LAMP技术快速检测食源性沙门菌hisJ基因方法的建立

摘要

沙门菌是一类重要的食源性致病菌，能够污染多种食物，引起严重的食品安全问题。全球每年大约有1600万人感染，600万人死亡，由沙门菌引起的中毒病例位居世界各地食物中毒的首位。为建立一种快速检测食源性沙门菌属的环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)方法.依据GenBank公布的沙门菌属hisJ基因序列,利用Primer Explorer软件设计LAMP扩增所需引物,通过LAMP反应条件的优化,建立沙门菌属LAMP快速检测方法,选取鼠伤寒沙门菌、猪霍乱沙门菌、肠炎沙门菌、伤寒沙门菌、鸡白痢沙门菌及其他6种常见食源性细菌进行特异性试验,并对其灵敏性进行了评价.针对hisJ基因建立的LAMP方法,在63℃水浴1小时便可完成沙门菌属的有效扩增,该方法的灵敏度达到102CFU/mL,高于PCR方法100倍,特异性试验结果显示只有沙门菌属的LAMP扩增结果呈阳性.本研究建立的沙门菌属hisJ基因LAMP检测方法具有较强的特异性及灵敏性,可用于食品中沙门菌属的快速检测.