重组核蛋白检测鸭血清禽流感抗体间接ELISA方法的建立

摘要

本实验利用禽流感重组核蛋白作为包被抗原,建立了检测鸭血清禽流感抗体的间接ELISA方法,通过对各个工作组份反应条件的优化,确定的最佳工作条件为:包被抗原1∶300稀释(蛋白含量为8μg/mL);待检血清1∶200稀释;酶标抗体1∶7000稀释;封闭时间、待检血清和酶标二抗最佳作用时间均为1.5h.通过对907份鸭血清样本(包括141份免疫血清和766份现地血清)进行检测,经符合实验(AGP和HI)验证,同接ELISA方法与AGP的符合率为74.4％,与HI的符合率为95.0％,说明该检测方法具有很高的灵敏性和特异性.