羊种布鲁氏菌侵染HPT-8细胞cDNA文库的构建及EST序列功能分析

摘要

建立羊种布鲁氏菌027株侵染HPT-8细胞的cDNA文库。分别提取布鲁氏菌侵染20min、1h、2h、3h、4h后HPT-8细胞总RNA,逆转录合成cDNA,同源重组法构建布鲁氏菌侵染HPT-8细胞的cDNA文库,对文库63个克隆进行测序分析,采用BlastX和BlastN进行序列同源性比对,并将63个基因进行了功能分类。结果羊种布鲁氏菌027株侵染人胚胎滋养层cDNA文库的库容为L43x106,重组率为96.92％,插入片段大小在0.2-5kb,EST测序分析结果与转录、能量代谢、运输及细胞因子的相关基因所占比例较高。