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一种土壤中残留bt蛋白的原位酶联免疫定量检测方法

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本发明公开了一种土壤中残留Bt蛋白的原位酶联免疫定量检测方法，包括以下步骤：1）去除待测土样中的动植物残体，充分研磨，通过50‑60目筛子使得土壤粒径在0.2mm以下；2）将研磨后的土样在高压湿热条件下灭菌15‑20分钟；3）称取灭菌后的土样1‑2g，放入10ml离心管中进行清洗去除土壤杂质；4）对去除过杂质的土壤土样表面进行封闭；5）对封闭后的土壤土样进行抗体结合检测；本发明为监测Bt蛋白在土壤中的残留及其对土壤生态系统的影响提供了一条新的途径，而且本方法不仅仅可以用于土壤bt蛋白的检测，在更换不同的抗体后更可以用于检测各种土壤中的残留蛋白含量。

著录项

公开/公告号CN105137061B

专利类型发明专利
公开/公告日2016-09-14

原文格式PDF
申请/专利权人环境保护部南京环境科学研究所;
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申请/专利号CN201510452807.3
发明设计人方志翔;刘标;沈文静;李衍亮;
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申请日2015-07-28
分类号
代理机构南京苏高专利商标事务所(普通合伙);
代理人王艳
地址 210042 江苏省南京市玄武区蒋王庙8号
入库时间 2022-08-23 09:47:27

法律信息

法律状态公告日

法律状态信息

法律状态
2016-09-14

授权

授权
2016-01-06

实质审查的生效 IPC(主分类):G01N 33/535 申请日:20150728

实质审查的生效
2015-12-09

公开

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1. 一种土壤中残留bt蛋白的原位酶联免疫定量检测方法 [P] . 中国专利： CN105137061B . 2016.09.14
2. 定量检测转基因玉米中抗虫蛋白Vip3Aa20的酶联免疫试剂盒及其检测方法 [P] . 中国专利： CN107894510A . 2018-04-10
3. Process of preparation of protease antigenicas capture immunoassays in secrecoes or extractor of a different origin; the process of capture immunoassay for determination of competitive inbidores of ProteaIn biological fluids from different sources; the process for isolation of antigenos of interest in diagnosis; processes of detecao and quantificacao of proteases in extracts and / or biological fluids of origIn microbial, plant or animal; process of deteccao and quantificacao of inbidores of proteases in colulas, extracts and / or biological fluids of microbial origin.Plant or animal; the process of preparation of reagent for the diagnosis and the diagnostic kits [P] . BR9104287A . 1993-04-20

机译：蛋白酶抗原的制备方法，用于不同来源的稀壁蛋白或提取物中的蛋白酶捕获;用于确定来自不同来源的ProteaIn生物流体竞争性抑制物的捕获免疫测定过程;分离诊断中感兴趣的抗原的过程;微生物，植物或动物的提取物和/或生物流体中蛋白酶的检测和定量过程;植物或动物的菌毛，提取物和/或生物体液中蛋白酶抑制物的检测和定量的过程。诊断试剂和诊断试剂盒的制备过程
4. Preparation of isolated protein, substantially pure or recombinant, isolated trt protein, substantially pure or recombinant isolated trt protein, substantially pure or recombinant, isolated trt protein or a variant thereof, or a fragment, polynucleotide, synthetic, substantially pure or recombinant, isolated nucleic acid, encoding a trt protein, expression vector, transfected cell, non-human animal, or its progeny, transgenic non-human animal, antibody or its binding fragment, antibody, specifically immunoreactive under immunologically reactive conditions, for a trt protein or its immunogenic fragment, processes of determining whether a compound or treatment is a modulator of a trt activity or expression, of determining whether a test compound is a modulator of a trt activity, of preparing recombinant telomerase, to detect a trt gene product in a sample, to detect the presence of d and at least one telomerase positive human cell in a biological sample comprising human cells, to diagnos [P] . BR9711844A . 2000-01-18

机译：分离的蛋白质，基本上纯的或重组的分离的trt蛋白，基本上纯的或重组的分离的trt蛋白，基本上纯的或重组的分离的trt蛋白或其变体或片段，多核苷酸，合成的，基本上纯的或重组的分离的核酸的制备编码trt蛋白的酸，表达载体，转染的细胞，非人类动物或其后代，转基因非人类动物，抗体或其结合片段，抗体，在免疫反应条件下对trt蛋白或其免疫原具有特异性片段，确定化合物或处理是否是trt活性或表达的调节剂，确定测试化合物是否是trt活性的调节剂，制备重组端粒酶以检测样品中trt基因产物的过程，检测包含人细胞的生物样品中d和至少一种端粒酶阳性人细胞的存在，以进行诊断
5. Method for detecting and, if necessary, quantifying the activity of at least one protease inhibitor in a mixture to be analysed, and also application of the method for determining the (residual) activity of one (or more) separate (iso)type(s) of protease inhibitor(s) and application of the method for determining the total (residual) activity of a mixture, possibly after a processing process such as a process for the removal or inactivation of protease inhibitor(s). [P] . NL9301134A . 1995-01-16

机译：检测并在必要时定量待分析混合物中至少一种蛋白酶抑制剂活性的方法，以及该方法在确定一种（或多种）单独（同）型（残余）活性（残留）活性中的应用（一种或多种）蛋白酶抑制剂和确定混合物的总（残余）活性的方法的应用，可能在诸如蛋白酶抑制剂的去除或失活过程等加工过程之后。