酮酸还原酶、基因、工程菌及在合成手性芳香2-羟酸中的应用

摘要

本发明公开了一种酮酸还原酶、基因、工程菌及在合成手性芳香2‑羟酸中的应用，所述酮酸还原酶氨基酸序列为SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.8或SEQ ID NO.10之一所示；本发明提供一种来源于乳酸明串珠菌的高效酮酸还原酶，其能够催化广谱芳香族2‑酮酸，且以苯乙酮酸为底物的底物装载量由100mM提升至400mM。利用酮酸还原酶、2‑羟酸脱氢酶和葡萄糖脱氢酶建立的单菌双质粒三酶串联氧化还原级联体系，能够催化大多数外消旋芳香2‑羟酸高效去消旋化为手性芳香(R)‑2‑羟酸，收率和e.e.值均大于99％。最终应用于去消旋300mM邻氯扁桃酸制备光学纯(R)‑邻氯扁桃酸，收率高达83.8g/(L·d)。