禽4型腺病毒(FAdV-4)载体系统及其应用

摘要

本发明提供一种重组禽腺病毒FAdV‑4载体系统，包括骨架质粒pKFAV4、中间质粒pKFAV4AP和穿梭质粒pKFAV4APNM。将目的基因编码区克隆到穿梭质粒的多克隆位点，NheI酶切携带目的基因表达框的穿梭质粒，用所得片段替换中间质粒的对应部位；再用AvrII或PacI酶切携带目的基因的中间质粒，借助连接反应或DNA组装反应将所得片段替换骨架质粒的对应部位，可获得重组腺病毒质粒；PmeI线性化腺病毒质粒转染LMH细胞，能够制备由人巨细胞启动子(CMVp)控制目的基因表达的重组FAdV‑4腺病毒。在制备的重组腺病毒中，FAdV‑4基因组Orf1‑Orf2区域由目的基因表达框替代，腺病毒的其他区域保留。预计其在鸟类口服疫苗研发中具有广阔的应用前景。