代谢木糖和葡萄糖的重组酿酒酵母的构建

摘要

本文采用PCR的方法克隆得到树干毕赤酵母木糖醇脱氢酶基因xy12,并将该基因和克隆得到的Candidashehatae缺终止子的木糖还原酶基因xy11一起连接到酵母表达载体pYES2的强启动子GAL下,得到融合表达载体pYES2-P12.通过醋酸锂转化的方法将pYES2-P12转入SaccharomycescerevisiaeYS58中,得到SaccharomycescerevisiaeYS58-12.利用所构建的重组酵母进行木糖发酵实验,结果表明该重组酵母菌能发酵木糖,使木糖利用率得到进一步提高,最高达到81.3﹪,而且能代谢木糖产生乙醇.进一步用PCR的方法克隆出了xks基因,为乙醇产量得到进一步的提高奠定基础.