膜脂中脂肪酸含量以及荔枝果皮微结构观察,发现正丁醇处理能显著降低冷藏后荔枝常温货架期间的细胞膜相对渗透率,降低在常温货架期间冷藏荔枝果皮中膜脂的通透性，提高膜脂的流动性,防止膜脂中不饱和脂肪酸氧化,减低饱和脂肪酸生成。正丁醇处理能有效维持在常温货架期冷藏荔枝的细胞膜结构。
　　在荔枝果皮中磷脂酶D基因表达方面，通过实时荧光定量PCR对荔枝果皮中磷脂酶 D基因表达进行相对定量，常温货架期间，荔枝冷藏时间越长，正丁醇越会抑制细胞磷脂酶 D基因表达，冷藏时间短时，正丁醇会刺激细胞磷脂酶 D基因表达。这可能与细胞膜损伤程度有关。
　　综上述,正丁醇可影响磷脂酶D基因表达，降低磷脂酶D水解活性，减少对膜结构的破坏，维持膜完整性和膜区域化，从而减少酚类化合物和酶类直接作用，产生醌类物质，抑制荔枝发生褐变。同时，正丁醇处理通过抑制磷脂酶D的活性,保护冷藏荔枝果皮中细胞膜少受迫害,从而减少在常温货架期的冷藏荔枝果皮中自由基含量,提高自身抗氧化能力，延缓冷藏后荔枝在常温货架期发生衰老与褐变。
　　因此，磷脂酶 D在常温货架期间冷藏荔枝褐变中起重要作用。荔枝果皮在低温下易受冷害，扰乱细胞新陈代谢，产生大量自由基，破坏膜脂系统，扰乱细胞膜的运作及再生功能，使果实发生衰老褐变。而磷脂酶 D对磷脂有降解作用，可诱导加速荔枝果实褐变发生。对磷脂酶 D基因和活性进行调控，能延缓在常温货架期间冷藏荔枝褐变进程。

目录

声明

主要缩略词

1 前言

1.1引言

1.2磷脂酶D概述

1.3磷脂酶D分子生物学特性

1.4磷脂酶D抑制剂

1.3 研究意目的义与技术路线

2 基于正丁醇处理研究磷脂酶D对在常温货架期冷藏荔枝果实品质影响

2.1 材料与仪器

2.2实验方法

2.3 实验结果

2.4本章讨论与小结

3基于正丁醇处理研究磷脂酶D对在常温货架期冷藏荔枝果实中酚类物质代谢及活性氧代谢的影响

3.1 材料与仪器

3.2实验方法

3.3实验结果

3.4本章讨论与小结

4 基于正丁醇处理研究磷脂酶 D对冷藏荔枝常温货架期果实中膜脂结构与成分的影响

4.1 材料与仪器

4.2实验方法

4.3实验结果

4.4本章讨论与小结

5基于正丁醇处理研究冷藏荔枝常温货架期果实中磷脂酶D基因表达的影响

5.1 材料与仪器

5.2实验方法

5.3实验结果

5.4本章讨论与小结

6、总结与展望

6.1总结

6.2创新点

6.3展望

参考文献

致谢

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