猪肌肉生长抑制素基因启动子及外显子Ⅰ CpG甲基化分析

摘要

本研究运用亚硫酸氢盐转化法对猪肌肉生长抑制素基因(MSTN)启动子和外显子Ⅰ的CpG位点甲基化状态进行分析.以BamH Ⅰ酶切并用琼脂糖包埋、亚硫酸氢盐转化法处理猪耳组织的基因组DNA,经PCR扩增后回收380bp的片段,克隆到pMD18-T载体,分别取莱芜猪和大白猪样本的14和10个克隆进行测序和比对.结果表明,猪肌肉生长抑制基因启动子的3个CpG位点和外显子Ⅰ的2个CpG位点的甲基化程度不同,且两品种外显子Ⅰ的第1个CpG位点的甲基化程度差异显著;对两个出生重不同的全同胞大白猪各16个克隆的测序分析表明,位于启动子区的第2个和第3个CpG位点以及位于外显子Ⅰ的第1个CpG位点的甲基化存在差异,基中启动子区的第2个和第3个CpG位点的甲基化程度呈负相关.总体上,出生重高的167号甲基化水平高于出生重低的156号大白猪.