鸡输卵管特异性表达载体的构建与检测

摘要

目的:本研究旨在构建并检测鸡输卵管组织特异性表达载体.方法:以鸡心提取的基因组DN为模板扩增出约3 kb的卵清蛋白调控序列50V;应用基因重组技术以50V部分启动序列50V-1.7k替换pIRES2-FGFP载体中CMV启动子,构建特异性表达载体50V-pIRES2-EGFP.用脂质体将50V-pIRES2-EGFP或pIRES2-EGFP转染至鸡输卵管上皮细胞中,检测启动子的特异性.结果:通过PCR获得了卵清蛋白调控序列50V,并成功构建了50V-pIRES2-EGFP重组载体.在组织特异性载体50V-pIRES2-EGFP转染48 h的鸡输卵管上皮细胞中可以观察到绿色荧光的表达.上述结果表明,成功构建鸡输卵管上皮异性表达的载体,为进一步开展鸡输卵管特异表达外源蛋白的相关研究提供科学依据.