一种谷氨酸脱羧酶基因的克隆及其应用

摘要

本发明涉及一种新型谷氨酸脱羧酶基因的克隆及其应用，从芽孢杆菌属得到的谷氨酸脱羧酶，将其在大肠杆菌中诱导表达并研究其性质发现，该酶在pH4.0~pH6.0时有较高活性，最适温度在45℃~60℃间，Vmax为150~200 U/mg，Km为7~9 mmol/L。将含有该酶的重组大肠杆菌做全细胞转化，通过分批补料添加500 g/L的L‑谷氨酸，在37℃，pH7.0的磷酸氢二钠‑磷酸二氢钠缓冲液中转化12 h，最终生成347.8 g/L的γ‑氨基丁酸，摩尔转化率为99.4%。这一新型谷氨酸脱羧酶与现有的谷氨酸脱羧酶相比，具有更高的催化效率且具有较广的pH范围，更适合于工业应用。