一种从贴底生长的脑胶质瘤细胞系U251MG获得细胞克隆球的方法

摘要

本发明公开一种从贴底生长的脑胶质瘤细胞系U251MG获得细胞克隆球的方法，包括如下步骤：将脑胶质瘤细胞置于常规有血清培养基中进行常规培养，让细胞贴底生长；培养7～20天后，收集悬浮脑胶质瘤细胞；离心处理悬浮脑胶质瘤细胞，弃去上清液，用HBSS液清洗剩余物；将清洗后的剩余物置于至少添加有生长因子的无血清培养基培养；培养10～20天后，即可获得脑胶质瘤克隆球，把悬浮的克隆球分离出来单独培养，贴底的克隆球和贴底细胞仍在一起培养，并定期更换培养基，即会持续不断地生长出来新的克隆球。本发明方法简便，且不用消化酶，也不用机械方法制得单细胞悬液，可持续地获得遗传背景完全一致的干细胞克隆球；可广泛用于干细胞理论研究、再生医学、新药开发。