一种DNA染料结合聚合酶链反应检测鉴别植物病原细菌死活细胞

摘要

建立了一种将DNA染料(EMA)结合PCR的新分析方法, 用于有效检测区分植物病原细菌死活细胞. 结果表明, 当用2.0 mg/L或更高浓度的EMA渗透处理含有106 cfu/mL的死细胞菌悬液后再曝光处理10 min, 其PCR结果呈阴性, 而未经过EMA渗透处理的对应样品PCR结果呈阳性;EMA渗透处理含有适当数量病菌活细胞的种子浸泡液后, 更有助于特异性检测混合体系中靶标菌活细胞. 分析认为, 该方法避免了传统PCR无法区分细菌死活细胞的弊端, 是一种快速、灵敏且能有效鉴别病原细菌死活细胞的新方法.