猪肌肉组织蛋白分离电泳方法及染色效果的初步比较与分析

摘要

以中、外猪种蓝塘猪和大白猪背最长肌为材料,采用传统的SDS-PAGE凝胶电泳和双向电泳进行分析.在1D分析中,主要用到了两种染色方法--快速银染和胶体考染对凝胶进行处理,并比较两种方法各自的优缺点.根据两种染色法各自的特点分别对同一个样品进行了图像的初步分析,并根据图像算出蛋白质的迁移率,进一步估算蛋白质的分子量.对样品进行2D-PAGE电泳,发现了差异表达的蛋白.在运用12.5﹪的SDS-PAGE电泳分离出蛋白带数一般在10～20条,而在pH3～10的2-DE电泳中,则分离鉴别出100～150多个蛋白斑点.通过对结果的比较分析,双向电泳明显要比传统的SDS-PAGE凝胶电泳精确得多.而银染及胶体考染的SDS-PAGE凝胶中,银染后的凝胶其清晰度远远大于胶体考染的凝胶,更有利于对蛋白质条带进行分析.