一种游离DNA文库构建方法以及游离DNA中低频突变的检测方法

摘要

本发明涉及一种游离DNA的文库构建方法，在单链游离DNA的3’端连接唯一序列标签，其中，唯一序列标签由随机序列和接头序列组成；加入PCR扩增用上游引物和下游引物进行PCR扩增，其中，上游引物为针对目标低频突变设计的引物，下游引物为与接头序列对应的引物。此外，本发明还涉及一种游离DNA中低频突变的检测方法，在单链游离DNA的3’端连接唯一序列标签，加入PCR扩增用上游引物和下游引物进行PCR扩增，上游引物和下游引物的一端分别与测序标签连接，将扩增后的DNA在Illumina平台上上机测序。本发明方法能够简单、高效的实现对cfDNA低频突变的检测，并可通过对cfDNA的检测，达到对胎儿遗传或者肿瘤细胞突变检测的目的。