鸭星状病毒1型实时荧光定量PCR的建立

摘要

本研究旨在建立检测鸭星状病毒1型(Duck astrovirus1,DAstV-1)的实时荧光定量PCR(real-time fluorescent quantitative PCR,RT-qPCR).用该法可从DAstV-1D17株检出阳性结果,但检测DAstV-2、DAstV-3、鸭甲肝病毒1型(Duck hepatitis A virus1,DHAV-1)、DHAV-3、坦布苏病毒(Tembusu virus,TMUV)和鹅细小病毒(Goose parvovirus,GPV)的结果均为阴性.以10倍系列稀释的重组质粒为模板进行qPCR,最低检出量为79.2个拷贝.经组内和组间重复试验,确定各重复组之间的标准偏差均小于0.8,变异系数均小于6％.结果表明,所建立的方法具有良好的特异性、敏感性和可重复性.用该法检测感染试验中病死鸭组织,从肝、肾、心、脾、肺、脑和肠道均可检测DAstV-1,但以肝脏的病毒载量最高,表明DAstV-1具有较广的组织嗜性,而肝脏是其主要靶器官.