一种抑制外显子剪切抑制子功能的反义寡核苷酸的筛选方法

摘要

本发明公开了一种抑制外显子剪切抑制子功能的反义寡核苷酸的筛选方法。包括如下步骤：1）获得靶基因的外显子剪切抑制子和临近的基因序列。2）根据序列设计和合成一系列经硫代修饰的反义寡核苷酸。3）将反义寡核苷酸转染到细胞中，并在24小时后提取总蛋白。用western杂交法确定与靶基因外显子剪切抑制子结合效果最好的反义寡核苷酸。4）根据步骤3）获得的反义寡核苷酸的序列，合成2'‑O‑Methyl和硫代修饰的反义寡核苷酸，并转染细胞，用RT‑PCR的方法确定其可以高效地抑制外显子剪切抑制子功能。该方法适用于经济地筛选可以高效地抑制外显子剪切抑制子功能的反义寡核苷酸，具有良好的开发和应用前景。