一种识别HIV-1受体结合表位的可溶性单链抗体的制备方法

摘要

本发明公开了一种识别HIV-1受体结合表位的可溶性单链抗体的制备方法，采用化学合成的方法获得b12抗体重链和轻链的可变区，用重叠PCR方法拼接得到scFv基因，利用原核表达系统，在室温和IPTG终浓度为0.5mM的条件下，诱导表达的b12-scFv大约有70％以可溶性蛋白的形式存在，用镍柱一步纯化便可获得高纯度的可溶性scFv，从1L培养液中能获得约2mg纯化的可溶性蛋白。本发明获得的b12单链抗体可溶性好，表达量尚佳，纯化过程简单，抗原结合能力好。用基因工程的方法在体外大量制备该抗体，可用于艾滋病的被动免疫防治；在基于包膜蛋白的HIV-1重组疫苗的设计中，也可用于b12抗原表位的检测，在HIV-1的被动免疫治疗和免疫原检测中具有一定的应用前景。