本发明公开了一种反应专一性提高的腈水解酶突变体及其应用,属于酶工程技术领域。所述突变体由氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的水稻腈水解酶的第77位、200位、224位或226位进行单位点突变或多位点突变获得。本发明通过对反应非专一性水稻腈水解酶分子改造,获得反应专一性显著提高的突变体,有利于定向生成目的产物。本发明构建的突变体Y77E/R224S/V226R催化苯乙腈,反应主产物为苯乙酰胺,占产物含量的94.8%;构建的突变体K200R/R224W催化苯乙腈,反应主产物为苯乙酸,占产物含量的95.1%。反应专一性调控后的腈水解酶突变体在羧酸和酰胺类化合物的绿色合成中具有重要工业应用潜力。
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