一种用于筛选微生物胞外胶原酶的酶谱方法

摘要

本发明公开了一种用于筛选微生物胞外胶原酶的酶谱方法，以利用胶原酶对胶原蛋白的特异性降解作用对胶原酶进行酶谱分析。电泳过程中所采用的凝胶为在10％SDS-PAGE凝胶中添加质量体积比浓度为0.1％的Ⅰ型胶原蛋白。凝胶的处理过程为：电泳结束后先将凝胶用洗脱液振荡洗脱，随后用漂洗液振荡漂洗，最后将凝胶用孵育液在37℃下静置孵育12h；孵育结束后将凝胶先经考马斯亮蓝R-250染色液染色1h，再经脱色液室温振荡脱色直至透明条带清晰。该方法将Ⅰ型胶原蛋白配制到SDS-PAGE凝胶中,凝胶中Ⅰ型胶原蛋白的终浓度为0.1％，在该底物浓度下，胶原酶负染条带以及标准蛋白质标准条带能够同时在凝胶上显色，填补了胶原酶酶谱检测领域的技术空白。