快速检测志贺毒素2基因的LAMP方法的建立与评价

摘要

目的：建立志贺毒素2的LAMP快速检测方法，更好的适应临床和实验室等的检测需求。方法：利用LAMP技术，以stx2及多个变异体(stx2v)基因为靶序列，设计LAMP引物，建立LAMP反应体系与条件，进行灵敏度和特异性实验。结果：整个检测过程仅需1 h，即可通过肉眼直接目测实验结果。stx2-LAMP对纯菌和临床样品的最低检测限分别为1CFU／M1和10CFU／g;以不能产生志贺毒素的大肠杆菌以及沙门氏杆菌基因组DNA为模板对stx2基因进行检测，结果显示均没有发生非特异性扩增反应。结论：stx2-LAMP能够快速检测stx2基因，且可直接观察到实验结果，实现了检测结果的可视化。具有操作简单安全、检测灵敏度高、特异性高的特点，能够满足基层实验室、应急检测或现场监测等方面的使用需求，具有良好的应用价值。