本发明属于基因工程技术领域,具体涉及一种编码易错DNA聚合酶及其制备方法。本发明易错DNA聚合酶的制备方法,包括以下步骤:(1)提取红球菌基因组DNA,测序,比对,得到易错DNA聚合酶基因序列SEQ ID NO:1;(2)克隆SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列,得到核苷酸片段;(3)将核苷酸片段和质粒pET32a进行连接,构建重组质粒;(4)将重组质粒转化到大肠杆菌感受态细胞E.coli BL21中,获得表达菌株;(5)利用LB液体培养基培养表达菌株,加入终浓度为0.5mM的IPTG诱导16‑20h,裂解菌体,纯化,获得重组易错DNA聚合酶,其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明提高了易错DNA聚合酶表达和纯化效率,以获得稳定、高活力的易错DNA聚合酶,提高易错效果。
展开▼