红色毛癣菌角蛋白酶活性的测定方法

摘要

红色毛癣菌角蛋白酶活性的测定方法：⑴.含表皮、真皮结构人工皮肤的构建；将人皮肤成纤维细胞重悬于胶原蛋白溶液滴加至细胞培养孔板培养；细胞完全展开滴加人角质形成细胞悬液至胶原凝胶表面继续培养；凝胶表面人角质形成细胞完全铺满时进行气液面培养；角质层分化至5‑8层停止培养；⑵.红色毛癣菌的人工感染；⑶.角蛋白酶活性的测定。本发明构建的人工皮肤成为角蛋白酶产生的天然诱导剂；具有以下优点：一、人工皮肤含有真皮层、表皮层及5‑8层的角质层，结构和功能更接近人体皮肤；二、表皮层角质形成细胞分泌的角蛋白作为天然底物诱导角蛋白酶的产生；三、由天然底物角蛋白诱导产生的角蛋白酶，其活性测定更准确、更真实、更稳定。