猪流行性腹泻病毒血清IgA抗体间接ELISA方法的建立

摘要

为了建立检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)IgA抗体的间接ELISA方法,为PEDV感染检测与免疫效果评价提供技术手段.以重组PEDV结构蛋白(S1蛋白)作为包被抗原,建立PEDV IgA抗体检测间接ELISA方法,评价方法的特异性、批内与批间重复性及其与国外试剂盒的符合率,分析ELISA的检测血清特异性IgA抗体水平与中和抗体的相关性.结果显示,当抗原包被浓度为1μg/mL,待检血清和酶标抗体的工作浓度分别为1∶40与1∶1500倍稀释时,建立的ELISA方法能够特异地检测PEDV抗体,与猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒、伪狂犬病毒、猪圆环病毒2型等病毒的抗血清无交叉反应,批内和批间重复性试验的变异系数低于10%,与现有试剂盒的总符合率为94.8%,血清特异性IgA抗体水平与中和抗体呈正相关(r=0.69,P<0.001).

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