鸭星状病毒1型衣壳蛋白在原核表达系统中的截短表达

摘要

本研究旨在用原核表达系统对DAstV-1的衣壳蛋白进行截短表达,并制备高效价的特异性抗血清.用RT-PCR的方法扩增DAstV-1衣壳蛋白的N端(His-E1D)、中间部分(His-E2)和C端(His-E3)基因,分别构建原核重组质粒pET28a-E1D,pET28a-E2和pET28a-E3.将其转入Transetta(DE3)感受态细胞中进行诱导表达.SDS-PAGE结果显示成功获得重组蛋白.以纯化后的重组蛋白为免疫原,免疫BALB/c小鼠制备抗血清.Western Blot和间接免疫荧光结果显示,His-E1D、His-E2和His-E3的抗血清可分别与相应的融合蛋白特异性识别,并均可识别在sf9细胞中表达的rPORF2.