昆虫定点基因敲入组合物及其使用方法和应用

摘要

本发明提供了一种用于昆虫定点基因敲入的组合物，所述组合物包含单切口酶或其编码多核苷酸；重组因子或其编码多核苷酸；和任选的，包含外源性基因的供体DNA。本发明还提供了相应的基因敲入方法以及制备转基因昆虫的方法。本发明的组合物及方法能在昆虫细胞中实现高效的同源重组整合，同时又能够避免现有基因敲入技术中的种种缺点，还能在昆虫细胞中稳定、高效地同源重组整合长达10kb以上片段，从而能在昆虫细胞中移入遗传学筛选标记，优选可视性的遗传学筛选标记，从而便于转基因昆虫品系的确立。