KLK14蛋白亲和层析纯化人重组SPINK6蛋白的方法

摘要

本发明公开了一种人重组SPINK6蛋白的亲和层析纯化方法，包括：将人重组KLK14蛋白与亲和层析介质混合，偶联反应，制得人重组KLK14蛋白亲和层析介质；将人重组SPINK6蛋白通过预先用缓冲液A平衡好的装有上述的胰蛋白酶亲和层析介质的层析柱；然后用缓冲液A清洗上样后的人重组KLK14蛋白亲和层析柱；再用缓冲液B将SPINK6蛋白从层析柱上洗脱，并收集洗脱峰。采用本发明的方法，人重组SPINK6蛋白的活性回收率为45-60％，纯度可达90％-95％，蛋白纯化倍数为10-20倍以上。本发明方法处理速度快、重复性好、柱效长且结合效率基本不变。