用于测定胸苷激酶活性的方法和试剂盒及其用途

摘要

描述了用于测定生物学样品中的胸苷激酶(TK)活性的方法和测定试剂盒，所述生物学样品例如血液、血清、血浆、脑脊液(CSF)、胸膜液、腹水、组织、细胞及其提取物。该方法包括使溶于缓冲液的基本反应混合物与生物学样品接触，所述基本反应混合物包括：固体表面附着的引物和/或模板，修饰的脱氧核苷，例如溴脱氧尿苷、碘脱氧尿苷、氟脱氧尿苷或乙烯基脱氧胸苷作为激酶底物，磷酸供体，核苷酸聚合酶，和缺乏TK活性的激酶来源，例如酵母提取物。温育后，测定已掺入固体表面附着的引物和/或模板的修饰的脱氧核苷的量，并且生物学样品中存在的TK活性与掺入的修饰的脱氧核苷的量成正比。该方法和测定试剂盒在细胞增殖病症或疾病例如癌症的诊断、疾病进展的预后监控和治疗作用中，以及在影响酶促途径的化合物例如新药候选物的筛选中有用，所述化合物可以阻碍胸苷磷酸的形成或干扰核酸合成。