银杏EPSP合酶的基因克隆及表达分析

摘要

本研究以银杏品种家佛手叶为试材,采用CTAB法提取银杏叶片RNA,利用RACE技术从银杏叶中克隆到EPSP合酶基因(GbEPSP)的cDNA序列.得到GbEPSP的cDNA长1404bp,包含最大阅读框(ORF)为1035bp,编码一个344氨基酸多肽序列；通过软件DNAssist 2.2预测编码蛋白质36.87KD,其等电点为5.75.进化树分析结果表明银杏EPSP合酶蛋白质序列与其他物种的EPSP合酶同源性较高.不同组织表达分析显示,EPSPs基因在银杏的叶和果中表达量最高,其次为茎,根中表达水平最低.草甘膦处理能显著诱导银杏EPSPs基因表达量升高,紫外能上调银杏EPSPs基因表达,ABA则诱导GbEPSPs表达量先升后降；温度对GbEPSPs具有不同的诱导作用,其中42℃高温诱导最显著,4h达最大值,后又迅速降低.