传染性造血器官坏死病毒核衣壳蛋白在杆状病毒表达系统中的表达及鉴定

摘要

采用RT-PCR方法从传染性造血器官坏死病病毒(IHNV)中扩增RNA获得1176 bp的核衣壳蛋白(N)基因,将其插入pFB-LIC-Bse杆状病毒载体中,构建了重组质粒pFB-LIC-Bse-N,转化至感受态细胞DH 10Bac中,获得重组杆粒rBacmid-N.再将其转染至sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒.IFA和western blot分析表明重组N蛋白可以被辣根过氧化物酶(HRP)标记的组氨酸单抗(anti-His)识别,表明IHNV N基因在昆虫细胞sf9中获得了正确表达.该研究为进一步研究N蛋白的功能和免疫学特性奠定了基础.