蛋清蛋白质降压肽制备及纯化研究

摘要

本文采用碱性蛋白酶Alcalase酶解蛋清蛋白质制备降压肽,经单因素考察、多元线性回归设计和二次回归组合正交设计建立工艺模型,回归方程为：Y=25.9+0.25X1+3.94X2+5.46X3-2.31X1*X1-1.21X2*X2-0.67X3*X3+1.13X1*X2,经回归系数、回归方程和失拟检验表明该方程显著水平为0.01且拟合的很好,利用西尔维斯特不等式证明该方程存在极大值并求得极值点,x1=0.51,x2=1.86,x3=4.07。根据中心化处理公式和因素编码表,求得水解度极大值时对应各因素水平值分别为,Z1=10.1、Z2=56、Z3=8。即最佳酶解条件为：底物浓度为8%,酶解pH值为10,加酶量8%和酶解温度56℃,酶解时间为3h,测得蛋清蛋白质水解度为40%,抑制率为45%。酶解物经交联葡聚糖凝胶sephadex G-25分离,采用高效液相色谱法测定降压肽抑制血管紧张素转化酶活性,分离组分Ⅱ具有较高的抑制血管紧张素转化酶活性,IC50为0.18mg/ml。高效凝胶渗透色谱测定分离组分Ⅱ分子量主要分布在241.2198～509.6793。