作为ENT抑制剂用于治疗癌症的嘧啶并5,4-d嘧啶衍生物及其与腺苷受体拮抗剂的组合

摘要

本发明涉及式I的嘧啶并[5,4‑d]嘧啶衍生物，包括其药学上可接受的盐和溶剂化物。本发明的化合物是ENT家族转运蛋白特别是ENT1的抑制剂，并且可用作治疗癌症的治疗性化合物。本发明还涉及嘧啶并[5,4‑d]嘧啶衍生物与腺苷受体拮抗剂在治疗癌症中的组合应用。

说明书

发明领域

本发明涉及嘧啶并[5,4-d]嘧啶衍生物，包括其药学上可接受的盐和溶剂化物。本发明的化合物是ENT家族转运蛋白特别是ENT1的抑制剂，并且可用作治疗性化合物，特别是在癌症的治疗。本发明还涉及本发明的嘧啶并[5,4-d]嘧啶衍生物与腺苷受体拮抗剂在治疗癌症中的组合应用。

发明背景

平衡型核苷转运蛋白(ENT)家族，也称为SLC29，是一组将核苷底物转运至细胞内的质膜转运蛋白。有四种已知的ENT，分别是ENT1、ENT2、ENT3和ENT4。

腺苷是ENT的内源性底物之一，是许多功能的有效的生理和药理调节剂。腺苷的细胞信号传递是通过四种已知的G蛋白偶联腺苷受体A1、A2A、A2B和A3进行的。通过影响这些受体可利用的腺苷浓度，ENT在不同的生理过程例如冠状动脉血流量的调节、炎症和神经传递中发挥重要的调节作用(Griffith DA和Jarvis SM，Biochim Biophys Acta，1996，1286，153-181；Shryock JC和Belardinelli L，Am J Cardiol，1997，79(12A)，2-10；Anderson CM等人，J Neurochem，1999，73，867-873)。

多种药物如地拉齐普(dilazep)、潘生丁(dipyridamole)和曲氟嗪(draflazine)与ENT相互作用并改变腺苷水平，并因其心脏保护或血管舒张作用而被开发。

腺苷也是一种有效的免疫抑制代谢物，经常发现其在胞外肿瘤微环境(TME)中升高(Blay J等人，Cancer Res，1997，57，2602-2605)。胞外腺苷主要由胞外核苷酸酶CD39和CD73转化ATP产生(Stagg J和Smyth MJ，Oncogene，2010，2，5346-5358)。腺苷激活四种G蛋白偶联受体亚型(A1、A2A、A2B和A3)。特别地，A2A受体的激活被认为是先天和适应性免疫细胞抑制的主要驱动力，其导致抗肿瘤免疫反应的抑制(Ohta和Sitkovsky，Nature，2001，414，916-920)(Stagg和Smyth，Oncogene，2010，2，5346-5358)(Antonioli L等人，NatureReviews Cancer，2013，13，842-857)(Cekic C和Linden J，Nature Reviews，Immunology，2016，16，177-192)(Allard B等人，Curr Op Pharmacol，2016，29，7-16)(Vijayan D等人，Nature Reviews Cancer，2017，17，709-724)。

申请人先前在PCT/EP2019/076244中证明，腺苷及ATP显著抑制T细胞增殖和细胞因子分泌(IL-2)，并强烈降低T细胞生存力。通过使用ENT抑制剂成功地恢复了腺苷和ATP介导的对T细胞生存力和增殖的抑制。此外，将ENT抑制剂与腺苷受体拮抗剂组合使用，不仅能够恢复腺苷和ATP介导的对T细胞生存力和增殖的抑制，而且能够恢复T细胞细胞因子分泌。这些结果表明，单独的或与腺苷受体拮抗剂组合的ENT抑制剂可用于治疗癌症。

如上所述，潘生丁是已知的ENT抑制剂。潘生丁在体外具有有前景的效力，特别是对ENT1(在含有2％人血清白蛋白的实验条件下，IC

为了提高ENT1和ENT2抑制作用，提出了其它潘生丁类似物(Lin等人，J.Med.Chem.，2007，50，3906-3920)。然而，并没有研究这些类似物与AGP的结合。

因此，仍然需要更有效的ENT抑制剂，尤其是ENT1抑制剂，其与AGP的结合弱，这能够确保血浆中化合物高的游离分数，以用于单独或与腺苷受体拮抗剂组合治疗癌症。

为此，申请人在此提供了下面详述的式I的嘧啶并[5,4-d]嘧啶衍生物。

发明内容

因此，本发明涉及式I的化合物：

或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R

根据一个实施方案，本发明的化合物具有如下文定义的式Ia或式Ia1。优选地，本发明的化合物选自下表1中列出的化合物。

本发明还涉及本发明的式I的化合物，其用作药物。特别地，它涉及用于治疗癌症的本发明的式I的化合物。

本发明还涉及包含根据本发明的化合物和至少一种药学上可接受的赋形剂的药物组合物。

在一个实施方案中，根据本发明的药物组合物还包含腺苷受体拮抗剂。特别地，本发明提供了药物组合物，其包含：

(a)有效量的根据本发明的化合物；

(b)有效量的腺苷受体拮抗剂；和

(c)至少一种药学上可接受的赋形剂。

在一个实施方案中，腺苷受体拮抗剂是A2A受体拮抗剂或A2B受体拮抗剂。

在一个实施方案中，腺苷受体拮抗剂选自：

5-溴-2,6-二-(1H-吡唑-1-基)嘧啶-4-胺；

(S)-7-(5-甲基呋喃-2-基)-3-((6-(([四氢呋喃-3-基]氧基)甲基)吡啶-2-基)甲基)-3H-[1,2,3]三唑并[4,5-d]嘧啶-5-胺；

6-(2-氯-6-甲基吡啶-4-基)-5-(4-氟苯基)-1,2,4-三嗪-3-胺；

3-(2-氨基-6-(1-((6-(2-羟基-2-丙基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)嘧啶-4-基)-2-甲基苯甲腈；

2-(2-呋喃基)-7-(2-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-1-哌嗪基)乙基)-7H-吡唑并(4,3-e)(1,2,4)三唑并(1,5-c)嘧啶-5-胺；

3-(4-氨基-3-甲基苄基)-7-(2-呋喃基)-3H-(1,2,3)三唑并(4,5-d)嘧啶-5-胺；和

4-羟基-N-(4-甲氧基-7-吗啉代苯并[d]噻唑-2-基)-4-甲基哌啶-1-甲酰胺。

在另一个实施方案中，腺苷受体拮抗剂是式(II)的化合物：

或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R

本发明还涉及组合，包含：

(a)有效量的根据本发明的化合物；和

(b)有效量的腺苷受体拮抗剂。

在一个实施方案中，在组合中，腺苷受体拮抗剂是A2A受体拮抗剂或A2B受体拮抗剂，并且优选地选自上面列出的那些。

本发明还涉及试剂盒，包含：

(a)含有有效量的根据本发明的式I的化合物的第一部分；和

(b)含有有效量的腺苷受体拮抗剂的第二部分。

在一个实施方案中，在所述试剂盒中，腺苷受体拮抗剂是A2A受体拮抗剂或A2B受体拮抗剂，并且优选地选自上面列出的那些。

本发明还涉及根据本发明的组合、药物组合物或试剂盒，其用于治疗癌症。在一个实施方案中，在施用腺苷受体拮抗剂之前、同时或之后施用根据本发明的化合物。

本发明还涉及抑制有需要的患者体内ENT1的方法，包括：给所述患者施用有效量的本发明的式I的化合物。

本发明还涉及治疗有需要的患者癌症的方法，包括：给所述患者施用有效量的本发明的式I的化合物。

本发明还涉及治疗有需要的患者癌症的方法，包括：给所述患者施用根据本发明的式I的化合物和腺苷受体拮抗剂的组合。在一个实施方案中，在施用腺苷受体拮抗剂之前、同时或之后施用根据本发明的式I的化合物。在一个实施方案中，腺苷受体拮抗剂是A2A受体拮抗剂或A2B受体拮抗剂。在一个实施方案中，腺苷受体拮抗剂选自上面列出的那些。

定义

在本发明中，以下术语具有以下含义：

术语“醛”是指基团–CHO。

术语“烯基”是指不饱和烃基基团，其可以是直链或带支链的，包含一个或多于一个碳-碳双键。合适的烯基基团包含2个至6个碳原子，优选2个至4个碳原子，更优选2个至3个碳原子。烯基基团的实例是乙烯基、2-丙烯基、2-丁烯基、3-丁烯基、2-戊烯基及其同分异构体、2-己烯基及其同分异构体、2,4-戊二烯基等。

术语“烯基羰基”是指基团-(C＝O)-烯基，其中烯基如本文所定义。

术语“烯基羰基氨基”是指基团-NH-(C＝O)-烯基，其中烯基如本文所定义。

术语“烷氧基”是指基团-O-烷基，其中烷基如本文所定义。

术语“烷基”是指式C

术语“烷基氨基烷基”是指基团-烷基-NH-烷基，其中烷基如本文所定义。

术语“烷基氨基烷基氨基羰基”是指基团-(C＝O)-NH-烷基-NH-烷基，其中烷基如本文所定义。

术语“(烷基氨基烷基)(烷基)氨基羰基”是指基团-(C＝O)-NR

术语“烷基氨基烷基羰基”是指基团-(C＝O)-烷基-NH-烷基，其中烷基如本文所定义。

术语“烷基羰基”是指基团-(C＝O)-烷基，其中烷基如本文所定义。

术语“烷基羰基氨基”是指基团-NH-(C＝O)-烷基，其中烷基如本文所定义。

术语“烷基羰基氧基烷基”是指基团-烷基-O-(C＝O)-烷基，其中烷基如本文所定义。

术语“烷基杂芳基”是指被烷基基团取代的任意杂芳基，其中烷基如本文所定义。

术语“烷氧基烷基”是指基团-烷基-O-烷基，其中烷基如本文所定义。

术语“烷氧基烷氧基”是指基团-O-烷基-O-烷基，其中烷基如本文所定义。

术语“烷氧基羰基”是指基团-(C＝O)-O-烷基，其中烷基如本文所定义。

术语“烷基磺酰基”是指基团-SO

术语“烷基磺酰基氨基烷基”是指基团-烷基-NH-SO

术语“烷基磺酰基烷基”是指基团-烷基-SO

术语“烷基磺酰亚胺基”是指基团-S(＝O)(＝NH)-烷基，其中烷基如本文所定义。

术语“烷基亚砜”是指基团-(S＝O)-烷基，其中烷基如本文所定义。

术语“烷基亚砜烷基”是指基团-烷基-SO-烷基，其中烷基如本文所定义。

术语“炔烃”是指一类单价不饱和烃基基团，其中不饱和度源于一个或多于一个碳-碳三键的存在。炔基基团通常并优选具有与上述烷基相同的碳原子数。炔基基团的非限制性实例是乙炔基、2-丙炔基、2-丁炔基、3-丁炔基、2-戊炔基及其同分异构体、2-己炔基及其同分异构体等。

术语“炔烷基”是指基团-烷基-炔，其中烷基和炔如本文所定义。

术语“氨基”是指基团–NH

术语“氨基烷基”是指基团-烷基-NH

术语“氨基烷基氨基羰基”是指基团-(C＝O)-NH-烷基-NH

术语“氨基烷基羰基氨基”是指基团-NH-(C＝O)-烷基-NH

术语“氨基羰基”或“氨基羧基”是指基团-(C＝O)-NH

术语“(氨基羰基烷基)(烷基)氨基”是指基团-NR

术语“氨基羰基烷基氨基”是指基团-NH-烷基-(C＝O)-NH

术语“氨基磺酰基”是指基团-SO

术语“芳基”是指具有单环(即苯基)或稠合在一起的多于一个芳环(例如萘基)的多不饱和芳族烃基基团，通常含有5个至12个原子、优选5个至10个；更优选芳基是5元芳基或6元芳基。芳基的非限制性实例包括苯基、萘基。

术语“芳基烷基”是指基团-烷基-芳基，其中烷基和芳基如本文所定义。

术语“芳氧基烷基”是指基团-烷基-O-芳基，其中烷基和芳基如本文所定义。

术语“羰基”是指基团-(C＝O)。

术语“羰基氨基”是指基团-NH-(C＝O)-。

术语“氰基”是指基团-CN。

术语“氰基”是指基团-烷基-CN，其中烷基如本文所定义。

术语“环烷基”是指环状烷基基团，也就是说，具有1个或2个环状结构的单价饱和或不饱和烃基基团。环烷基包括单环或双环烃基基团。环烷基基团可以在环中包含3个或多于3个碳原子，根据本发明，通常包含3个至10个、更优选3个至8个碳原子；更优选地，环烷基是5元环烷基或6元环烷基。环烷基基团的实例包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环己基。

术语“环烷氧基”是指基团-O-环烷基，其中环烷基如本文所定义。

术语“二烷基氨基”是指基团-NR

术语“二烷基氨基烷基”是指基团-烷基-NR

术语“二烷基氨基烷基氨基羰基”是指基团-(C＝O)-NH-烷基-NR

术语“二烷基氨基烷基羰基”是指基团-(C＝O)-烷基-NR

术语“二羟基烷基”是指如本文所定义的被两个羟基(-OH)基团取代的烷基基团。

术语“卤素”是指氟、氯、溴或碘。

术语“卤代烷基”是指其中一个或多于一个氢原子被卤素原子取代的烷基基团。

术语“卤代烷氧基”是指基团-O-卤代烷基，其中烷基如本文所定义。

术语“杂芳基”是指本文定义的芳基基团，其中至少一个碳原子被杂原子取代。换句话说，它是指5个至12个碳原子的芳族单环或包含稠合在一起的通常包含5个至6个原子的2个环的环系；其中一个或多于一个碳原子被氧、氮和/或硫原子取代，其中氮和硫杂原子可以任选地被氧化，氮杂原子可以任选地被季铵化。这种杂芳基的非限制性实例包括：吡咯基、呋喃基、噻吩基、吡唑基、咪唑基、

术语“杂芳基烷基”是指基团-烷基-杂芳基，其中烷基和杂芳基如本文所定义。

术语“杂环基”或“杂环”是指在至少一个含碳原子的环中具有至少一个杂原子的非芳族、完全饱和或部分不饱和的环状基团(例如，3元至7元单环，7元至11元双环，或包含总共3个至10个环原子)。优选地，杂环基是5元杂环基或6元杂环基。含有杂原子的杂环基团的每个环可以具有1个、2个、3个或4个选自氮原子、氧原子和/或硫原子的杂原子，其中氮和硫杂原子可以任选地被氧化，氮杂原子可以任选地被季铵化。如果化合价允许，杂环基团可以连接在环或环系的任意杂原子或碳原子上。多环杂环的环可以通过一个或多于一个螺环原子稠合、桥连和/或连接。非限制性的示例性杂环基团包括哌啶基、哌嗪基、氮杂环丁基、氮杂环辛基、二氮杂环庚基、二氮杂环辛基、吗啉-4-基、氧杂氮杂环庚基、吡咯烷基、硫代吗啉-4-基、四氢呋喃基，四氢吡喃基、氮丙啶基、环氧乙烷基、硫杂环丙烷基、2-咪唑啉基、吡唑烷基、咪唑烷基、异

术语“杂环基烷基”是指基团-烷基-杂环基，其中烷基和杂环基如本文所定义。

术语“杂环基烷基氨基羰基”是指基团–(C＝O)-NH-烷基-杂环基，其中烷基和杂环基如本文所定义。

术语“(杂环基)(烷基)氨基烷基”是指基团烷基-NR

术语“杂环基烷氧基烷基”是指基团-烷基-O-烷基-杂环基，其中烷基和杂环基如本文所定义。

术语“杂环基羰基”是指基团-(C＝O)-杂环基，其中杂环基如本文所定义。

术语“杂环基氧基”指基团-O-杂环基，其中杂环基如本文所定义。

术语“杂环基磺酰基”是指基团-SO

术语“羟基”是指基团-OH。

术语“羟烷基”是指基团-烷基-OH，其中烷基如本文所定义。

术语“羟烷基氨基烷基”是指基团-烷基-NH-烷基-OH，其中烷基如本文所定义。

术语“羟基羰基”是指基团-C(＝O)-OH，其中羰基如本文所定义。换句话说，“羟基羰基”对应于羧酸基团。

术语“氧代”是指a＝O取代基。

术语“磺酰基氨基”是指基团-NH-SO

术语“中间体”或“中间体化合物”是指在化学合成过程中产生的化合物，其本身不是最终产物，但用于产生最终产物的进一步反应中。在复杂的合成过程中，起始原料和最终产品之间可能有许多不同的中间体化合物。

数字前的术语“约”包括所述数字值的正负10％或少于10％。应当理解，术语“约”所指的值本身也是明确地和优选地被公开的。

术语“施用”是指将活性剂或活性成分单独或作为药学上可接受的组合物的一部分提供给待治疗或预防其病症、症状或疾病的患者。

术语“拮抗剂”是指天然或合成的化合物，其与蛋白质结合并阻断蛋白质的生物活性，从而阻断所述蛋白质的作用。蛋白质可以是受体，即从胞外接收化学信号的蛋白质分子。因此，“腺苷受体拮抗剂”包括任意化学实体，其在对患者施用后，导致与患者腺苷受体激活相关的生物活性的抑制或下调，包括其天然配体与腺苷受体结合产生的任意下游生物效应。这种腺苷受体拮抗剂包括能够阻断腺苷受体激活或腺苷受体激活的任意下游生物效应的任意药剂。

术语“抑制剂”是指具有抑制或显著降低或下调基因和/或蛋白质表达的生物学效应，或者具有抑制或显著降低蛋白质生物活性的生物效应的天然或合成化合物。因此，“ENT抑制剂”或“ENT家族转运蛋白的抑制剂”是指具有抑制或显著降低或下调ENT家族转运蛋白生物活性的生物效应的化合物。

术语“化疗”指的是一种癌症治疗类型，其使用一种或多于一种抗癌药物(化疗剂)作为标准化化疗方案的一部分。化疗可以是为了治疗，也可以是为了延长生命或减轻症状。化疗剂例如选自抗癌烷化剂、抗癌抗代谢物、抗癌抗生素、植物来源的抗癌剂、抗癌铂配位化合物及其任意组合。

术语“激素疗法”是指在医学治疗中使用激素。在一个实施方案中，激素疗法是肿瘤激素疗法。

术语“人”是指处于任意发育阶段(即新生儿、婴儿、少年、青少年、成人)的两性对象。

术语“患者”是指哺乳动物，更优选人，其正在等待接受或正在接受医疗护理或将成为医疗程序的对象。

术语“免疫疗法”指的是旨在诱导和/或增强针对特定靶标例如针对癌细胞的免疫反应的疗法。免疫疗法可包括使用检查点抑制剂、检查点激动剂(也称为T细胞激动剂)、IDO抑制剂、PI3K抑制剂、腺苷受体抑制剂、腺苷生产酶抑制剂、过继转移、治疗性疫苗及其组合。

表述“药学上可接受的”是指药物组合物的成分彼此相容，并且对其施用的对象无害。

表述“药学上可接受的载体、稀释剂、赋形剂和/或佐剂”是指当施用于动物优选人时不会产生不利的、过敏的或其它不良反应的物质。它包括任意和所有非活性物质，例如溶剂、助溶剂、抗氧化剂、表面活性剂、稳定剂、乳化剂、缓冲剂、pH调节剂、防腐剂(或保藏剂)、抗菌剂和抗真菌剂、等渗调节剂、造粒剂或黏合剂、润滑剂、崩解剂、助流剂、稀释剂或填充剂、吸附剂、分散剂、悬浮剂、包衣剂、膨胀剂、释放剂、吸收延迟剂、甜味剂、调味剂等。对于人体施用，制剂应符合监管机构如FDA局或EMA所要求的无菌性、热原性、一般安全性和纯度标准。

本文使用的术语“预防”是指延迟或阻止病症或疾病和/或其伴随症状发作、阻止患者获得病症或疾病、或降低患者获得病症或疾病的风险的方法。

本文使用的术语“前药”是指式(I)化合物的药理学上可接受的衍生物，例如酯或酰胺，其体内生物转化产物产生生物活性药物。前药通常以生物利用度增加为特征，并且在体内容易代谢成生物活性化合物。

术语“放射疗法”是指采用各种辐射如X射线、γ射线、中子射线、电子束、质子束和辐射源治疗癌症的方法。它被用作癌症治疗的一部分，以控制或杀死恶性细胞。如果放射疗法局限于身体的一个部位，它可以治愈多种癌症。它也可用作辅助治疗的一部分，以防止原发性恶性肿瘤切除手术后的肿瘤复发。放射治疗的三个主要部分是：体外放射治疗(EBRT或XRT)、近距离放射疗法或密封源放射疗法、和全身放射性同位素疗法(RIT)或非密封源放射疗法。

术语“治疗有效量”或“有效量”或“治疗有效剂量”指活性成分的量或剂量，其旨在(1)延迟或预防对象中癌症的发作；(2)降低癌症的严重性或发病率；(3)减缓或停止影响对象的癌症的一种或多于一种症状的进展、加剧或恶化；(4)改善影响对象的癌症症状；或(5)治愈影响对象的癌症，而不会对对象造成显著的负面或不利的副作用。可以在癌症发作之前施用治疗有效量以起到预防作用。代替地或另外地，治疗有效量可以在癌症开始后施用以起到治疗作用。

术语“治疗”是指治疗性处理；其中目的是预防或减缓目标病理状况或疾病。如果在接受根据本发明的治疗后，对象或哺乳动物表现出以下一种或多于一种的可观察到的和/或可测量的减少或不存在，则对象或哺乳动物成功地“治疗”了疾病或病症：减少癌细胞的数量、和/或在一定程度上缓解与特定疾病或病症相关的一种或多于一种症状、降低发病率和死亡率、改善生活质量问题。上述用于评估疾病的成功治疗和改善的参数可通过医生熟悉的常规方法容易地测量。

术语“干细胞移植”是指患者接受健康的造血细胞(干细胞)来替代被疾病、辐射或作为该过程的一部分施用的高剂量抗癌药物破坏的自身造血细胞的过程。健康的干细胞可以来自患者的血液或骨髓，来自捐赠者，或者来自新生婴儿的脐带血。干细胞移植可以是自体的(使用患者自己在治疗前收集和保存的干细胞)、同种异体的(使用非同卵双胞胎捐献的干细胞)或同基因的(使用同卵双胞胎捐献的干细胞)。

术语“对象”指哺乳动物，优选人。在一个实施方案中，对象被诊断患有癌症。在一个实施方案中，对象是患者，优选人类患者，其正在等待接受或正在接受医疗护理，或者曾经是/将要成为医疗程序的对象，或者正在监测疾病(例如癌症)的发展或进展。在一个实施方案中，对象是接受治疗和/或监测癌症发展或进展的人类患者。在一个实施方案中，对象为男性。在另一个实施方案中，对象为女性。在一个实施方案中，对象是成年人。在另一个实施方案中，对象是儿童。

具体实施方式

化合物-ENT抑制剂

因此，本公开提供了嘧啶并[5,4-d]嘧啶衍生物，其可用作ENT抑制剂。在一个实施方案中，本公开因此提供了式A的化合物：

或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中

R

R

或者R

R

R

或者R

R

R

R

R

每个R

因此，本公开提供了嘧啶并[5,4-d]嘧啶衍生物，其可用作ENT抑制剂。在一个实施方案中，本公开因此提供了式B的化合物：

或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中

R

或者R

R

R

或者R

R

R

R

每个R

在一个实施方案中，本公开因此提供了式I的化合物：

或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中

R

或者R

R

R

或者R

R

R

或者R

R

每个R

在一个实施方案中，在式I中：

R

或者R

R

R

或者R

R

R

R

在一个实施方案中，在式I中：

R

或者R

R

R

或者R

R

R

R

在一个实施方案中，式I的化合物具有式Ia：

/>

或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中

R

R

R

A表示CH，N或SO

R

R

在一个实施方案中，式Ia化合物具有式Ia1：

或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中

R

R

R

在一些实施方案中，R

或者R

其中每个R

在一些实施方案中，R

在一些实施方案中，R

R

在一些实施方案中，R

在一些实施方案中，R

在一些实施方案中，R

在一些实施方案中，R

在一些实施方案中，R

/>

/>

/>

/>

在一些实施方案中，R

在一些实施方案中，R

R

在一些实施方案中，R

在一些实施方案中，R

在一些实施方案中，R

在一些实施方案中，R

/>

/>

在一些实施方案中，R

在一些实施方案中，R

本发明特别优选的式I的化合物结构列于下表1中。

表1

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

及其药学上可接受的盐和溶剂化物。

表1的化合物使用

在一个实施方案中，本发明还涉及式I及其子式的化合物的盐、溶剂化物、对映异构体、同分异构体(包括旋光异构体、几何异构体和互变异构体)、多晶型物、多组分复合物、液晶、前药、以及同位素标记的式I及其子式的化合物。

在一个实施方案中，本发明涉及式I及其子式的化合物的对映异构体和同分异构体(包括旋光异构体、几何异构体和互变异构体)。事实上，式I及其子式的化合物可以含有不对称中心，因此可以以不同的立体异构形式存在。因此，本发明包括所有可能的立体异构体，不仅包括外消旋化合物，还包括单个对映异构体及其非外消旋混合物。当需要单一对映体的化合物时，其可以通过立体专一性合成，通过拆分最终产物或任意方便的中间体化合物，或通过本领域已知的手性色谱方法获得。终产物、中间体化合物或原料的拆分可以通过本领域已知的任意合适的方法进行。

在一个实施方案中，本发明还涉及式I及其子式的化合物的盐。特别地，本发明的化合物可以是药学上可接受的盐的形式。式I的化合物及其子式的药学上可接受的盐包括其酸加成盐和碱盐。合适的酸加成盐由形成无毒盐的酸形成。实例包括乙酸盐、己二酸盐、铵盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、碳酸氢盐/碳酸盐、硫酸氢盐/硫酸盐、酒石酸氢盐、硼酸盐、乙二胺四乙酸钙、樟脑磺酸盐、柠檬酸盐、克拉维酸盐、甜蜜素、二盐酸盐、乙二胺四乙酸盐、乙二磺酸盐、依托酸盐、乙磺酸盐、甲酸盐、延胡索酸盐、葡庚糖酸盐、葡糖酸盐、葡糖醛酸盐、谷氨酸盐、对α-羟乙酰氨基苯胂酸盐、六氟磷酸盐、己基间苯二酚盐、羟苯甲酸盐(hibenzate)、海巴明青霉素、盐酸盐/氯化盐、氢溴酸盐/溴化盐、氢碘酸盐/碘化盐、羟萘甲酸盐、羟乙磺酸盐、异硫代硫酸盐、乳酸盐、乳糖酸盐、月桂酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、扁桃酸盐、甲磺酸盐、甲基溴盐、N-甲基葡糖胺盐、甲基硝酸盐、甲基硫酸盐、黏酸盐、panoate、naphthylate、2-萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、油酸盐、乳清酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、双羟萘酸盐、泛酸盐、磷酸盐/磷酸氢盐/磷酸二氢盐、聚半乳糖醛酸盐、焦谷氨酸盐、蔗糖盐、水杨酸盐、硬脂酸盐、次乙酸盐、琥珀酸盐、鞣酸盐、酒石酸盐、茶氯酸盐、甲苯磺酸盐、triethiodide、三氟乙酸盐、戊酸盐和昔萘酸盐。优选的药学上可接受的酸加成盐包括盐酸盐/氯化盐、氢溴酸盐/溴化盐、硫酸氢盐/硫酸盐、硝酸盐、柠檬酸盐、甲苯磺酸盐、苯磺酸盐和乙酸盐。合适的碱盐由形成无毒盐的碱形成。实例包括铝盐、氨盐、精氨酸盐、苄星青霉素盐、N-苄基苯乙基-胺盐、钙盐、氯普鲁卡因盐、胆碱盐、N,N’-二苄基亚乙基二胺盐、二乙醇胺盐、二乙胺盐、2-(二乙基氨基)乙醇盐、二乙醇胺盐、乙醇胺盐、乙二胺盐、甘氨酸盐、锂盐、赖氨酸盐、镁盐、葡甲胺盐、N-甲基-谷氨酰胺盐、吗啉盐、4-(2-羟乙基)吗啉盐、乙醇胺盐、鸟氨酸盐、哌嗪盐、钾盐、普鲁卡因盐、钠盐、氢氧化四甲铵盐、三(羟甲基)氨基乙烷盐、三乙醇胺盐和锌盐。也可以形成酸和碱的半盐，例如半硫酸盐和半钙盐。当本发明的化合物含有供氢杂原子(例如NH)时，本发明还包括通过将所述氢原子转移到分子内的碱性基团或原子而形成的盐和/或同分异构体。

式I的化合物及其子式的药学上可接受的盐可以通过以下这些方法中的一种或多于一种制备：

(i)使式I的化合物与所需的酸反应；

(ii)使式I的化合物与所需的碱反应；

(iii)通过从式I的化合物的合适前体中除去对酸或碱不稳定的保护基团，或者通过使用所需的酸开环合适的环状前体，例如内酯或内酰胺；或者

(iv)通过与合适的酸反应或通过合适的离子交换柱，将式I的化合物的一种盐转化为另一种盐。

所有这些反应通常在溶液中进行。盐可以从溶液中沉淀出来，通过过滤收集，或者可以通过蒸发溶剂回收。盐的电离程度可以从完全电离到几乎不电离。

此外，尽管一般而言，关于本发明化合物的盐，优选药学上可接受的盐，但是应当注意，本发明在其最广泛的意义上也包括非药学上可接受的盐，其可以例如用于本发明化合物的分离和/或纯化。例如，与旋光酸或旋光碱形成的盐可用于形成非对映异构体盐，该盐可促进上述式I的化合物的旋光异构体的分离。

在一个实施方案中，本发明还涉及式I及其子式的化合物的溶剂化物。本发明的化合物可以是药学上可接受的溶剂化物形式。式I及其子式的化合物的药学上可接受的溶剂化物包括化学计量量或亚化学计量量的一种或多于一种药学上可接受的溶剂分子，例如乙醇或水。术语“水合物”是指当所述溶剂是水时。

在一个实施方案中，本发明还涉及式I及其子式的化合物的前药。例如，在醇基团存在的情况下，可以使用药学上可接受的酯，例如乙酸酯、马来酸酯、新戊酰氧基甲酯等，以及本领域已知的用于改变溶解度或水解特性以用作缓释剂或前药制剂的那些酯。

制备方法

式I的化合物可以通过本领域技术人员已知的不同反应方式制备。

本发明还提供了制备式I的化合物的方法：

或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R

包括偶联式(A)的中间体化合物：

其中R

与胺(B)或醇(C)

R

其中R

在一个实施方案中，偶联在活化剂存在下进行，例如六氟磷酸苯并三唑-1-基氧基三(二甲氨基)

在另一个实施方案中，偶联在碱存在下进行，例如二异丙基乙胺(DIEA)

在一个实施方案中，偶联在溶剂如二甲基甲酰胺(DMF)或N-甲基吡咯烷酮(NMP)中进行。

用途

本发明还涉及本发明化合物或其药学上可接受的盐和溶剂化物作为ENT家族转运蛋白抑制剂的用途。因此，在特别优选的实施方案中，本发明涉及式I和子式的化合物，特别是上表1中的那些，或其药学上可接受的盐和溶剂化物作为ENT家族转运蛋白抑制剂的用途。

在一个实施方案中，本发明的化合物是ENT1、ENT2、ENT3和/或ENT4的抑制剂。在一个实施方案中，本发明的化合物是ENT1和ENT2的抑制剂。在一个实施方案中，本发明的化合物是ENT1的抑制剂，优选是ENT1的选择性抑制剂。在一个实施方案中，相对于其它ENT家族转运蛋白，尤其是相对于ENT2和ENT4，本发明的化合物是ENT1的选择性抑制剂。

本发明还提供了在有需要的患者中抑制ENT家族转运蛋白，尤其是ENT1的方法，所述患者优选温血动物，甚至更优选人，所述方法包括向所述患者施用有效量的本发明化合物或其药学上可接受的盐和溶剂化物。

本发明还涉及本发明化合物用作药物的用途，即用于医疗用途。因此，在一个实施方案中，本发明提供了本发明的化合物用于制备药物的用途。特别地，本发明提供了本发明的化合物用于制备药物的用途。

特别地，本发明提供了本发明的化合物，用于治疗和/或预防增殖性疾病，包括癌症。因此，在一个实施方案中，本发明提供了本发明化合物在制备用于治疗和/或预防癌症的药物中的用途。本发明还提供了一种治疗癌症的方法，所述方法包括向所需哺乳动物施用治疗有效量的本发明化合物。

本发明还提供了一种用于延缓患者癌症发作的方法，该方法包括向有需要的患者施用药学有效量的本发明化合物。

各种癌症在本领域中是已知的。可以使用本发明的方法治疗的癌症包括实体癌和非实体癌，尤其是良性和恶性实体瘤以及良性和恶性非实体瘤。癌症可以是转移性的或非转移性的。癌症可以是家族性的或散发性的。

在一个实施方案中，待根据本发明治疗的癌症是实体癌。如本文所用，术语“实体癌”包括形成离散肿瘤块的任意癌症(也称为恶性肿瘤)，与扩散性浸润组织而不形成块的癌症(或恶性肿瘤)相反。

实体瘤的实例包括但不限于：胆道癌、脑癌(包括胶质母细胞瘤和髓母细胞瘤)、乳腺癌、类癌、宫颈癌、绒毛膜癌、结肠癌、结肠直肠癌、子宫内膜癌、食道癌、胃癌、神经胶质瘤、头颈癌、上皮内肿瘤(包括鲍恩氏病和佩吉特氏病)、肝癌、肺癌、神经母细胞瘤、口腔癌(包括鳞状细胞癌)、卵巢癌(包括来源于上皮细胞、基质细胞、生殖细胞和间充质细胞的那些)、胰腺癌、前列腺癌、直肠癌、肾癌(包括腺癌和肾母细胞瘤)、肉瘤(包括平滑肌肉瘤、横纹肌肉瘤、脂肪肉瘤、纤维肉瘤和骨肉瘤)、皮肤癌(包括黑色素瘤、卡波济氏肉瘤、基底细胞癌和鳞状细胞癌)、睾丸癌包括生殖细胞瘤(精原细胞瘤和非精原细胞瘤，如畸胎瘤和绒毛膜癌)、间质瘤、生殖细胞瘤、甲状腺癌(包括甲状腺腺癌和髓样癌)和尿路上皮癌。

在另一个实施方案中，待根据本发明治疗的癌症是非实体癌。非实体瘤的实例包括但不限于血液肿瘤。如本文所用，血液肿瘤是本领域的术语，包括淋巴疾病、骨髓疾病和艾滋病相关的白血病。

淋巴疾病包括但不限于急性淋巴细胞白血病和慢性淋巴增生性疾病(例如，淋巴瘤、骨髓瘤和慢性淋巴白血病)。淋巴瘤包括，例如(何杰金氏病、非何杰金氏淋巴瘤和淋巴细胞性淋巴瘤)。慢性淋巴样白血病包括，例如，T细胞慢性淋巴样白血病和B细胞慢性淋巴样白血病。

在具体的实施方案中，癌症选自乳腺癌、类癌、宫颈癌、结肠直肠癌、子宫内膜癌、神经胶质瘤、头颈癌、肝癌、肺癌、黑色素瘤、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、肾癌、胃癌、甲状腺癌和尿路上皮癌。

在具体的实施方案中，癌症是乳腺癌。在具体的实施方案中，癌症是类癌。在具体的实施方案中，癌症是宫颈癌。在具体的实施方案中，癌症是结肠直肠癌。在具体的实施方案中，癌症是子宫内膜癌。在具体的实施方案中，癌症是神经胶质瘤。在具体的实施方案中，癌症是子宫内膜癌。在具体的实施方案中，癌症是肝癌。在具体的实施方案中，癌症是肺癌。在具体的实施方案中，癌症是黑色素瘤。在具体的实施方案中，癌症是卵巢癌。在具体的实施方案中，癌症是胰腺癌。在具体的实施方案中，癌症是前列腺癌。在具体的实施方案中，癌症是肾癌。在具体的实施方案中，癌症是胃癌。在具体的实施方案中，癌症是甲状腺癌。在具体的实施方案中，癌症是尿路上皮癌。

在另一个具体实施方案中，癌症选自白血病和多发性骨髓瘤。

优选地，患者是温血动物，更优选人。

在一个实施方案中，接受本发明的ENT抑制剂的对象用其他的治疗剂与本发明的ENT抑制剂组合治疗，或者在施用本发明的ENT抑制剂后约14天内接受了其他的治疗剂。在一个实施方案中，其他的治疗剂包括腺苷受体拮抗剂。

在一个实施方案中，对象先前已经接受了至少一种先前的治疗，并且在施用所述至少一种先前的治疗之后且在施用本发明的ENT抑制剂之前其病情已经有所发展。在一个实施方案中，先前的治疗选自化学疗法、免疫疗法、放射疗法、干细胞移植、激素疗法和手术。

在一个实施方案中，在施用其他的治疗剂如腺苷受体拮抗剂之前、同时或之后施用本发明的ENT抑制剂。

制剂

本发明还提供了药物组合物，其包含式I及其子式的化合物，或其药学上可接受的盐和溶剂化物，以及至少一种药学上可接受的载体、稀释剂、赋形剂和/或佐剂。

本发明的另一个目标是包含至少一种本发明化合物或其药学上可接受的盐和溶剂化物作为活性成分的药物。

通常，对于药物用途，本发明的化合物可以配制成药物制剂，药物制剂包含至少一种本发明的化合物和至少一种药学上可接受的载体、稀释剂、赋形剂和/或佐剂，以及任选地的一种或多于一种其它药学活性化合物。下文提供了关于其它药物活性化合物存在的细节。

举非限制性实例来说，这种制剂可以是适于口服施用、适于肠胃外施用(例如通过静脉内、肌内或皮下注射或静脉输注)、适于局部施用(包括眼部)、适于通过吸入、通过皮肤贴剂、通过植入物、通过栓剂等施用的形式。这种合适的施用形式—根据施用方式可以是固体、半固体或液体—以及用于其制备的方法和载体、稀释剂和赋形剂对技术人员来说是清楚的；参考最新版的Remington’s Pharmaceutical Sciences。

这些制剂的一些优选但非限制性实例包括片剂、丸剂、散剂、锭剂、药囊、扁囊剂、酏剂、混悬剂、乳剂、溶液剂、糖浆剂、气雾剂、软膏剂、乳膏、洗剂、软明胶胶囊和硬明胶胶囊、栓剂、滴剂、无菌注射溶液和无菌包装散剂(通常在使用前重构)，用于单次给药剂量施用和/或连续施用，它们可以与本身适合于这些制剂的载体、赋形剂和稀释剂一起配制，例如乳糖、葡萄糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇、淀粉、阿拉伯胶、磷酸钙、海藻酸盐、黄蓍胶、明胶、硅酸钙、微晶纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇、纤维素、(无菌)水、甲基纤维素、羟基苯甲酸甲酯和羟基苯甲酸丙酯、滑石、硬脂酸镁、食用油、植物油和矿物油或其合适的混合物。该制剂可以任选地包含药物制剂中常用的其他物质，例如润滑剂、润湿剂、乳化剂和助悬剂、分散剂、崩解剂、膨胀剂、填充剂、防腐剂、甜味剂、调味剂、流动调节剂、脱模剂等。组合物还可以被配制以便提供其中所含活性化合物的快速、持续或延迟释放。

本发明的药物制剂优选为单位剂型，并且可以适当包装，例如包装在盒子、泡罩、小瓶、瓶子、小袋、安瓿或任意其他合适的单剂量或多剂量支持物或容器中(其可以被适当标记)；任选地带有一个或多于一个包含产品信息和/或使用说明的说明书。

根据所要预防或治疗的疾病和施用途径，本发明的活性化合物可以以单一日剂量施用，分成一个或多于一个日剂量，或基本上连续施用，例如使用滴注。

与腺苷受体拮抗剂组合使用

本发明还涉及如上定义的本发明的式I或其子式的ENT抑制剂与腺苷受体拮抗剂的组合应用。

因此，本发明涉及组合，包含：

(a)有效量的如上定义的本发明的式I或其子式的ENT抑制剂；和

(b)有效量的腺苷受体拮抗剂。

在本发明的上下文中，术语“组合”优选地指ENT抑制剂和A2AR拮抗剂的组合。因此，本发明的组合可以作为一种组合物存在，包含在同一混合物(例如药物组合物)中的所有组分，或者可以作为试剂盒存在，其中不同的组分形成这种试剂盒的不同部分。ENT抑制剂和A2AR拮抗剂的施用可以同时或在时间上交错进行，施用时间相似或不同(即每种成分的施用次数相似或不同)，在相同的施用部位或不同的施用部位，以相似或不同的剂型施用。

本发明还涉及一种治疗癌症的方法，包括：向有需要的患者施用腺苷受体拮抗剂和本发明的ENT抑制剂的组合。

关于本发明的ENT抑制剂的上述实施方案也适用于本发明的组合。特别地，在一个实施方案中，在本发明的组合中，ENT抑制剂可以是以上定义的式I或子式。

作为第二组分，本发明的组合包括至少一种腺苷受体拮抗剂。

如上定义，“腺苷受体拮抗剂”是指化合物，在对患者施用该化合物后，导致与患者腺苷受体激活相关的生物活性的抑制或下调，包括其天然配体与腺苷受体结合产生的任意下游生物效应。这种腺苷受体拮抗剂包括能够阻断腺苷受体激活或腺苷受体激活的任意下游生物效应的任意药剂。

腺苷受体(或P1受体)是一类以腺苷为内源性配体的嘌呤能G蛋白偶联受体。人类中有四种已知类型的腺苷受体：A1、A2A、A2B和A3；每个都由不同的基因编码(分别为ADOARA1、ADORA2A、ADORA2B和ADORA3)。

在一个实施方案中，腺苷受体拮抗剂是A1受体、A2A受体、A2B受体、A3受体或其组合的拮抗剂。

在一个实施方案中，腺苷受体拮抗剂是A2A受体、A2B受体或其组合的拮抗剂。在一个实施方案中，腺苷受体拮抗剂是A2A受体拮抗剂或A2B受体拮抗剂。

在一个实施方案中，腺苷受体拮抗剂是A2A受体的拮抗剂(A2AR拮抗剂)。在一个实施方案中，腺苷受体拮抗剂是A2B受体的拮抗剂(A2BR拮抗剂)。

在一个实施方案中，腺苷受体拮抗剂是相对于其它腺苷受体对A2A受体具有选择性的拮抗剂。在一个实施方案中，腺苷受体拮抗剂是相对于A2B受体对A2A受体具有选择性的拮抗剂。

在一个实施方案中，腺苷受体拮抗剂是相对于其它腺苷受体对A2B受体具有选择性的拮抗剂。在一个实施方案中，腺苷受体拮抗剂是相对于A2A受体对A2B受体具有选择性的拮抗剂。

在具体的实施方案中，本发明的组合包含至少一种本文定义的A2A受体拮抗剂和至少一种如上定义的式I的ENT抑制剂。

A2A受体拮抗剂

在一个实施方案中，本发明的组合包括至少一种A2AR拮抗剂。

“A2AR拮抗剂”是指化合物，在对患者施用该化合物后，导致与患者A2A受体激活相关的生物活性的抑制或下调，包括其天然配体与A2A受体结合产生的任意下游生物效应。这种A2AR拮抗剂包括能够阻断A2A受体激活或A2A受体激活的任意下游生物学效应的任意药剂。

A2AR拮抗剂的实例包括：Preladenant(SCH-420,814)、Vipadenant(BIIB-014)、Tozadenant(SYK-115)、ATL-444，Istradefylline(KW-6002)、MSX-3、SCH-58261、SCH-412,348、SCH-442,416、ST-1535、咖啡因、VER-6623、VER-6947、VER-7835、ZM-241,385、茶碱。它还包括WO2018/178338、WO2011/121418、WO2009/156737、WO2011/095626或WO2018/136700中公开的A2AR拮抗剂，其内容通过引用并入本文。

在一个实施方案中，A2AR拮抗剂是硫代氨基甲酸酯衍生物，尤其是WO2018/178338中公开的硫代氨基甲酸酯衍生物。更优选地，A2AR拮抗剂是如下所述的式(II)的硫代氨基甲酸酯衍生物。

因此，在具体的实施方案中，本发明提供了组合，包含：

(a)如上定义的式I或其子式的根据本发明的ENT抑制剂；和

(b)A2AR拮抗剂，其为式(II)的硫代氨基甲酸酯衍生物，对应于WO2018/178338的式(I)化合物：

或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R

在优选的实施方案中，A2AR拮抗剂是式(II)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中：

R

R

其中杂芳基或芳基基团任选地被一种或多于一种选自卤素、烷基、杂环基、烷氧基、环烷氧基、杂环基氧基、羰基、烷基羰基、氨基羰基、羟基羰基、杂环基羰基、烷基亚砜基、烷基磺酰基、氨基磺酰基、杂环基磺酰基、烷基磺酰亚胺基、羰基氨基、磺酰基氨基和烷基磺酰基烷基的取代基取代；

所述取代基任选地被一种或多于一种选自氧代、卤素、羟基、氰基、烷基、烯基、醛基、杂环基烷基、羟烷基、二羟基烷基、羟烷基氨基烷基、氨基烷基、烷基氨基烷基、二烷基氨基烷基、(杂环基)(烷基)氨基烷基、杂环基、杂芳基、烷基杂芳基、炔基、烷氧基、氨基、二烷基氨基、氨基烷基羰基氨基、氨基羰基烷基氨基、(氨基羰基烷基)(烷基)氨基、烯基羰基氨基、羟基羰基、烷氧基羰基、氨基羰基、氨基烷基氨基羰基、烷基氨基烷基氨基羰基、二烷基氨基烷基氨基羰基、杂环基烷基氨基羰基、(烷基氨基烷基)(烷基)氨基羰基、烷基氨基烷基羰基、二烷基氨基烷基羰基、杂环基羰基、烯基羰基、炔基羰基、烷基亚砜基、烷基亚砜烷基、烷基磺酰基和烷基磺酰基烷基的取代基取代；

或者杂芳基或芳基基团任选地被两个取代基取代，这两个取代基与它们所连接的原子一起形成5元或6元芳环、5元或6元杂芳基环、5元或6元环烷基环或5元或6元杂环基环；任选地被一种或多于一种选自氧代、卤素、羟基、氰基、烷基、烯基、醛基、杂环基烷基、羟烷基、二羟基烷基、羟烷基氨基烷基、氨基烷基、烷基氨基烷基、二烷基氨基烷基、(杂环基)(烷基)氨基烷基、杂环基、杂芳基、烷基杂芳基、炔基、烷氧基、氨基、二烷基氨基、氨基烷基羰基氨基、氨基羰基烷基氨基、(氨基羰基烷基)(烷基)氨基、烯基羰基氨基、羟基羰基、烷氧基羰基、氨基羰基、氨基烷基氨基羰基、烷基氨基烷基氨基羰基、二烷基氨基烷基氨基羰基、杂环基烷基烷基氨基羰基、(烷基氨基烷基)(烷基)氨基羰基、烷基氨基烷基羰基、二烷基氨基烷基羰基、杂环基羰基、烯基羰基、炔基羰基、烷基亚砜基、烷基亚砜烷基、烷基磺酰基和烷基磺酰基烷基的取代基取代。

在一个实施方案中，优选的式(II)的A2AR拮抗剂具有式(IIa)：

或为其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中：

R

X

当X

所述取代基任选地被一种或多于一种选自氧代、卤素、羟基、氰基、烷基、烯基、醛基、杂环基烷基、羟烷基、二羟基烷基、羟烷基氨基烷基、氨基烷基、烷基氨基烷基、二烷基氨基烷基、(杂环基)(烷基)氨基烷基、杂环基、杂芳基、烷基杂芳基、炔基、烷氧基、氨基、二烷基氨基、氨基烷基羰基氨基、氨基羰基烷基氨基、(氨基羰基烷基)(烷基)氨基、烯基羰基氨基、羟基羰基、烷氧基羰基、氨基羰基、氨基烷基氨基羰基、烷基氨基烷基氨基羰基、二烷基氨基烷基氨基羰基、杂环基烷基氨基羰基、(烷基氨基烷基)(烷基)氨基羰基、烷基氨基烷基羰基、二烷基氨基烷基羰基、杂环基羰基、烯基羰基、炔基羰基、烷基亚砜基、烷基亚砜烷基、烷基磺酰基和烷基磺酰基烷基的取代基取代；

R

所述取代基任选地被一种或多于一种选自氧代、卤素、羟基、氰基、烷基、烯基、醛基、杂环基烷基、羟烷基、二羟基烷基、羟烷基氨基烷基、氨基烷基、烷基氨基烷基、二烷基氨基烷基、(杂环基)(烷基)氨基烷基、杂环基、杂芳基、烷基杂芳基、炔基、烷氧基、氨基、二烷基氨基、氨基烷基羰基氨基、氨基羰基烷基氨基、(氨基羰基烷基)(烷基)氨基、烯基羰基氨基、羟基羰基、烷氧基羰基、氨基羰基、氨基烷基氨基羰基、烷基氨基烷基氨基羰基、二烷基氨基烷基氨基羰基、杂环基烷基氨基羰基、(烷基氨基烷基)(烷基)氨基羰基、烷基氨基烷基羰基、二烷基氨基烷基羰基、杂环基羰基、烯基羰基、炔基羰基、烷基亚砜基、烷基亚砜烷基、烷基磺酰基和烷基磺酰基烷基的取代基取代；

或者R

当X

R

R

在一个实施方案中，优选的式(IIa)的A2AR的拮抗剂是式(Ia-1)的那些：

或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R

在一个实施方案中，优选的式(IIa-1)的A2AR拮抗剂是式(IIa-1a)的那些：

或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中：

R

R

在一个实施方案中，优选的式(IIa-1)的A2AR拮抗剂是式(IIa-1b)的那些：

或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中：

R

R

R

在一个实施方案中，优选的式(IIa-1)的A2AR拮抗剂是式(IIa-1c)或(IIa-1d)的那些：

或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中：

R

R

R

R

R

在一个实施方案中，优选的式(IIa)的A2AR拮抗剂是式(IIa-2)或(IIa-3)的那些：

/>

或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R

特别优选的式(II)的A2AR拮抗剂如下所列：

3-(2-(4-(4-((1H-1,2,3-三唑并-4基)甲氧基-2氟苯基)哌嗪-1-基)乙基)-5-氨基-(8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮

5-((4-(2-(5-氨基-8-(呋喃-2-基)-2-氧代噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-3(2H)-基)乙基)哌嗪-1-基)-3-氟苯氧基)甲基)-1,3,4-

5-氨基-3-(2-(4-(3-氟吡啶-4-基)哌嗪-1-基)乙基)-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮

2-(5-(4-(2-(5-氨基-8-(呋喃-2-基)-2-氧代噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-3(2H)-基)乙基)哌嗪-1-基)-2,4-二氟苯氧基)乙酰胺

(S)-5-氨基-3-(2-(4-(2-氟-4-(2-(甲基亚磺酰基)乙氧基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮

(R)-5-氨基-3-(2-(4-(2-氟-4-(2-(甲基亚磺酰基)乙氧基)苯基)-哌嗪-1-基)乙基)-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮

(R,S)-5-氨基-3-(2-(4-(2,4-二氟-5-(2-(甲基亚磺酰基)乙氧基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮

(+)-5-氨基-3-(2-(4-(2,4-二氟-5-(2-(甲基亚磺酰基)乙氧基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮

(-)-5-氨基-3-(2-(4-(2,4-二氟-5-(2-(甲基亚磺酰基)乙氧基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮

5-氨基-8-(呋喃-2-基)-3-(2-(4-(4-(2-羟基乙氧基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮

2-(4-(4-(2-(5-氨基-8-(呋喃-2-基)-2-氧代噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-3(2H)-基)乙基)哌嗪-1-基)苯氧基)乙酸

2-(4-(4-(2-(5-氨基-8-(呋喃-2-基)-2-氧代噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-3(2H)-基)乙基)哌嗪-1-基)苯氧基)乙酰胺

5-氨基-3-(2-(4-(4-(2,3-二羟基丙氧基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮

5-氨基-3-(2-(4-(2-氨基乙氧基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮

4-(4-(2-(5-氨基-8-(呋喃-2-基)-2-氧代噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-3(2H)-基)乙基)哌嗪-1-基)苯甲酰胺

4-(4-(2-(5-氨基-8-(呋喃-2-基)-2-氧代噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-3(2H)-基)乙基)哌嗪-1-基)-N-甲基苯甲酰胺

5-氨基-8-(呋喃-2-基)-3-(2-(4-(4-(2-吗啉代乙氧基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮

5-氨基-3-(2-(4-(2-(二甲氨基)乙氧基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮

4-(4-(2-(5-氨基-8-(呋喃-2-基)-2-氧代噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-3(2H)-基)乙基)哌嗪-1-基)苯磺酰胺

4-(4-(2-(5-氨基-8-(呋喃-2-基)-2-氧代噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-3(2H)-基)乙基)哌嗪-1-基)-N-甲基苯磺酰胺

5-氨基-8-(呋喃-2-基)-3-(2-(4-(4-(甲基磺酰基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮

5-氨基-8-(呋喃-2-基)-3-(2-(4-(4-(甲基亚磺酰基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮

3-(4-(2-(5-氨基-8-(呋喃-2-基)-2-氧代噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-3(2H)-基)-乙基)哌嗪-1-基)苯甲酰胺

5-氨基-8-(呋喃-2-基)-3-(2-(4-(3-(2-羟基乙氧基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮

5-氨基-3-(2-(4-(2-氟-4-(2-氧代-2-(哌嗪-1-基)乙氧基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮

5-氨基-3-(2-(4-(2-氟-4-(哌啶-4-基甲氧基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮

5-氨基-3-(2-(4-(2-氟-4-(哌嗪-1-羰基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮

5-氨基-3-(2-(4-(2-氟-4-(2-(哌嗪-1-基)乙氧基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮

5-氨基-3-(2-(4-(2-氟-4-(哌嗪-1-基磺酰基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮

5-氨基-3-(2-(4-(2-氟-4-(甲基磺酰基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮

4-(4-(2-(5-氨基-8-(呋喃-2-基)-2-氧代噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-3(2H)-基)乙基)哌嗪-1-基)-N-(2-氨基乙基)-3-氟苯甲酰胺

4-(4-(2-(5-氨基-8-(呋喃-2-基)-2-氧代噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-3(2H)-基)乙基)哌嗪-1-基)-3-氟-N-(2-(甲氨基)乙基)苯甲酰胺

4-(4-(2-(5-氨基-8-(呋喃-2-基)-2-氧代噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-3(2H)-基)乙基)哌嗪-1-基)-N-(2-(二甲氨基)乙基)-3-氟苯甲酰胺

4-(4-(2-(5-氨基-8-(呋喃-2-基)-2-氧代噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-3(2H)-基)乙基)哌嗪-1-基)-3-氟-N-(2-羟乙基)苯甲酰胺

4-(4-(2-(5-氨基-8-(呋喃-2-基)-2-氧代噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-3(2H)-基)乙基)哌嗪-1-基)-N-(2,3-二羟丙基)-3-氟苯甲酰胺

2-(4-(4-(2-(5-氨基-8-(呋喃-2-基)-2-氧代噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-3(2H)-基)乙基)哌嗪-1-基)-3-氟苯氧基)乙酸

2-(4-(4-(2-(5-氨基-8-(呋喃-2-基)-2-氧代噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-3(2H)-基)乙基)哌嗪-1-基)-3,5-二氟苯氧基)乙酸

2-(4-(4-(2-(5-氨基-8-(呋喃-2-基)-2-氧代噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-3(2H)-基)-乙基)哌嗪-1-基)-3-氟苯氧基)丙酸

(S)-2-(4-(4-(2-(5-氨基-8-(呋喃-2-基)-2-氧代噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-3(2H基)乙基)哌嗪-1-基)-3-氟苯氧基)丙酸

2-(4-(4-(2-(5-氨基-8-(呋喃-2-基)-2-氧代噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-3(2H)-基)-乙基)哌嗪-1-基)-3-氟苯氧基)-2-甲基丙酸

3-(4-(4-(2-(5-氨基-8-(呋喃-2-基)-2-氧代噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-3(2H)-基)乙基)哌嗪-1-基)-3-氟苯基)丙酸

4-(4-(4-(2-(5-氨基-8-(呋喃-2-基)-2-氧代噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-3(2H)-基)乙基)哌嗪-1-基)-3-氟苯氧基)丁酸

2-(3-(4-(2-(5-氨基-8-(呋喃-2-基)-2-氧代噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-3(2H)-基)乙基)哌嗪-1-基)-2,6-二氟苯氧基)乙酸

2-(5-(4-(2-(5-氨基-8-(呋喃-2-基)-2-氧代噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-3(2H)-基)乙基)哌嗪-1-基)-2,4-二氟苯氧基)乙酸

4-(4-(2-(5-氨基-8-(呋喃-2-基)-2-氧代噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-3(2H)-基)乙基)哌嗪-1-基)-3-氟苯甲酸

2-((2-(4-(4-(2-(5-氨基-8-(呋喃-2-基)-2-氧代噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-3(2H)-基)乙基)哌嗪-1-基)-3-氟苯氧基)乙基)氨基)乙酰胺

2-((2-(4-(4-(2-(5-氨基-8-(呋喃-2-基)-2-氧代噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-3(2H)-基)乙基)哌嗪-1-基)-3-氟苯氧基)乙基)(甲基)氨基)乙酰胺

5-氨基-3-(2-(4-(2-氟-4-(哌啶-4-基氧基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮

5-氨基-3-(2-(4-(2-氟-4-(吡咯烷-3-基氧基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮

3-(2-(4-(4-((1H-1,2,4-三唑-3-基)甲氧基)-2-氟苯基)哌嗪-1-基)乙基)-5-氨基-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮

2-(4-(4-(2-(5-氨基-8-(呋喃-2-基)-2-氧代噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-3(2H)-基)乙基)哌嗪-1-基)-3-氟苯氧基)-N-(2-(甲氨基)乙基)乙酰胺

2-(4-(4-(2-(5-氨基-8-(呋喃-2-基)-2-氧代噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-3(2H)-基)乙基)哌嗪-1-基)-3-氟苯氧基)-N-(2-(二甲氨基)乙基)乙酰胺

2-(4-(4-(2-(5-氨基-8-(呋喃-2-基)-2-氧代噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-3(2H)-基)乙基)哌嗪-1-基)-3-氟苯氧基)-N-(2-氨基乙基)乙酰胺

(R)-2-(4-(4-(2-(5-氨基-8-(呋喃-2-基)-2-氧代噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-3(2H)-基)乙基)哌嗪-1-基)-3-氟苯氧基)丙酸

2-(4-(4-(2-(5-氨基-8-(呋喃-2-基)-2-氧代噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-3(2H)-乙基)哌嗪-1-基)-3-氟苯氧基)乙酰胺

4-(4-(2-(5-氨基-8-(呋喃-2-基)-2-氧代噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-3(2H)-基)乙基)哌嗪-1-基)-3-氟-N-甲基-N-(2-(甲氨基)乙基)苯甲酰胺

4-(4-(2-(5-氨基-8-(呋喃-2-基)-2-氧代噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-3(2H)-基)乙基)哌嗪-1-基)-N-(2-(二甲氨基)乙基)-3-氟-N-甲基苯甲酰胺

(R)-4-(4-(2-(5-氨基-8-(呋喃-2-基)-2-氧代噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-3(2H)-基)乙基)哌嗪-1-基)-N-(1-(二甲氨基)丙烷-2-基)-3-氟苯甲酰胺

2-(4-(4-(2-(5-氨基-8-(呋喃-2-基)-2-氧代噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-3(2H)-乙基)哌嗪-1-基)-3-氟苯氧基)-N-甲基-N-(2-(甲氨基)乙基)乙酰胺

2-(5-(4-(2-(5-氨基-8-(呋喃-2-基)-2-氧代噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-3(2H)-基)乙基)哌嗪-1-基)-2,4-二氟苯氧基)-2-甲基丙酸

(S)-2-(5-(4-(2-(5-氨基-8-(呋喃-2-基)-2-氧代噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-3(2H)-基)乙基)哌嗪-1-基)-2,4-二氟苯氧基)丙酸

(R)-2-(5-(4-(2-(5-氨基-8-(呋喃-2-基)-2-氧代噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-3(2H)-基)乙基)哌嗪-1-基)-2,4-二氟苯氧基)丙酸

2-(5-(4-(2-(5-氨基-8-(呋喃-2-基)-2-氧代噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-3(2H)-基)乙基)哌嗪-1-基)-2,4-二氟苯氧基)-N-(2-(甲氨基)乙基)乙酰胺

2-(5-(4-(2-(5-氨基-8-(呋喃-2-基)-2-氧代噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-3(2H)-基)乙基)哌嗪-1-基)-2,4-二氟苯氧基)-N-(2-(二甲氨基)乙基)乙酰胺

5-(4-(2-(5-氨基-8-(呋喃-2-基)-2-氧代噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-3(2H)-基)乙基)哌嗪-1-基)-N-(2-(二甲氨基)乙基)-2,4-二氟-N-甲基苯甲酰胺

4-(5-(4-(2-(5-氨基-8-(呋喃-2-基)-2-氧代噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-3(2H)-基)乙基)哌嗪-1-基)-2,4-二氟苯氧基)丁酸

3-(2-(4-(5-((1H-四唑-5-基)甲氧基)-2,4-二氟苯基)哌嗪-1-基)乙基)-5-氨基-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮

5-氨基-3-(2-(4-(2-氟-4-((1-甲基-1H-1,2,4-三唑-3-基)甲氧基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮

5-氨基-3-(2-(4-(2,4-二氟-5-((1-甲基-1H-1,2,4-三唑-3-基)甲氧基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮

4-(4-(2-(5-氨基-8-(呋喃-2-基)-2-氧代噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-3(2H)-基)乙基)哌嗪-1-基)-3-氟-N-(2-(甲基(氧杂环丁烷-3-基)氨基)乙基)苯甲酰胺

4-(4-(2-(5-氨基-8-(呋喃-2-基)-2-氧代噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-3(2H)-基)乙基)哌嗪-1-基)-3-氟-N-(2-((2-羟乙基)氨基)乙基)苯甲酰胺

2-氨基-N-(2-(4-(4-(2-(5-氨基-8-(呋喃-2-基)-2-氧代噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-3(2H)-基)乙基)哌嗪-1-基)-3-氟苯氧基)乙基)乙酰胺

(S)-2-氨基-N-(2-(4-(4-(2-(5-氨基-8-(呋喃-2-基)-2-氧代噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-3(2H)-基)乙基)哌嗪-1-基)-3-氟苯氧基)乙基)-3-甲基丁酰胺

2-(5-(4-(2-(5-氨基-8-(呋喃-2-基)-2-氧代噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-3(2H)-基)乙基)哌嗪-1-基)-2,4-二氟苯氧基)乙酸乙酯

2-(5-(4-(2-(5-氨基-8-(呋喃-2-基)-2-氧代噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-3(2H)-基)乙基)哌嗪-1-基)-2,4-二氟苯氧基)乙腈

5-氨基-8-(呋喃-2-基)-3-(2-(4-(吡啶-4-基)哌嗪-1-基)乙基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮

5-氨基-8-(呋喃-2-基)-3-(2-(4-(嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)乙基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮

5-氨基-3-(2-(4-(2,4-二氟-5-(2-(甲基磺酰基)乙氧基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮

5-氨基-3-(2-(4-(2-氟-4-(2-(甲基磺酰基)乙氧基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮

5-氨基-3-(2-(4-(6-氟-2-氧代吲哚啉-5-基)哌嗪-1-基)乙基)-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮

5-氨基-3-(2-(4-(2-氟-4-(S-甲基磺酰亚胺基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮

5-(4-(2-(5-氨基-8-(呋喃-2-基)-2-氧代噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-3(2H)-基)乙基)哌嗪-1-基)-N-(2-(二甲氨基)乙基)-2,4-二氟苯甲酰胺

5-氨基-3-(2-(4-(5-氟-2-甲基吡啶-4-基)哌嗪-1-基)乙基)-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮

5-氨基-3-(2-(4-(2-氟-4-(((3R,4R)-4-羟基四氢呋喃-3-基)氧基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮

5-氨基-3-(2-(4-(2-氟-4-(((3S,4S)-4-羟基四氢呋喃-3-基)氧基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮

5-氨基-3-(2-(4-(2-氟-4-(2-羟基-2-甲基丙氧基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮

5-氨基-3-(2-(4-(2-氟-4-(2-羟丙基-2-基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮

5-氨基-3-(2-(4-(2-氟-4-(3,3,3-三氟-2-羟基丙氧基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮

5-氨基-3-(2-(4-(2-氟-5-(2-羟基乙氧基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮

5-氨基-3-(2-(4-(2,4-二氟-5-(吗啉-2-基甲氧基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮

5-氨基-3-(2-(4-(2,4-二氟-5-(吗啉-3-基甲氧基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮

5-氨基-3-(2-(4-(2,4-二氟-5-(((3S,4S)-4-氟吡咯烷-3-基)氧基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮

5-氨基-3-(2-(4-(2,4-二氟-5-(((3S,4S)-4-氟吡咯烷-3-基)氧基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮

5-氨基-3-(2-(4-(2,4-二氟-5-((3R,4S)-4-氟吡咯烷-3-基)氧基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮

5-氨基-3-(2-(4-(2,4-二氟-5-(((3S,4R)-4-氟吡咯烷-3-基)氧基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮

(S)-5-氨基-3-(2-(4-(2,4-二氟-5-((2-氧代吡咯烷-3-基)氧基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮

(R)-5-氨基-3-(2-(4-(2,4-二氟-5-((2-氧代吡咯烷-3-基)氧基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮

2-(5-(4-(2-(5-氨基-8-(呋喃-2-基)-2-氧代噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-3(2H)-基)-乙基)哌嗪-1-基)-2,4-二氟苯氧基)-N-(2-吗啉代乙基)乙酰胺

5-(4-(2-(5-氨基-8-(呋喃-2-基)-2-氧代噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-3(2H)-基)乙基)哌嗪-1-基)-2,4-二氟-N-(吗啉-3-基甲基)苯甲酰胺

5-氨基-3-(2-(4-(2-氟-4-(吗啉-2-基甲氧基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮

5-氨基-3-(2-(4-(2-氟-4-(吗啉-2-基甲氧基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮

5-氨基-3-(2-(4-(2-氟-4-(((3R,4R)-4-氟吡咯烷-3-基)氧基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮

5-氨基-3-(2-(4-(2-氟-4-(((3S,4S)-4-氟吡咯烷-3-基)氧基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮

5-氨基-3-(2-(4-(2-氟-4-(((3R,4S)-4-氟吡咯烷-3-基)氧基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮

5-氨基-3-(2-(4-(2-氟-4-(((3S,4R)-4-氟吡咯烷-3-基)氧基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮

2-(4-(4-(2-(5-氨基-8-(呋喃-2-基)-2-氧代噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-3(2H)-基)-乙基)哌嗪-1-基)-3-氟苯氧基)-N-(2-吗啉代乙基)乙酰胺

4-(4-(2-(5-氨基-8-(呋喃-2-基)-2-氧代噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-3(2H)-基)乙基)哌嗪-1-基)-3-氟-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺

4-(4-(2-(5-氨基-8-(呋喃-2-基)-2-氧代噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-3(2H)-基)乙基)哌嗪-1-基)-3-氟-N-(吗啉-3-基甲基)苯甲酰胺

5-氨基-3-(2-(4-(4-(氮杂环丁烷-3-基氧基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮

(S)-5-氨基-3-(2-(4-(2,4-二氟-5-(甲基亚磺酰基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮

(R)-5-氨基-3-(2-(4-(2,4-二氟-5-(甲基亚磺酰基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮

5-氨基-3-(2-(4-(2,4-二氟-5-(((1s,4s)-1-氧化四氢-2H-噻喃-4-基)氧基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮

5-氨基-3-(2-(4-(2,4-二氟-5-(((1r,4r)-1-氧化四氢-2H-噻喃-4-基)氧基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮

(S)-5-(4-(2-(5-氨基-8-(呋喃-2-基)-2-氧代噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-3(2H)-基)乙基)哌嗪-1-基)-2,4-二氟-N-(2-(甲基亚磺酰基)乙基)苯甲酰胺

(R)-5-(4-(2-(5-氨基-8-(呋喃-2-基)-2-氧代噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-3(2H)-基)乙基)哌嗪-1-基)-2,4-二氟-N-(2-(甲基亚磺酰基)乙基)苯甲酰胺

(S)-5-(4-(2-(5-氨基-8-(呋喃-2-基)-2-氧代噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-3(2H)-基)乙基)哌嗪-1-基)-2,4-二氟-N-甲基-N-(2-(甲基亚磺酰基)乙基)苯甲酰胺

(R)-5-(4-(2-(5-氨基-8-(呋喃-2-基)-2-氧代噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-3(2H)-基)乙基)哌嗪-1-基)-2,4-二氟-N-甲基-N-(2-(甲基亚磺酰基)乙基)苯甲酰胺

5-氨基-3-(2-(4-(2,4-二氟-5-(1-氧化硫代吗啉-4-羰基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮

5-氨基-3-(2-(4-(2,4-二氟-5-(1-氧化硫代吗啉代)苯基)哌嗪-1-基)乙基)-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮

(R)-5-氨基-3-(2-(4-(2-氟-4-(甲基亚磺酰基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮

(S)-5-氨基-3-(2-(4-(2-氟-4-(甲基亚磺酰基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮

5-氨基-3-(2-(4-(2-氟-4-(((1s,4s)-1-氧化四氢-2H-噻喃-4-基)氧基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮

5-氨基-3-(2-(4-(2-氟-4-(((1r,4r)-1-氧化四氢-2H-噻喃-4-基)氧基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮

(S)-4-(4-(2-(5-氨基-8-(呋喃-2-基)-2-氧代噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-3(2H)-基)乙基)哌嗪-1-基)-3-氟-N-(2-(甲基亚磺酰基)乙基)苯甲酰胺

(R)-4-(4-(2-(5-氨基-8-(呋喃-2-基)-2-氧代噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-3(2H)-基)乙基)哌嗪-1-基)-3-氟-N-(2-(甲基亚磺酰基)乙基)苯甲酰胺

5-氨基-3-(2-(4-(2-氟-4-(1-氧化硫代吗啉-4-羰基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮

5-氨基-3-(2-(4-(2-氟-4-(1-氧化硫代吗啉代)苯基)哌嗪-1-基)乙基)-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮

(S)-5-氨基-3-(2-(4-(5-(2,3-二羟基丙氧基)-2,4-二氟苯基)哌嗪-1-基)乙基)-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮

(R)-5-氨基-3-(2-(4-(5-(2,3-二羟基丙氧基)-2,4-二氟苯基)哌嗪-1-基)乙基)-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮

(S)-5-(4-(2-(5-氨基-8-(呋喃-2-基)-2-氧代噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-3(2H)-基)乙基)哌嗪-1-基)-N-(2,3-二羟丙基)-2,4-二氟苯甲酰胺

(R)-5-(4-(2-(5-氨基-8-(呋喃-2-基)-2-氧代噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-3(2H)-基)乙基)哌嗪-1-基)-N-(2,3-二羟丙基)-2,4-二氟苯甲酰胺

5-氨基-3-(2-(4-(4-(氮杂环丁烷-3-基氧基)-2-氟苯基)哌嗪-1-基)乙基)-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮

5-氨基-3-(2-(4-(5-(氮杂环丁烷-3-基氧基)-2,4-二氟苯基)哌嗪-1-基)乙基)-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮

(S)-5-氨基-3-(2-(4-(2,4-二氟-5-(3-(甲基亚磺酰基)丙氧基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮

在一个实施方案中,式(II)的A2AR拮抗剂选自：

(R,S)-5-氨基-3-(2-(4-(2,4-二氟-5-(2-(甲基亚磺酰基)乙氧基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮(化合物7)；

(+)-5-氨基-3-(2-(4-(2,4-二氟-5-(2-(甲基亚磺酰基)乙氧基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮(化合物8a)和

(-)-5-氨基-3-(2-(4-(2,4-二氟-5-(2-(甲基亚磺酰基)乙氧基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮(化合物8b)。

在一个具体的实施方案中,式(II)的A2AR拮抗剂选自：

(R,S)-5-氨基-3-(2-(4-(2,4-二氟-5-(2-(甲基亚磺酰基)乙氧基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮(化合物7)；和

(+)-5-氨基-3-(2-(4-(2,4-二氟-5-(2-(甲基亚磺酰基)乙氧基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮(化合物8a)。

在优选的实施方案中,式(II)的A2AR拮抗剂是(+)-5-氨基-3-(2-(4-(2,4-二氟-5-(2-(甲基亚磺酰基)乙氧基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮(化合物8a)。

在另一个优选的实施方案中，式(II)的A2AR拮抗剂是(-)-5-氨基-3-(2-(4-(2,4-二氟-5-(2-(甲基亚磺酰基)乙氧基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮(化合物8b)。

关于本发明的盐、溶剂化物、对映异构体、同分异构体(包括旋光异构体、几何异构体和互变异构体)、多晶型物、多组分复合物、液晶、前药和同位素标记的ENT抑制剂的实施方案也适用于上文详述的式(II)及其子式的A2AR拮抗剂。

在另一个实施方案中，A2AR拮抗剂是WO2011/121418中公开的A2AR拮抗剂。特别地，A2AR拮抗剂是WO2011/121418的实施例1的化合物，即5-溴-2,6-二-(1H-吡唑-1-基)嘧啶-4-胺，也称为NIR178：

在另一个实施方案中，A2AR拮抗剂是WO2009/156737中公开的A2AR拮抗剂。特别地，A2AR拮抗剂是WO2009/156737的实施例1S的化合物，即(S)-7-(5-甲基呋喃-2-基)-3-((6-(([四氢呋喃-3-基]氧基)甲基)吡啶-2-基)甲基)-3H-[1,2,3]三唑并[4,5-d]嘧啶-5-胺，也称为CPI-444：

在另一个实施方案中，A2AR拮抗剂是WO2011/095626中公开的A2AR拮抗剂。特别地，A2AR拮抗剂是WO2011/095626的化合物(cxiv)，即6-(2-氯-6-甲基吡啶-4-基)-5-(4-氟苯基)-1,2,4-三嗪-3-胺，也称为AZD4635：

在另一个实施方案中，A2AR拮抗剂是WO2018/136700中公开的A2AR拮抗剂。特别地，A2AR拮抗剂是WO2018/136700的实施例1的化合物，即3-(2-氨基-6-(1-((6-(2-羟丙基-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)嘧啶-4-基)-2-甲基苯甲腈，也称为AB928：

在另一个实施方案中，A2AR拮抗剂是Preladenant(SCH-420，814)，即2-(2-呋喃基)-7-(2-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-1-哌嗪基)乙基)-7H-吡唑并(4,3-e)(1,2,4)三唑并(1,5-c)嘧啶-5-胺：

在另一个实施方案中，A2AR拮抗剂是Vipadenant(BIIB-014)，即3-(4-氨基-3-甲基苄基)-7-(2-呋喃基)-3H-(1,2,3)三唑并(4,5-d)嘧啶-5-胺：

在另一个实施方案中，A2AR拮抗剂是Tozadenant(SYK-115)，即4-羟基-N-(4-甲氧基-7-吗啉代苯并[d]噻唑-2-基)-4-甲基哌啶-1-甲酰胺：

因此，在一个实施方案中，腺苷受体拮抗剂选自：

5-溴-2,6-二-(1H-吡唑-1-基)嘧啶-4-胺；

(S)-7-(5-甲基呋喃-2-基)-3-((6-(([四氢呋喃-3-基]氧基)甲基)吡啶-2-基)甲基)-3H-[1,2,3]三唑并[4,5-d]嘧啶-5-胺；

6-(2-氯-6-甲基吡啶-4-基)-5-(4-氟苯基)-1,2,4-三嗪-3-胺；

3-(2-氨基-6-(1-((6-(2-羟丙基-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)嘧啶-4-基)-2-甲基苯甲腈；

2-(2-呋喃基)-7-(2-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-1-哌嗪基)乙基)-7H-吡唑并(4,3-e)(1,2,4)三唑并(1,5-c)嘧啶-5-胺；

3-(4-氨基-3-甲基苄基)-7-(2-呋喃基)-3H-(1,2,3)三唑并(4,5-d)嘧啶-5-胺；和

4-羟基-N-(4-甲氧基-7-吗啉代苯并[d]噻唑-2-基)-4-甲基哌啶-1-甲酰胺。

在一个实施方案中，腺苷受体拮抗剂是5-溴-2,,6-二-(1H-吡唑-1-基)嘧啶-4-胺。在一个实施方案中，腺苷受体拮抗剂是(S)-7-(5-甲基呋喃-2-基)-3-((6-(([四氢呋喃-3-基]氧基)甲基)吡啶-2-基)甲基)-3H-[1,2,3]三唑并[4,5-d]嘧啶-5-胺。在一个实施方案中，腺苷受体拮抗剂是6-(2-氯-6-甲基吡啶-4-基)-5-(4-氟苯基)-1,2,4-三嗪-3-胺。在一个实施方案中，腺苷受体拮抗剂是3-(2-氨基-6-(1-((6-(2-羟丙基-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)嘧啶-4-基)-2-甲基苯甲腈。

A2B受体拮抗剂

在一个实施方案中，本发明的组合包括至少一种A2BR拮抗剂。

“A2BR拮抗剂”是指一种化合物，其在对患者施用后，导致与患者A2B受体激活相关的生物活性的抑制或下调，包括其天然配体与A2B受体结合产生的任意下游生物效应。这种A2BR拮抗剂包括能够阻断A2B受体激活或A2B受体激活的任意下游生物学效应的任意药剂。

A2BR拮抗剂的实例包括：Vipadenant(BIIB-014)，CVT-6883，MRS-1706，MRS-1754，PSB-603，PSB-0788，PSB-1115，OSIP-339,391，ATL-801，茶碱，咖啡因。

特定组合

在一个实施方案中，本发明的组合包含：

(a)有效量的本发明的式I或其子式的ENT抑制剂；和

(b)有效量的腺苷受体拮抗剂，优选A2AR拮抗剂，优选地选自：

(+)-5-氨基-3-(2-(4-(2,4-二氟-5-(2-(甲基亚磺酰基)乙氧基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮；

(-)-5-氨基-3-(2-(4-(2,4-二氟-5-(2-(甲基亚磺酰基)乙氧基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮；

5-溴-2,6-二-(1H-吡唑-1-基)嘧啶-4-胺；

(S)-7-(5-甲基呋喃-2-基)-3-((6-(([四氢呋喃-3-基]氧基)甲基)吡啶-2-基)甲基)-3H-[1,2,3]三唑并[4,5-d]嘧啶-5-胺；

6-(2-氯-6-甲基吡啶-4-基)-5-(4-氟苯基)-1,2,4-三嗪-3-胺；

3-(2-氨基-6-(1-((6-(2-羟丙基-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)嘧啶-4-基)-2-甲基苯甲腈；

及其药学上可接受的盐。

在一个实施方案中，本发明的组合包含：

(a)有效量的本发明的式I或其子式的ENT抑制剂；和

(b)有效量的作为A2AR拮抗剂的(+)-5-氨基-3-(2-(4-(2,4-二氟-5-(2-(甲基亚磺酰基)乙氧基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮。

在一个实施方案中，本发明的组合包含：

(a)有效量的本发明的式I或其子式的ENT抑制剂；和

(b)有效量的作为A2AR拮抗剂的(-)-5-氨基-3-(2-(4-(2,4-二氟-5-(2-(甲基亚磺酰基)乙氧基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)-8-(呋喃-2-基)噻唑并[5,4-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-2(3H)-酮。

组合制剂和试剂盒

本发明还提供了包含本发明组合的组合制剂。特别地，本发明提供了组合制剂，包含：有效量的腺苷受体拮抗剂与有效量的如上定义的本发明的ENT抑制剂的组合，以及药学上可接受的赋形剂。

本发明还涉及包含本发明组合的组合药物组合物。在一个实施方案中，药物组合物包含：

(a)有效量的如上定义的本发明的式I或其子式的ENT抑制剂；

(b)有效量的腺苷受体拮抗剂；和

(c)至少一种药学上可接受的载体、稀释剂、赋形剂和/或佐剂。

上述关于本发明的腺苷受体拮抗剂和ENT抑制剂的具体实施方案也适用于本发明的组合制剂和药物组合物的情况。

在优选的实施方案中，本发明提供了组合药物组合物，其包含：

(a)有效量的如上定义的本发明的式I或其子式的ENT抑制剂；

(b)有效量的A2AR拮抗剂，其为硫代氨基甲酸酯衍生物，更优选为式(II)的硫代氨基甲酸酯衍生物

或如上所定义的其药学上可接受的盐或溶剂化物；和

(c)至少一种药学上可接受的载体、稀释剂、赋形剂和/或佐剂。

在一个实施方案中，本发明的组合制剂或药物组合物还包含其他的治疗剂。

用于制备施用形式的至少一种药学上可接受的载体、稀释剂、赋形剂和/或佐剂对技术人员来说是清楚的；参考最新版的Remington’s Pharmaceutical Sciences。关于包含本发明的ENT抑制剂的制剂的具体实施方案也适用于本发明的组合制剂和药物组合物的情况。

本发明还涉及包含本发明组合的试剂盒。在一个实施方案中，本发明的试剂盒包含：

(a)含有有效量的如上定义的本发明的式I或其子式的ENT抑制剂的第一部分；和

(b)含有有效量的腺苷受体拮抗剂的第二部分。

关于本发明的ENT抑制剂和腺苷受体拮抗剂的上述实施方案也适用于本发明的试剂盒。

在优选的实施方案中，本发明提供了试剂盒，其包含：

(a)含有有效量的如上定义的本发明的式I或其子式的ENT抑制剂的第一部分；和

(b)含有有效量的A2AR拮抗剂的第二部分，其为硫代氨基甲酸酯衍生物，更优选为式(II)的硫代氨基甲酸酯衍生物

或如上所定义的其药学上可接受的盐或溶剂化物。

根据ENT抑制剂和腺苷受体拮抗剂，试剂盒的第一部分和第二部分可以是药物组合物的形式。这种药物组合物的赋形剂、剂型和施用途径对本领域技术人员来说是清楚的(参考最新版的Remington’s Pharmaceutical Sciences)，尤其可以是上面列出的关于本发明药物组合物的那些。

在一个实施方案中，本发明的试剂盒还包含其他的治疗剂。

在本发明的上下文中，ENT抑制剂和腺苷受体拮抗剂的施用可以如下文进一步概述地在相同的施用部位或不同的施用部位以类似或不同的剂型同时或在时间上交错进行。

在一个实施方案中，在施用腺苷受体拮抗剂之前、同时或之后施用ENT抑制剂。为了确保由ENT抑制剂和腺苷受体拮抗剂引起的不同机制不会受到彼此的负面影响，腺苷受体拮抗剂和ENT抑制剂可以在时间上(以时间交错的方式)分开施用，即顺序施用，和/或在不同的施用部位施用。这意味着腺苷受体拮抗剂可以在例如ENT抑制剂之前、同时或之后施用，反之亦然。或者或此外，腺苷受体拮抗剂和ENT抑制剂可以在不同的施用部位施用，或优选地，当以时间交错的方式施用时，在相同的施用部位施用。

在一个实施方案中，腺苷受体拮抗剂将在施用ENT抑制剂之前和/或与之同时施用。在一个实施方案中，腺苷受体拮抗剂将在施用ENT抑制剂的前一天或同一天施用。在另一个实施方案中，ENT抑制剂将在施用腺苷受体拮抗剂之前和/或与之同时施用。在一个实施方案中，ENT抑制剂将在施用腺苷受体拮抗剂的前一天或与之同一天施用。在一个实施方案中，腺苷受体拮抗剂将在施用ENT抑制剂之前和/或与之同时施用，并在此后连续施用。在另一个实施方案中，ENT抑制剂将在施用腺苷受体拮抗剂之前和/或与之同时施用，并在此后连续施用。

根据所要预防或治疗的疾病和施用形式，ENT抑制剂和腺苷受体拮抗剂可以以单一日剂量、分成一个或多于一个日剂量施用。

应当理解，腺苷受体拮抗剂和ENT抑制剂的每日总用量将由主治医师在合理的医学判断范围内决定。任意特定对象的具体剂量将取决于多种因素，例如待治疗的癌症；患者的年龄、体重、一般健康状况、性别和饮食；和医学领域公知的类似因素。

本发明的另一个目的是该组合作为药物的用途，即用于医疗用途。因此，在一个实施方案中，本发明提供了本发明的组合用于制备药物的用途。特别地，本发明提供了本发明的组合药物组合物或本发明的试剂盒用于制备药物的用途。

特别地，本发明提供了用于治疗和/或预防癌症的本发明的组合、组合的药物组合物或试剂盒。本发明还提供了本发明的组合、组合的药物组合物或试剂盒在制备用于治疗和/或预防癌症的药物中的用途。本发明还提供了治疗癌症的方法，方法包括给需要治疗的哺乳动物施用治疗有效量的本发明的组合、组合的药物组合物或试剂盒。

特别地，本发明提供了治疗癌症的方法，包括：给有需要的患者施用腺苷受体拮抗剂和ENT抑制剂的组合。上述关于腺苷受体拮抗剂和ENT抑制剂的具体实施方案也适用于本发明的治疗方法的情况。

本发明还提供了一种用于延缓患者癌症发作的方法，该方法包括向有需要的患者施用药学有效量的本发明的组合、组合的药物组合物或试剂盒。

实施例

参考以下实施例将更好地理解本发明。这些实施例旨在表示本发明的具体实施方案，而不是限制本发明的范围。

使用了以下缩写：

THF：四氢呋喃；

DCM：二氯甲烷；

DIEA：N,N-二异丙基乙胺；

N

min：分钟；

hr：小时；

rt：保留时间；

NMP：N-甲基吡咯烷酮；

DMF：二甲基甲酰胺；

Na

prep-TLC：制备型薄层色谱法；

prep-HPLC：制备型高压液相色谱；

HPLC：高压液相色谱；

SiO

MeOH：甲醇；

FA：甲酸；

K

HATU：2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯；

BOP：六氟磷酸苯并三唑-1-基氧基三(二甲氨基)

DBU：1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯；

NaBH(OAC)3：三乙酰氧基硼氢化钠；

NaOH：氢氧化钠；

MPLC：中压液相色谱

I.化学实施例

如下获得下述实施例中提供的MS数据：

使用Agilent 6130或6130B多模式(ESI+APCI)记录LCMS。

LCMS方法：

色谱柱：XBridge C8(50×4.6mm)5μm；方法：A：0.1％TFA水溶液，B：0.1％TFA ACN溶液，流速：2.0mL/min。

如下获得下述实施例中提供的NMR数据：1H-NMR：Bruker DPX 400MHz。NMR光谱中观察到的多重态缩写如下：s(单峰)，d(双峰)，t(三重峰)，q(四重峰)，m(多重峰)，br(宽峰)。

HPLC纯度用两种方法中的任意一种进行评估：

方法XB0595TF；色谱柱：XBridge C8(50×4.6)mm，3.5μm；0.1％TFA水溶液至0.1％TFA ACN溶液的洗脱液梯度，流速：2.0mL/min。

方法AM9010A3；色谱柱：Phenomenex gemini NX-C18(150×4.6)，3.0μm；10mM醋酸铵水溶液至10mM醋酸铵ACN溶液的洗脱液梯度，流速：1.0mL/min。

通过制备型HPLC的纯化通过以下三种方法进行：

条件A：制备型-HPLC(色谱柱：Waters XBridge 150×25mm×5μm；

流动相：[水(10mM NH

条件B：通过制备型-HPLC(色谱柱：3_Phenomenex Luna C18 75×30mm×3μm；

流动相：[水(0.05％HCl)-ACN]；B％：30％-50％，7分钟)。

条件C：制备型-HPLC(色谱柱：Phenomenex Gemini NX-C18(75×30mm×3μm)；

流动相[水(10mM NH

除非另有说明，否则溶剂、试剂和起始原料是从供应商处购买和使用的。

实施例I.1.中间体化合物的合成

中间体化合物1：

在N

中间体化合物2：

在N

中间体化合物3：

在N

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：511.3(计算值：510.15)

中间体化合物4：

将中间体化合物2(200mg，468.03微摩尔，1当量)和2,2’-氮杂二基双(乙烷-1-醇)(443mg，4.21毫摩尔，406.42μL，9当量)的NMP(1mL)溶液密封，并在微波中于180℃加热3小时。反应混合物用50mL水稀释，用60mL(20mL×3)乙酸乙酯萃取。用Na

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：565.2(计算值：564.34)

中间体化合物5：

在N

中间体化合物6：

将中间体化合物5(200mg，455.34摩尔，1当量)、2,2’-氮杂二基双(乙烷-1-醇)(240mg，2.28毫摩尔，220.18μL，5.01当量)和K

流动相：[水(10mM NH

中间体化合物7：

将中间体化合物3(100mg，195.54微摩尔，1当量)、DIEA(52mg，402.34微摩尔，70.08μL，2.06当量)和2,2’-氮杂二基双(乙烷-1-醇)(82mg，779.95微摩尔，75.23μL，3.99当量)的NMP(0.5mL)溶液的混合物在微波中于100℃搅拌3小时。用DCM(20mL)稀释反应混合物，并用水洗涤(20mL，3次)。用Na

中间体化合物8：

在N

中间体化合物9：

将中间体化合物2(2g，4.68毫摩尔，1当量)、双(2-甲氧基乙基)胺(2.56g，19.19毫摩尔，2.83mL，4.10当量)和DIEA(1.52g，11.75毫摩尔，2.05mL，2.51当量)的NMP(5mL)溶液密封，并在微波中于120℃加热2小时。粗产物通过于25℃从乙酸乙酯(100mL)中重结晶来纯化，得到黄色油状的中间体化合物9(4.3g)。

中间体化合物10：

在N

中间体化合物11：

根据中间体化合物2所使用和描述的方法，中间体化合物11通过中间体化合物21与过量的哌啶反应来制备。

中间体化合物12：

将中间体化合物11(0.4g，1.33毫摩尔，1当量)和双(2-甲氧基乙基)胺(178mg，1.33毫摩尔，1当量)、DIEA(513mg，2.2当量)的NMP(1.3mL)溶液在微波中于115℃搅拌2小时。两种异构体的混合物(rt＝0.795，20％和rt＝0.906，80％ UV)通过制备型-HPLC(色谱柱：Phenomenex luna C18 150×40mm×15μm；流动相：[水(0.1％TFA)-ACN]；B％：38％-68％，11分钟)纯化，得到淡黄色固体的中间体化合物12(rt＝0.906，175mg，32.8％产率，99％纯度)。

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：397.2(计算值：396.17)。

中间体化合物13：

向中间体化合物12(100mg，249.45微摩尔，1当量)、DIEA(77mg，595.79微摩尔，103.77μL，2.39当量)和2-(哌嗪-1-基)噻唑(80mg，472.68微摩尔，8.99μL，1.89当量)的DMF(1mL)溶液中加入HATU(188mg，494.44微摩尔，1.98当量)，并将混合物在25℃下搅拌4小时。将混合物倒入水(20mL)中，用DCM(20mL)萃取。浓缩有机层，得到红色油状的中间体化合物13(110mg)，无需进一步纯化即可使用。

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：548.3(计算值574.22)

中间体化合物14：

/>

将中间体化合物11(0.8g，2.67毫摩尔，1当量)和2,2’-氮杂二基双(乙烷-1-醇)(281mg，2.67毫摩尔，1当量)、DIEA(759.16mg，5.87毫摩尔，1.02mL，2.2当量)的NMP(2.5mL)溶液的混合物在微波中于115℃搅拌2小时。两种异构体的混合物：(rt＝0.749分钟，20％和rt＝0.870分钟，80％ UV)通过制备型-HPLC(色谱柱：Phenomenex lunaC18 150×40mm×15μm；流动相：[水(0.1％TFA)-ACN]；B％：15％-45％，11分钟)纯化，得到中间体化合物14(0.2g，20.3％产率，100％纯度)，为白色固体。

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：369.2(计算值：368.14)

中间体化合物15：

向中间体化合物14(200mg，542.27微摩尔，1当量)、DIEA(141mg，1.09毫摩尔，190.03μL，2.01当量)和2-(哌嗪-1-基)噻唑并(137mg，809.47微摩尔，8.99μL，1.49当量)的DMF(2mL)溶液的混合物中加入HATU(381mg，1.00毫摩尔，1.85当量)，并将混合物在25℃下搅拌4小时。过滤混合物，然后通过制备型-HPLC(色谱柱：Phenomenex luna C18 150×40mm×15μm；流动相：[水(0.1％TFA)-ACN]；B％：20％-50％，11分钟)纯化，得到黄色固体的中间体化合物15(0.24g，57.9％产率，83％纯度，TFA)。

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：520.3(计算值：519.19)

中间体化合物16：

中间体化合物16已经由中间体化合物21、4-甲氧基哌啶和双(2-甲氧基乙基)胺通过中间体化合物23所使用和描述的方法制备。

中间体化合物17：

向2,3,4-三甲氧基苯甲醛(8.0g，40.77毫摩尔，1当量)和2-甲氧基乙烷-1-胺(3.68g，48.93毫摩尔，4.25mL，1.2当量)的DCM(100.0mL)溶液中一次性加入AcOH(2.45g，40.77毫摩尔，2.33mL，1当量)。将该反应混合物在20℃搅拌下1小时。然后在0℃下将NaBH(OAc)

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：256.3(计算值：255.15)

中间体化合物18：

向3,4,5-三甲氧基苯甲醛(8.0g，40.77毫摩尔，1当量)和2-甲氧基乙烷-1-胺(3.68g，48.93毫摩尔，4.25mL，1.2当量)的DCM(100.0mL)溶液中一次性加入AcOH(2.45g，40.77毫摩尔，2.33mL，1当量)。将该反应混合物在20℃下搅拌1小时。然后在0℃下将NaBH(OAc)

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：256.3(计算值：255.15)。

1

中间体化合物19：

向2,3,4-三甲氧基苯甲醛(8.0g，40.77毫摩尔，1当量)和2-氨基乙烷-1-醇(2.99g，48.92毫摩尔，2.96mL，1.2当量)的DCM(100.0mL)溶液中一次性加入AcOH(2.45g，40.77毫摩尔，2.33mL，1当量)。将该反应混合物在20℃下搅拌1小时。然后在0℃下将NaBH(OAc)

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：242.3(计算值：241.13)。

1

中间体化合物20：

向3,4,5-三甲氧基苯甲醛(8.0g，40.77毫摩尔，1当量)和2-氨基乙烷-1-醇(2.99g，48.92毫摩尔，2.96mL，1.2当量)的DCM(100.0mL)溶液中一次性加入AcOH(2.45g，40.77毫摩尔，2.33mL，1当量)。将反应混合物在20℃下搅拌1小时。然后在0℃下将NaBH(OAc)

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：242.3(计算值：241.13)。

1

中间体化合物21：

中间体化合物21已经根据WO2017003822A1(第121页的化合物68)中描述的工艺制备。

中间体化合物22：

/>

在N

中间体化合物23：

将中间体化合物22(200mg，607.64微摩尔，1当量)、双(2-甲氧基乙基)胺(728mg，5.47毫摩尔，807.10μL，9当量)和DIEA(200mg，1.55毫摩尔，269.54μL，2.55当量)的NMP(2mL)溶液密封，并在微波中于180℃下加热2小时。反应混合物用50mL水稀释，用DCM(20mL，3次)萃取。合并的有机层用Na

中间体化合物24：

在N

中间体化合物25：

将中间体化合物24(200mg，571.13微摩尔，1当量)、DIEA(188mg，1.45毫摩尔，253.37μL，2.55当量)和双(2-甲氧基乙基)胺(685mg，5.14毫摩尔，759.42μL，9.01当量)的NMP(2mL)溶液密封，并在微波中于180℃下加热2小时。反应混合物用50mL水稀释，用60mL(20mL，3次)DCM萃取。合并的有机层用Na

中间体化合物26：

在N

中间体化合物27：

将中间体化合物26(200mg，589.73微摩尔，1当量)、双(2-甲氧基乙基)胺(708mg，5.32毫摩尔，784.92μL，9.01当量)和DIEA(190mg，1.47毫摩尔，256.06μL，2.49当量)的NMP(2mL)溶液的混合物密封，并在微波中于180℃下加热2小时。反应混合物用50mL水稀释，用60mL(20mL，3次)DCM萃取。合并的有机层用Na

中间体化合物28：

在N

中间体化合物29：

将中间体化合物28(100mg，280.83微摩尔，1当量)、双(2-甲氧基乙基)胺(336mg，2.52毫摩尔，372.51μL，8.98当量)和DIEA(91mg，704.10微摩尔，122.64μL，2.51当量)的NMP(2mL)溶液的混合物密封，并在微波中于180℃下加热2小时。反应混合物用50mL水稀释，用60mL(20mL，3次)DCM萃取。合并的有机层用Na

中间体化合物30：

在N

中间体化合物31：

在N

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：427.1(计算值：427.1)。

中间体化合物32：

将中间体化合物31(100mg，234.01微摩尔，1当量)、双(2-甲氧基乙基)胺(281mg，2.11毫摩尔，311.53μL，9.02当量)和DIEA(76mg，588.04微摩尔，102.43μL，2.51当量)的NMP(1mL)溶液密封，并在微波中于180℃下加热2小时。将反应混合物密封并在微波中于190℃下加热2小时。反应混合物用30mL水稀释。用柠檬酸将水相酸化至pH＝7，并在16℃下搅拌30分钟，用EtOAc(20mL，3次)萃取。合并的有机层用Na

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：621.3(计算值：621.4)。

中间体化合物33：

该反应平行进行2次。

在25℃下，向哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1.17g，6.3毫摩尔)和3-溴-1-甲基-1H-1,2,4-三唑(0.85g，5.3毫摩尔)的甲苯(20mL)溶液的混合物中加入叔丁醇钠(1.01g，10.5毫摩尔)和BrettPhos-Pd-G3(475.7mg，524.7微摩尔)。用氮气吹扫和脱气10分钟后，混合物在氮气下于100℃搅拌16小时。冷却至室温后，将两种反应混合物合并，然后用硅藻土垫过滤。滤饼用DCM(50mL，2次)洗涤。减压浓缩合并的有机相。残余物通过硅胶柱纯化(用石油醚/乙酸乙酯＝5/1至0/1洗脱)，得到棕色油状的中间体化合物33(2.3g，产率61％)。

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：268.1(计算值：268.2)。

1

中间体化合物34：

在15℃下，向中间体化合物33(2.3g，8.6毫摩尔)的DCM(30mL)溶液中加入氯化氢的乙酸乙酯(20mL，4M)溶液。将反应混合物在15℃下搅拌2小时。减压除去溶剂，然后高真空浓缩，得到白色固体的中间体化合物34(2.27g，粗产物)。

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：168.0(计算值：168.1)。

中间体化合物35：

在0℃下，向中间体化合物21(1g，3.98毫摩尔)的四氢呋喃(10mL)溶液中加入中间体化合物34(1.1g，3.98毫摩尔)和DIEA(1.54g，11.9毫摩尔)的DCM(5mL)溶液的混合物。将反应混合物在15℃下搅拌16小时。粗产物的反应混合物通过反MPLC纯化(用甲醇/H

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：382.1(计算值：382.1)。

1

中间体化合物36：

在25℃下，向中间体化合物35(150mg，392.5微摩尔)的NMP(1.5mL)溶液的混合物中加入DIEA(101.44mg，784.9微摩尔)和双(2-甲氧基乙基)胺(522.71mg，3.9毫摩尔)。然后在微波下将反应混合物在180℃下搅拌1小时。将反应混合物倒入水(20mL)中，用氯仿(10mL，2次)萃取。合并的有机相用盐水(20mL)洗涤，用Na

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：576.4(计算值：576.3)

中间体化合物37：

在25℃下，向中间体化合物22(200mg，607.64微摩尔)和双(2-乙氧基乙基)胺(489.88mg，3.04毫摩尔)的NMP(2mL)溶液中加入DIEA(196.33mg，1.52毫摩尔，264.60μL)。在微波下将反应混合物于150℃下搅拌1小时。反应混合物在水(10mL)之间分配，并用乙酸乙酯(5mL，3次)萃取。合并的有机相用盐水(10mL)洗涤，用Na

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：579.4(计算值：579.3)

中间体化合物38：

将中间体化合物16(60mg，114.59微摩尔，1当量)、DBU(25.99mg，170.73微摩尔，25.73μL，1.49当量)和BOP(65.88mg，148.96微摩尔，1.3当量)的DMF(1.5mL)溶液在0℃下搅拌20分钟。向混合物中加入(3-(三氟甲氧基)苯基)甲胺(65.71mg，343.76微摩尔，3当量)。将混合物在0℃至16℃搅拌15小时。用DCM(20mL)稀释反应混合物，用盐水(20mL，3次)洗涤有机溶液。合并的有机层用无水Na

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：697.4(计算值：697.3)

中间体化合物39：

在20℃下，向3-(三氟甲氧基)苯甲醛(100mg，525.9微摩尔)的MeOH(2mL)溶液中加入甲胺(217.8mg，2.1毫摩尔，30％的EtOH溶液)。在20℃下搅拌2小时后，在N

1

中间体化合物40：

在N

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：165.1(计算值：165.1)。

1

中间体化合物41：

向3-(甲基磺酰基)苯甲醛(400mg，2.17毫摩尔)的MeOH(8mL)溶液中加入甲胺(899.1mg，8.6毫摩尔，30％的EtOH溶液)和AcOH(13.0mg，217.1微摩尔)。将混合物在20℃下搅拌2小时。然后在N

1

中间体化合物42：

在N

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：201.1(计算值：201.1)。

1

中间体化合物43：

在N

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：157.9(计算值：158.1)。

1

中间体化合物44：

将中间体化合物2(0.7g，1.64毫摩尔，1当量)、3-((2-甲氧基乙基)氨基)丙酸乙酯(718.4mg，4.10毫摩尔，2.5当量)和DIEA(847.97mg，6.56毫摩尔，1.14mL，4.0当量)的NMP(2mL)溶液的混合物在微波下于140℃搅拌2小时。将混合物倒入水(40mL)中，用乙酸乙酯(100mL)萃取。有机层用Na

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：566.5(计算值：566.3)

中间体化合物45：

将中间体化合物44(560mg，989微摩尔，1当量)、双(2-甲氧基乙基)胺(1.19g，8.90毫摩尔，9当量)和DIEA(511mg，3.95毫摩尔，688μL，4当量)的NMP(1.5mL)溶液的混合物在微波下于190℃搅拌2小时。过滤混合物，滤液通过制备型-HPLC(色谱柱：Waters Xbridge C18150×50mm×10μm；条件：水(10mM NH

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：663.5(计算值：663.4)

中间体化合物46：

将中间体化合物16(300mg，572.93微摩尔，1当量)、BOP(330mg，746.13微摩尔，1.3当量)和DBU(132mg，867.05微摩尔，130.69μL，1.51当量)的DMF(2mL)溶液在0℃下搅拌0.5小时。向混合物中加入哌啶-4-醇(174mg，1.72毫摩尔，3当量)的DMF(0.5mL)溶液，在16℃下搅拌14.5小时。残余物通过制备型-HPLC(色谱柱：Waters Xbridge C18 150×50mm×10μm；流动相：[水(10mM NH

中间体化合物47：

将中间体化合物9，3-((2-羟乙基)氨基)丙酸乙酯(615mg，3.82毫摩尔，2当量)和DIEA(986mg，7.63毫摩尔，1.33mL，4当量)的NMP(2mL)溶液的混合物在微波下于190℃搅拌2小时。过滤混合物。粗产物通过制备型-HPLC(色谱柱：Waters Xbridge C18 150×50mm×10μm；条件：水(10mM NH

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：649.4(计算值：648.39)

中间体化合物48：

在0℃下，向中间体化合物23(200mg，382.70微摩尔)在二甲基甲酰胺(1.5mL)溶液中加入BOP(253.89mg，574.06微摩尔)和DBU(524.37mg，3.44毫摩尔)。将反应混合物在0℃下搅拌30分钟。30分钟后，加入4,5,6,7-四氢1H-吡唑并[3,4-C]吡啶(112.56mg，574.06微摩尔，2HCl盐)并在20℃下搅拌1.5小时。蒸发浓缩反应混合物，并通过制备型-HPLC(色谱柱：Waters Xbridge C18 100×30mm×10μm；条件：水(10mM NH

中间体化合物49：

向中间体化合物21(8.5g，33.80毫摩尔，1当量)的THF(150mL)溶液中加入DIEA(10.92g，84.51毫摩尔，14.72mL，2.5当量)，并冷却至0℃。在0℃下，将4-甲氧基哌啶(3.89g，33.80毫摩尔，1当量)的THF(20mL)溶液逐滴加入到反应混合物中。加入后，将混合物在25℃下搅拌12小时。浓缩反应混合物至干。用柠檬酸水溶液(20g/550mL)稀释残余物，并将悬浮液在20℃下搅拌1小时。然后过滤悬浮液，用水(50.0mL*3)洗涤滤饼。固体通过与ACN真空共沸脱水干燥，得到黄色固体的中间体化合物49(11.58g，粗产物)。

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：330.0(计算值：329.04)

中间体化合物50和51：

向中间体化合物49(35.8g，108.43毫摩尔，1当量)的NMP(110mL)溶液中加入DIEA(30.83g，238.54毫摩尔，41.55mL，2.2当量)和双(2-甲氧基乙基)胺(14.44g，108.43毫摩尔，16.01mL，1当量)。将混合物在115℃下搅拌5小时。过滤反应混合物。滤液通过制备型-HPLC(色谱柱：Phenomenex luna C18 150×25mm×10μm；流动相：[水(0.225％FA)-ACN]；B％：13％-43％，10分钟)纯化，得到黄色固体的中间体50(7.52g，16％产率)，和黄色固体的中间体化合物51(17.54g，38％产率)。

中间体50：

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：427.1(计算值：426.18)

/>

中间体51：

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：427.1(计算值：426.18)

中间体化合物52：

在0℃下，向中间体化合物50(2.3g，5.39毫摩尔，1当量)的DMF(23mL)溶液中加入DIEA(1.04g，8.08毫摩尔，1.41mL，1.5当量)和BOP(3.10g，7.00毫摩尔，1.3当量)。混合物在0℃下搅拌0.5小时。0.5小时后，将1-甲基哌嗪-2-酮(1.84g，16.16毫摩尔，3当量)加入混合物。将该混合物在20℃下搅拌12小时。向反应混合物中加入水(100mL)，用乙酸乙酯(80mL×2)萃取。有机层用盐水洗涤，用Na

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：523.2(计算值：522.24)

中间体化合物53：

在0℃下，向中间体化合物51(5g，11.71毫摩尔，1当量)的DMF(50mL)溶液中加入DIEA(2.27g，17.57毫摩尔，3.06mL，1.5当量)和BOP(6.73g，15.23毫摩尔，1.3当量)。混合物在0℃下搅拌0.5小时。0.5小时后，将1-甲基哌嗪-2-酮(4.01g，35.14毫摩尔，3当量)加入混合物。将混合物在20℃下搅拌12小时。向反应混合物中加入水(100mL)，用乙酸乙酯(100mL×3)萃取。有机层用盐水洗涤，用Na

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：523.1(计算值：522.24)

中间体化合物54：

将2-甲氧基-N-(4-甲氧基苄基)乙烷-1-胺(8g，40.97毫摩尔，1当量)、4-溴丁酸叔丁酯(9.14g，40.97毫摩尔，1当量)和K

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：338.3(计算值：337.22)

中间体化合物55：

在N

中间体化合物56和57：

向中间体化合物49(1g，3.03毫摩尔，1当量)的NMP(5mL)溶液中加入DIEA(782.89mg，6.06毫摩尔，1.06mL，2当量)和中间体化合物55(855.61mg，3.94毫摩尔，1.3当量)。将混合物在115℃搅拌5小时。过滤反应混合物。滤液通过制备型-HPLC(色谱柱：Phenomenex luna C18 150×40mm×15μm；流动相：[水(0.225％FA)-ACN]；B％：45％-75％，10分钟)纯化，得到白色固体的中间体化合物56(180mg，12％产率)和白色固体的中间体化合物57(560mg，36％产率)。

中间体56：

LCMS(ESI离子峰位置)Rt＝0.868分钟，m/z：(M+H)+：511.3(计算值：510.23)

中间体57：

LCMS(ESI离子峰位置)Rt＝0.952分钟，m/z：(M+H)+：511.3(计算值：510.23)

中间体化合物58：

将中间体化合物57(210mg，410.95微摩尔，1当量)、2-甲氧基-N-(2-甲氧基乙基)乙胺(547.34mg，4.11毫摩尔，606.80μL，10当量)和DIEA(637.35mg，4.93毫摩尔，858.96μL，12当量)溶于NMP的微波管(2mL)中。在微波下将密封的管在160℃下加热5小时。过滤反应混合物。滤液通过制备型-HPLC(色谱柱：Phenomenex Gemini-NX C18 75×30mm×3μm；流动相：[水(0.225％FA)-ACN]；B％：25％-55％，7分钟)纯化，得到黄色固体的中间体化合物58(65mg，26％产率)。

LCMS(ESI离子峰位置)Rt＝0.876分钟，m/z：(M+H)+：608.4(计算值：607.37)

中间体化合物59：

在0℃下，向中间体化合物58(60mg，98.73微摩尔，1当量)的DMF(2mL)溶液中加入DIEA(19.14mg，148.09微摩尔，25.79μL，1.5当量)和BOP(56.76mg，128.34微摩尔，1.3当量)。混合物在0℃下搅拌0.5小时。0.5小时后，将1-甲基哌嗪-2-酮(33.81mg，296.18微摩尔，3当量)加入混合物。将混合物在10℃下搅拌2小时。LCMS显示起始材料被完全消耗，并检测到期望的质量。反应混合物中加入水(30mL)，用乙酸乙酯(20mL×3)萃取。有机层用盐水洗涤，用Na

LCMS(ESI离子峰位置)Rt＝0.887分钟，m/z：(M+H)+：704.4(计算值：703.44)

中间体化合物60：

将中间体化合物56(180mg，352.24微摩尔，1当量)、2-甲氧基-N-(2-甲氧基乙基)乙胺(469.14mg，3.52毫摩尔，520.12μL，10当量)和DIEA(546.30mg，4.23毫摩尔，736.25μL，12当量)溶于NMP(2mL)的微波管中。在微波下将密封的管在160℃下加热5小时。过滤反应混合物。滤液通过制备型-HPLC(色谱柱：Phenomenex Gemini-NX C18 75×30mm×3μm；流动相：[水(0.225％FA)-ACN]；B％：25％-55％，7分钟)纯化，得黄色固体的中间体化合物60(160mg，74％产率)。

LCMS(ESI离子峰位置)Rt＝0.868分钟，m/z：(M+H)+：608.6(计算值：607.37)

中间体化合物61：

/>

在0℃下，向中间体化合物60(80mg，131.64微摩尔，1当量)的DMF(3mL)溶液中加入DIEA(25.52mg，197.45微摩尔，34.39μL，1.5当量)和BOP(75.69mg，171.13微摩尔，1.3当量)。混合物在0℃下搅拌0.5小时。0.5小时后，将1-甲基哌嗪-2-酮(45.08mg，394.91微摩尔，3当量)加入混合物。将该混合物在10℃下搅拌2小时。反应混合物中加入水(50mL)，用乙酸乙酯(30mL×3)萃取。有机层用盐水洗涤，用Na

LCMS(ESI离子峰位置)Rt＝0.901分钟，m/z：(M+H)+：704.5(计算值：703.44)

中间体化合物62：

将2-(苄氨基)乙醇(300mg，1.98毫摩尔，280.37μL，1当量)、N-甲基-N-(2-氧乙基)氨基甲酸叔丁酯(378.02mg，2.18毫摩尔，1.1当量)、NaBH

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：309.3(计算值：308.21)

中间体化合物63：

将中间体化合物62(790mg，2.56毫摩尔，1当量)的HCl/二氧六环(4M，10.25mL，16当量)溶液的混合物在25℃搅拌12小时。减压浓缩混合物，得到白色油状的中间体化合物63(750mg，粗产物)。

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：209.2(计算值：208.16)

中间体化合物64：

/>

向中间体化合物63(650mg，3.12毫摩尔，1当量)的DCM(9mL)溶液中加入TEA(1.58g，15.60毫摩尔，2.17mL，5当量)和乙酰氯(367.43mg，4.68毫摩尔，334.03μL，1.5当量)，在5℃下搅拌2小时。用100mL水稀释反应混合物，用二氯甲烷(50mL×2)萃取。合并的有机层用50mL盐水洗涤，用Na

中间体化合物65：

将中间体化合物64(220mg，878.82微摩尔，1当量)和Pd/C(100mg，10％纯度)的EtOH(5mL)溶液的混合物脱气并用H

中间体化合物66：

向3-甲基磺酰基丙烷-1-醇化合物1(5g，36.18毫摩尔，1当量)的DCM(50mL)溶液中加入Dess Martin高碘酸烷(18.42g，43.42毫摩尔，13.44mL，1.2当量)。将反应在25℃下搅拌2小时。真空浓缩反应混合物。残余物通过硅胶柱色谱(乙酸乙酯100％)纯化，得到黄色液体的3-甲基磺酰基丙醛(1.4g，28.41％产率)。

中间体化合物67：

向2-氨基乙醇(134.57mg，2.20毫摩尔，133.24μL，1当量)、中间体化合物66(300mg，2.20毫摩尔，266.75μL，1当量)和DCE(5mL)的混合物中分批加入乙酸(396.90mg，6.61毫摩尔，378.00μL，3当量)、NaBH

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：182.1(计算值：181.08)

中间体化合物68：

在5℃下，向咪唑(2g，29.38毫摩尔，1当量)的THF(50mL)溶液中加入NaH(1.41g，35.25毫摩尔，60％纯度，1.2当量)。加入后，将混合物在该温度下搅拌0.5小时，然后向混合物中加入(2-溴乙基)氨基甲酸叔丁酯(6.58g，29.38毫摩尔，1当量)。将产生的混合物在20℃下搅拌12小时。将反应混合物在H

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：212.2(计算值：211.13)

中间体化合物69：

向中间体化合物68(1.4g，6.63毫摩尔，1当量)的DMF(20mL)溶液中加入NaH(530.10mg，13.25毫摩尔，60％纯度，2当量)。混合物在0℃下搅拌0.5小时。然后向混合物中加入1-溴-2-甲氧基乙烷(2.76g，19.88毫摩尔，1.87mL，3当量)，混合物在20℃下搅拌12小时。将反应混合物在100mL水和150mL乙酸乙酯之间分配。分离有机相，用H

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：270.2(计算值：269.17)

中间体化合物70：

向中间体化合物69(1.3g，4.83毫摩尔，1当量)的HCl/二氧六环(4M，12.07mL，10当量)溶液中，将混合物在20℃搅拌3小时。将反应混合物减压浓缩以除去溶剂，得到黄色油状的中间体化合物70(1.0g，粗产物)。

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：170.2(计算值：169.12)

中间体化合物71：

向2-甲氧基乙胺(165.48mg，2.20毫摩尔，1当量)和中间体化合物66(300mg，2.20毫摩尔，1当量)的DCE(5mL)溶液的混合物中分批加入乙酸(396.90mg，6.61毫摩尔，378.00μL，3当量)和NaBH

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：196.2(计算值：195.09)

中间体化合物72：

将中间体化合物50(200mg，468.50微摩尔，1当量)、4,5,6,7-四氢-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶(230.79mg，1.87毫摩尔，4当量)和DIEA(302.75mg，2.34毫摩尔，408.02μL，5当量)加入到NMP(2mL)的微波管中。在微波下将密封的管在180℃下加热2小时。过滤反应混合物。滤液通过制备型-HPLC(色谱柱：Phenomenex luna C18 150×25mm×10μm；流动相：[水(0.225％FA)-ACN]；B％：13％-43％，10分钟)纯化，得到黄色胶状的中间体化合物72(80mg，33％产率)。

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：514.2(计算值：513.28)。

中间体化合物73：

将中间体化合物51(200mg，468.50微摩尔，1当量)、4,5,6,7-四氢-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶(230.79mg，1.87毫摩尔，4当量)和DIEA(302.75mg，2.34毫摩尔，408.02μL，5当量)加入到NMP(2mL)的微波管中。在微波下将密封的管在180℃下加热2小时。过滤反应混合物。滤液通过制备型-HPLC(色谱柱：Phenomenex luna C18 150×25mm×10μm；流动相：[水(0.225％FA)-ACN]；B％：13％-43％，10分钟)纯化，得到黄色固体的中间体化合物73(140mg，58％产率)。

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：514.3(计算值：513.28)

中间体化合物74：

向哌嗪(1.50g，17.41毫摩尔，2.76当量)的DCM(30mL)溶液中缓慢加入2-氯-3-硝基吡啶(1g，6.31毫摩尔，1当量)。将混合物在25℃下搅拌12小时。反应混合物用水(60mL×3)洗涤。合并的有机层用盐水洗涤，用无水Na

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：209.1(计算值：208.10)

中间体化合物75：

在N

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：179.1(计算值：178.12)

中间体化合物76：

在N

中间体化合物77：

将3-氧代哌嗪-1-羧酸叔丁酯化合物1(1g，4.99毫摩尔，1当量)、DMAP(1.83g，14.98毫摩尔，3当量)、Cu(OAc)

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：241.2(计算值：240.15)

/>

向4-环丙基-3-氧代-哌嗪-1-羧酸叔丁酯(348mg，1.45毫摩尔，1当量)的DCM(3.5mL)溶液中加入TFA(1.08g，9.45毫摩尔，0.7mL，6.53当量)并在25℃下搅拌2小时。将混合物真空浓缩。通过除去TFA树脂将黄色油状产物(500mg，粗产物)处理至pH约为8，过滤，得到浅棕色油状的中间体化合物77(128mg，63％产率)。

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：140.8(计算值：140.09)

中间体化合物78：

向中间体化合物49(1.29g，3.92毫摩尔，1当量)的NMP(10mL)溶液中加入中间体化合物18(1g，3.92毫摩尔，1当量)和DIPEA(1.11g，8.62毫摩尔，1.50mL，2.2当量)。将混合物在115℃下搅拌12小时。残余物通过制备型-HPLC(色谱柱：Phenomenex luna C18 150×25mm×10μm；流动相：[水(0.225％FA)-ACN]；B％：13％-43％，10分钟)纯化，得到红色固体的中间体化合物78(780mg，36％产率)。

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：549.2(计算值：548.21)

中间体化合物79：

在0℃下，向中间体化合物78(180mg，327.86微摩尔，1当量)的DMF(5mL)溶液中加入DIPEA(63.56mg，491.79微摩尔，85.66μL，1.5当量)和BOP(188.51mg，426.22微摩尔，1.3当量)并搅拌0.5小时。然后加入1-甲基哌嗪-2-酮(112.27mg，983.57微摩尔，3当量)，并将混合物在20℃下搅拌2.5小时。将反应混合物真空浓缩。残余物通过制备型-HPLC(色谱柱：Phenomenex luna C18 150×25mm×10μm；流动相：[水(0.225％FA)-ACN]；B％：13％-43％，10分钟)纯化，得到黄色固体的化合物79(180mg，85％产率)。

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：645.4(计算值：644.28)

中间体化合物80：

向中间体化合物21(400mg，1.59毫摩尔，1当量)的THF(5mL)溶液中加入DIEA(513.98mg，3.98毫摩尔，692.69μL，2.5当量)，并冷却至0℃。在0℃下，将2-甲基-5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪(219.79mg，1.59毫摩尔，1当量)的THF(5mL)溶液逐滴加入到反应混合物中。加入后，将混合物在25℃下搅拌12小时。将反应混合物真空浓缩。用柠檬酸水溶液(1.82g/50mL)稀释该残余物，并将该悬浮液在20℃搅拌1小时。然后过滤悬浮液，用水(20.0mL×3)洗涤滤饼，然后真空干燥，得到黄色固体的中间体化合物80(600mg，粗产物)。

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：352.8(计算值：352.03)

中间体化合物81：

将中间体化合物80(180mg，509.68微摩尔，1当量)、双(2-甲氧基乙基)胺(678.83mg，5.10毫摩尔，752.58μL，10当量)和DIEA(658.72mg，5.10毫摩尔，887.76μL，10当量)溶于NMP(2mL)的微波管中。在微波下将密封的管在180℃下加热2小时。过滤反应混合物。滤液通过制备型-HPLC(色谱柱：Phenomenex luna C18 150×25mm×10μm；流动相：[水(0.225％FA)-ACN]；B％：13％-43％，10分钟)纯化，得到黄色固体的化合物81(260mg，93％产率)。

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：547.2(计算值：546.30)

中间体化合物82和83：

向中间体化合物49(6.5g，19.69毫摩尔，1当量)的NMP(20mL)溶液中加入中间体化合物17(5.03g，19.69毫摩尔，1当量)和DIPEA(5.60g，43.31毫摩尔，7.54mL，2.2当量)。将混合物在115℃下搅拌12小时。将反应混合物真空浓缩。残余物通过制备型-HPLC(色谱柱：Phenomenex luna C18 150×25mm×10μm；流动相：[水(0.225％FA)-ACN]；B％：13％-43％，10分钟)纯化，得到红色固体的中间体化合物82(1.2g，11％产率)和黄色固体的中间体化合物83(3.8g，35％产率)。

中间体化合物82：

LCMS(ESI离子峰位置)Rt＝0.878，m/z：(M+H)+：549.3(计算值：548.21)

中间体化合物83：

LCMS(ESI离子峰位置)Rt＝0.951，m/z：(M+H)+：549.3(计算值：548.21)

中间体化合物84：

在0℃下，向中间体化合物82(500mg，910.72微摩尔，1当量)的DMF(5mL)溶液中加入DIPEA(176.56mg，1.37毫摩尔，237.95μL，1.5当量)和BOP(523.63mg，1.18毫摩尔，1.3当量)，并搅拌0.5小时。然后向混合物中加入1-甲基哌嗪-2-酮(311.86mg，2.73毫摩尔，3当量)，并将混合物在20℃搅拌2.5小时。反应混合物真空浓缩。残余物通过制备型-HPLC(色谱柱：Phenomenex luna C18 150×25mm×10μm；流动相：[水(0.225％FA)-ACN]；B％：13％-43％，10分钟)纯化，得到黄色固体的中间体化合物84(400mg，68％产率)。

LCMS(ESI离子峰位置)Rt＝1.037，m/z：(M+H)+：645.2(计算值：644.28)

中间体化合物85：

在0℃下，向中间体化合物83(500mg，910.72微摩尔，1当量)的DMF(1mL)溶液中加入DIPEA(176.56mg，1.37毫摩尔，237.95μL，1.5当量)和BOP(523.63mg，1.18毫摩尔，1.3当量)，并搅拌0.5小时。然后向混合物中加入1-甲基哌嗪-2-酮(311.86mg，2.73毫摩尔，3当量)，并将混合物在20℃下搅拌2.5小时。将反应混合物真空浓缩。残余物通过制备型-HPLC(色谱柱：Phenomenex luna C18 150×25mm×10μm；流动相：[水(0.225％FA)-ACN]；B％：13％-43％，10分钟)纯化，得到黄色固体的中间体化合物85(450mg，76％产率)。

LCMS(ESI离子峰位置)Rt＝1.031，m/z：(M+H)+：645.2(计算值：644.28)

中间体化合物86：

将中间体化合物49(150mg，454.31微摩尔，1当量)、2-((2-甲氧基乙基)氨基)乙烷-1-醇(541.37mg，4.54毫摩尔，10当量)和DIEA(587.17mg，4.54毫摩尔，791.33μL，10当量)溶于NMP(1.5mL)的微波管中。在微波下将密封的管在180℃下加热2小时。过滤反应混合物。滤液通过制备型-HPLC(色谱柱：Phenomenex luna C18 150×25mm×10μm；流动相：[水(0.05％FA)-ACN]；B％：13％-43％，10分钟)纯化，得到黄色固体的中间体化合物86(180mg，粗产物)。

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：496.2(计算值：495.28)

中间体化合物87：

将中间体化合物51(1.00g，2.34毫摩尔，1当量)、2,2’-氮杂二基双(乙烷-1-醇)(2.46g，23.42毫摩尔，2.26mL，10当量)和DIEA(1.51g，11.71毫摩尔，2.04mL，5当量)加入到NMP(4mL)的微波管中。在微波下将密封的管在180℃下加热2小时。过滤反应混合物。滤液通过制备型-HPLC(色谱柱：Phenomenex luna C18 150×25mm×10μm；流动相：[水(0.05％FA)-ACN]；B％：13％-43％，10分钟)纯化，得到黄色固体的中间体化合物87(530mg，46％产率)。

LCMS(ESI离子峰位置)tR＝0.788分钟，m/z，m/z：(M+H)+：496.4(计算值：495.28)

中间体化合物88：

将中间体化合物50(1g，2.34毫摩尔，1当量)、2,2’-氮杂二基双(乙烷-1-醇)(2.46g，23.42毫摩尔，2.26mL，10当量)和DIEA(1.51g，11.71毫摩尔，2.04mL，5当量)加入到NMP(4mL)的微波管中。在微波下将密封的管在180℃下加热2小时。过滤反应混合物。滤液通过制备型-HPLC(色谱柱：Phenomenex luna C18 150×25mm×10μm；流动相：[水(0.05％FA)-ACN]；B％：13％-43％，10分钟)纯化，得到黄色固体的中间体化合物88(530mg，46％产率)。

LCMS(ESI离子峰位置)tR＝0.787分钟，m/z，m/z：(M+H)+：496.3(计算值：495.28)

中间体化合物89：

向6-甲基哌嗪-2-酮(900mg，7.88毫摩尔，1当量)的DCM(9mL)溶液中加入Boc

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：215.2(计算值：214.13)

向3-甲基-5-氧代哌嗪-1-羧酸叔丁酯(710mg，3.31毫摩尔，1当量)的DMF(8.5mL)溶液中加入NaH(198.80mg，4.97毫摩尔，60％纯度，1.5当量)，并于0℃下搅拌0.5小时。在0℃搅拌下向混合物中加入甲基碘(705.52mg，4.97毫摩尔，309.44μL，1.5当量)。然后将混合物在25℃下搅拌3小时。用100mL饱和氯化铵水溶液稀释反应混合物，用乙酸乙酯(50mL×2)萃取。合并的有机层用100mL盐水洗涤，用Na

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：229.2(计算值：228.15)

/>

向3,4-二甲基-5-氧代哌嗪-1-羧酸叔丁酯(416mg，1.82毫摩尔，1当量)的混合物中加入HCL/MeOH(4M，2mL，4.39eq)中，并于20℃下搅拌2小时。将混合物真空浓缩，得到棕色胶状的中间体89(370mg，85％产率)，无需进一步纯化即可使用。

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：129.2(计算值：128.09)

中间体化合物90：

按照由6,6-二甲基哌嗪-2-酮得到的中间体化合物89所述的方案，得到白色固体的中间体化合物90(142mg，68％产率)。

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：143.2(计算值：142.11)

中间体化合物91：

向中间体化合物49(480mg，1.45毫摩尔，1当量)的NMP(3mL)溶液中加入DIPEA(1.88g，14.54毫摩尔，2.53mL，10当量)和2,2’-氮杂二基双(乙烷-1-醇)(1.53g，14.54毫摩尔，1.40mL，10当量)。混合物在微波下于180℃搅拌2小时。将反应混合物真空浓缩。残余物通过制备型-HPLC(色谱柱：Phenomenex luna C18 150×25mm×10μm；流动相：[水(0.05％FA)-ACN]；B％：13％-43％，10分钟)纯化，得到黄色固体的中间体化合物91(300mg，44％产率)。

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：468.2(计算值：467.25)

中间体化合物92：

向中间体化合物49(2g，6.06毫摩尔，1当量)和2,2’-氮杂二基双(乙烷-1-醇)(636.86mg，6.06毫摩尔，1当量)的NMP(20mL)溶液的混合物中加入DIEA(1.72g，13.33毫摩尔，2.32mL，2.2当量)，并将混合物在115℃下搅拌16小时。混合物通过制备型-HPLC(色谱柱：Phenomenex luna C18 150×40mm×15μm；流动相：[水(0.05％FA)-ACN]；B％：15％-45％，10分钟；波长：220&254nm)纯化，得到浅黄色固体的中间体化合物92(900mg，37％产率)。

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：399.2(计算值：398.15)

中间体化合物93：

将中间体化合物92(495.69mg，2.51毫摩尔，10当量，HCl)和DIEA(648.09mg，5.01毫摩尔，873.43μL，20当量)的NMP(0.5mL)溶液的混合物在10℃下搅拌0.5小时，加入双(2-甲氧基丙基)胺(100mg，250.72微摩尔，1当量)，然后将混合物在微波下于180℃搅拌8小时。混合物通过制备型-HPLC(色谱柱：Phenomenex Synergi C18 150×25mm×10μm；流动相：[水(0.1％TFA)-ACN]；B％：22％-52％，10分钟；波长：220&254nm)纯化，得到棕色油状的中间体化合物93(70mg，粗产物)。

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：524.6(计算值：523.31)

中间体化合物94：

/>

将3,3’-氮杂二基双(丙烷-1-醇)(3g，22.52毫摩尔，1当量)在DCM(15mL)中的溶液冷却至0℃，在0℃下将Boc

将NaH(857.16mg，21.43毫摩尔，60％纯度，2.5当量)的DMF(15mL)溶液的混合物冷却至0℃。将双(3-羟丙基)氨基甲酸叔丁酯(2g，8.57毫摩尔，1当量)在DMF(10mL)中的溶液逐滴加入至混合物中。混合物在0℃下搅拌30分钟。30分钟后，将碘甲烷(3.65g，25.72毫摩尔，1.60mL，3当量)在DMF(5mL)中的溶液逐滴加入到反应混合物中。将混合物加热至25℃并搅拌12小时。将反应混合物缓慢倒入0℃的饱和NH

在0℃下，向双(3-甲氧基丙基)氨基甲酸叔丁酯(1.81g，6.93毫摩尔，1当量)的二氧六环(10mL)溶液中加入HCl/二氧六环(4摩尔，20mL，11.55当量)。将混合物在20℃搅下拌3小时。真空除去溶剂，得到灰白色固体的中间体化合物94(1.37g，粗产物)。

中间体化合物95：

向中间体化合物49(2g，6.06毫摩尔，1当量)的NMP(8mL)溶液中加入DIEA(1.72g，13.33毫摩尔，2.32mL，2.2当量)和3,3'-氮杂二基双(丙烷-1醇)(806.79mg，6.06毫摩尔，1当量)。将该混合物在115℃下搅拌5小时。过滤反应混合物。滤液通过制备型-HPLC(色谱柱：Phenomenex luna C18 150×40mm×15μm；流动相：[水(0.1％TFA)-ACN]；B％：16％-46％，11分钟)纯化，得到黄色固体的中间体化合物95(460mg，18％产率)。

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：427.1(计算值：426.18)

中间体化合物96：

将中间体化合物95(220mg，515.35微摩尔，1当量)、中间体化合物94(1.22g，6.18毫摩尔，12当量，HCl)和DIEA(1.13g，8.76毫摩尔，1.53mL，17当量)溶于NMP(2mL)的微波管中。在微波下将密封的管在180℃下加热2小时。过滤反应混合物。滤液通过制备型-HPLC(色谱柱：Phenomenex luna C18 150×25mm×10μm；流动相：[水(0.05％FA)-ACN]；B％：13％-43％，10分钟)纯化，得到黄色固体的中间体化合物96(187mg，66％产率)。

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：552.4(计算值：551.34)

中间体化合物97：

向2-甲氧基-N-(4-甲氧基苄基)乙烷-1-胺(1g，5.12毫摩尔，1当量)和3-溴丙酸乙酯(1.04g，5.74毫摩尔，731.25μL，1.12当量)的DMF(10mL)溶液的混合物中加入K

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：296.4(计算值：295.18)

将3-((4-甲氧基苄基)(2-甲氧基乙基)氨基)丙酸乙酯(850mg，2.88毫摩尔，1当量)的MeOH(20mL)溶液的混合物用Ar脱气，向混合物中加入湿Pd/C(500mg，1.44毫摩尔，10％纯度，0.5当量)，将混合物在H

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：162.2(计算值：161.10)

中间体化合物98：

向中间体化合物52(150mg，286.79微摩尔，1当量)的NMP(3mL)溶液的混合物中加入中间体化合物97(693.46mg，4.30毫摩尔，15当量)和DIEA(555.99mg，4.30毫摩尔，749.31μL，15当量)，将混合物加热至180℃并在微波下搅拌2小时。过滤反应混合物。滤液通过制备型-HPLC(色谱柱：Waters Xbridge 150×25mm×5μm；流动相：[水(10mM NH

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：648.4(计算值：647.37)

中间体化合物99：

将中间体化合物53(160mg，305.91微摩尔，1当量)、3-((2-甲氧基乙基)氨基)丙酸乙酯(按照中间体化合物97的方案，在对甲氧基苄基去保护步骤中使用乙醇)(804.05mg，4.59毫摩尔，15当量)和DIEA(593.05mg，4.59毫摩尔，799.26μL，15当量)溶于NMP(3mL)中的微波管中。在微波下将密封的管在180℃加热1.5小时。过滤反应混合物。滤液通过制备型-HPLC(色谱柱：Waters Xbridge 150×25mm×5μm；流动相：[水(10mM NH

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：662.4(计算值：661.39)

中间体化合物100：

向2-甲氧基乙烷-1-胺(2g，26.63毫摩尔，2.31mL，1当量)和4-甲酰基苯甲酸甲酯(4.37g，26.63毫摩尔，1当量)的DCM(20mL)溶液中一次性加入4A°MS(2g，26.63毫摩尔，1当量)。将该反应混合物在20℃下搅拌12小时。向混合物中加入甲醇(5mL)并冷却至0℃，在0℃下分批加入NaBH

中间体化合物101：

向中间体化合物22(1.12g，3.40毫摩尔，1当量)的NMP(4mL)溶液中加入DIEA(967.51mg，7.49毫摩尔，1.30mL，2.2当量)和双(2-甲氧基乙基)胺(453.21mg，3.40毫摩尔，502.45μL，1当量)。将该混合物在115℃下搅拌5小时。过滤反应混合物。滤液通过制备型-HPLC(色谱柱：Phenomenex Luna C18 150×40mm×15μm；流动相：[水(0.05％FA)-ACN]；B％：14-44％，10分钟)纯化，得到灰白色固体的中间体化合物101(640mg，44％产率)，以及中间体化合物101的同分异构体(180mg，粗产物)。

中间体化合物101：

LCMS(ESI离子峰位置)0.718分钟，m/z：(M+H)+：426.3(计算值：425.16)

中间体化合物101的同分异构体：

LCMS(ESI离子峰位置)0.657分钟，m/z：(M+H)+：426.3(计算值：425.16)

中间体化合物102：

将中间体化合物101(150mg，352.22微摩尔，1当量)和中间体化合物100(786.40mg，3.52毫摩尔，10当量)的混合物在130℃下搅拌16小时。用MeCN(3mL)稀释混合物并过滤。滤液通过制备型-HPLC(色谱柱：Phenomenex Luna C18 150×40mm×15μm；流动相：[水(0.05％FA)-ACN]；B％：15％-45％，10分钟)纯化，得到黄色固体的中间体化合物102(100mg，37％产率，79％纯度)。

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：613.4(计算值：612.30)

中间体化合物103：

在0℃下，向中间体化合物102(100mg，163.22微摩尔，1当量)和DIPEA(84.38mg，652.87微摩尔，113.72μL，4当量)的DMF(1mL)溶液的混合物中加入BOP(86.63mg，195.86微摩尔，1.2当量)。混合物在0℃搅拌0.5小时。然后加入2-甲基-4,5,6,7-四氢

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：733.3(计算值：732.37)

中间体化合物104：

将2-甲氧基乙烷-1-胺(217.03mg，2.89毫摩尔，251.19μL，1当量)、2-氟-4-甲酰基苯甲酸甲酯(500mg，2.75毫摩尔，0.95当量)和AcOH(173.52mg，2.89毫摩尔，165.26μL，1当量)、4AMS(500mg)的MeOH(5mL)溶液的混合物在15℃搅拌2小时。向混合物中加入NaBH

中间体化合物105：

将中间体化合物52(150mg，286.79微摩尔，1当量)、中间体化合物104(103.79mg，430.19微摩尔，1.5当量)、RuPhos Pd G4(24.39mg，28.68微摩尔，0.1当量)、Cs

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：728.4(计算值：727.38)

中间体化合物106：

在0℃下，向(2-甲氧基乙基)氨基甲酸叔丁酯(500mg，2.85毫摩尔，1当量)的DMF(10mL)溶液中加入NaH(171.19mg，4.28毫摩尔，60％纯度，1.5当量)，混合物在0℃下搅拌0.5小时。然后在0℃下向混合物中加入4-(溴甲基)-2-甲氧基苯甲酸甲酯(813.26mg，3.14毫摩尔，1.1当量)。将所得混合物在15℃下搅拌1小时。将混合物倒入冰-NH

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：254.2(M–100)(计算值：353.18)

在0℃下，向4-(((叔丁氧基羰基)(2-甲氧基乙基)氨基)-2-甲氧基苯甲酸甲酯(650mg，1.84毫摩尔，1当量)的乙酸乙酯(2mL)溶液中加入HCl/乙酸乙酯(4M，4mL)。将混合物在15℃搅拌1小时。将混合物真空浓缩。残余物用NaHCO

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：253.8(M–100)(计算值：253.13)

中间体化合物107：

在N

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：740.4(计算值：739.40)

中间体化合物108：

在N

在0℃下，向4-甲酰基-2-甲基苯甲酸甲酯(1g，5.61毫摩尔，1当量)的MeOH(20mL)溶液中加入AcOH(337.01mg，5.61毫摩尔，320.96μL，1当量)、4AMS(1g)和2-甲氧基乙烷-1-胺(421.53mg，5.61毫摩尔，487.88μL，1当量)。将混合物在20℃下搅拌1小时，然后在20℃下分批加入NaBH3CN(705.34mg，11.22毫摩尔，2当量)，并将混合物在20℃下搅拌12小时。过滤并真空浓缩反应混合物。残余物通过制备型-HPLC(色谱柱：Waters Xbridge C18 150×50mm×10μm；流动相：[水(10mM NH

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：238.2(计算值：237.14)

中间体化合物109：

在N

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：724.5(计算值：723.41)

中间体化合物110：

将4-氯-3-(三氟甲基)苯甲醛(3g，14.38毫摩尔，1当量)、Pd(dppf)Cl2(2.10g，2.88毫摩尔，0.2当量)、TEA(4.37g，43.15毫摩尔，6.01mL，3当量)的MeOH(30mL)溶液的悬浮液在CO(50psi)下于80℃搅拌24小时。过滤并浓缩反应混合物。残余物通过快速硅胶色谱(

/>

在0℃下，向4-甲酰基-2-(三氟甲基)苯甲酸甲酯(700mg，3.02毫摩尔，1当量)的MeOH(10mL)溶液中加入AcOH(181.07mg，3.02毫摩尔，172.45μL，1当量)、4AMS(700mg)和2-甲氧基乙烷-1-胺(226.47mg，3.02毫摩尔，262.12μL，1当量)。将混合物在10℃下搅拌3小时，然后在10℃下分批加入NaBH3CN(378.96mg，6.03毫摩尔，2当量)，并将混合物在10℃下搅拌12小时。过滤并浓缩反应混合物。残余物通过制备型-HPLC(色谱柱：Waters XbridgeC18 150×50mm×10μm；流动相：[水(10mM NH

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：292.0(计算值：291.11)

中间体化合物111：

在N

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：778.5(计算值：777.38)

中间体化合物112：

将4-(溴甲基)-2,6-二氟苯甲酸甲酯(400mg，1.51毫摩尔，当量)的2-甲氧基乙胺(2.59g，34.51毫摩尔，3mL，23当量)溶液的混合物在15℃下搅拌2小时。将混合物真空浓缩。残余物通过制备型-HPLC(色谱柱：Phenomenex Gemini-NX C18 75×30mm×3μm；流动相：[水(0.05％氢氧化氨v/v)-ACN]；B％：18％-48％，7分钟)纯化，得到黄色油状的中间体化合物112(200mg，50％产率)。

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：259.8(计算值：259.1)

中间体化合物113：

将中间体化合物52(150mg，286.79微摩尔，1当量)、中间体化合物112(111.53mg，430.19微摩尔，1.5当量)、Ruphos Pd G4(73.17mg，86.04微摩尔，0.3当量)和Cs

实施例I.2.最终化合物的合成

化合物1：

将中间体化合物1(180mg，336.15微摩尔，1当量)、双(2-甲氧基乙基)胺(405mg，3.04毫摩尔，449.00μL，9.05当量)和DIEA(174mg，1.35毫摩尔，234.50μL，4.01当量)的NMP(0.5mL)溶液的混合物在微波下于180℃搅拌3小时。过滤反应混合物。滤液通过制备型-HPLC(色谱柱：Phenomenex Synergi C18 150×25×10μm；流动相：[水(0.225％FA)-ACN]；B％：38％-68％，9分钟)纯化，得到黄色固体的化合物1(9.1mg，3.5％产率，94％纯度)。LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：729.3(计算值：728.34)

化合物2：

将中间体化合物2(200mg，468.03微摩尔，1当量)和双(2-甲氧基乙基)胺(562mg，4.22毫摩尔，623.06μL，9.02当量)的NMP(0.5mL)溶液密封，并在微波中于180℃加热2小时。在25℃下，反应混合物通过加入30mL水猝灭，并用40mL乙酸乙酯(20mL×2)萃取。合并的有机层用[Na

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：621.4(计算值：620.40)

化合物3：

将中间体化合物3(230mg，449.75微摩尔，1当量)和双(2-甲氧基乙基)胺(500mg，3.75毫摩尔，8.35当量)的混合物在微波中于100℃加热1小时，并于170℃加热1小时。反应混合物倒入水(10mL)中，用乙酸乙酯(20mL，3次)萃取。浓缩后，获得的黄色固体通过制备型-HPLC(色谱柱：Phenomenex Synergi C18 150×25×10μm；流动相：[水(0.225％FA)-ACN]；B％：35％-65％，10分钟)，得到黄色固体的化合物3(45mg，14.2％产率，100％纯度)纯化。

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：705.3(计算值：704.42)

化合物4：

将中间体化合物8(200mg，342.78微摩尔，1当量)和双(2-甲氧基乙基)胺(411mg，3.09毫摩尔，455.65μL，9当量)的NMP(0.5mL)溶液密封，并在微波中于180℃加热4小时。在25℃下，反应混合物通过加入30mL水猝灭，并用乙酸乙酯萃取(20mL，2次)。合并的有机层用Na

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：777.4(计算值：776.42)

化合物11：

将中间体化合物30(100mg，208.70微摩尔，1当量)、双(2-甲氧基乙基)胺(250mg，1.88毫摩尔，277.16μL，8.99当量)和DIEA(67mg，518.40微摩尔，90.30μL，2.48当量)的NMP(1mL)溶液密封，并在微波中于180℃加热4小时。用水20mL稀释反应混合物，用乙酸乙酯(10mL，3次)萃取。合并的有机层用Na

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：673.3(计算值：672.28)

化合物12：

将中间体化合物29(10mg，18.20微摩尔，1当量)、DBU(8mg，52.55微摩尔，7.92μL，2.89当量)和BOP(11mg，24.87微摩尔，1.37当量)的DMF(0.4mL)溶液的混合物在16℃下搅拌0.5小时。向混合物中加入苯甲胺(6mg，55.99微摩尔，6.10μL，3.08当量)的DMF(0.1mL)溶液，在16℃下搅拌1.5小时。残余物通过制备型-HPLC(色谱柱：Waters XBridge 150×25mm×5μm；流动相：[水(10mM NH

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：639.4(计算值：638.32)

化合物13：

将中间体化合物29(10mg，18.20微摩尔，1当量)、DBU(8mg，52.55微摩尔，7.92μL，2.89当量)和BOP(11mg，24.87微摩尔，1.37当量)的DMF(0.4mL)溶液的混合物在16℃下搅拌0.5小时。加入N-甲基丙烷-1-胺(4mg，54.69微摩尔，5.61μL，3.01当量)的DMF(0.1mL)溶液的混合物，然后在16℃下搅拌1.5小时。反应混合物通过制备型-HPLC(色谱柱：WatersXbridge 150×25mm×5μm；流动相：[水(10mM NH

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：605.5(计算值：604.33)

化合物14：

将中间体化合物7(50mg，86.20微摩尔，1当量)的双(2-甲氧基乙基)胺(84mg，630.69微摩尔，93.13μL，7.32当量)溶液的混合物在微波下于170℃搅拌1小时。反应混合物通过制备型-HPLC(色谱柱：3_Phenomenex Luna C18 75×30mm×3μm；流动相：[水(0.05％HCl)-ACN]；B％：31％-51％，6.5分钟)纯化，得到黄色油状的化合物14(11.6mg，19％产率，95.5％纯度)。

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：677.2(计算值：676.39)

化合物15：

在N

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：733.4(计算值：732.38)

化合物19：

将中间体化合物6(50mg，98.44微摩尔，1当量)和双(2-甲氧基乙基)胺(120mg，900.98微摩尔，133.04μL，9.15当量)的NMP(0.2mL)溶液密封，并在微波中于180℃加热2小时。过滤反应混合物，残余物通过制备型-HPLC(色谱柱：Waters Xbridge 150×25mm×5μm；流动相：[水(10mM NH

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：605.3(计算值：604.31)

化合物27：

将中间体化合物9(100mg，190.82微摩尔，1当量)和2,2’-氮杂二基双(乙烷-1-醇)(181mg，1.72毫摩尔，166.06μL，9.02当量)的NMP(0.5mL)和DIEA(62mg，479.72微摩尔，83.56μL，2.51当量)的溶液密封，并在微波中于180℃加热2小时，于200℃加热2小时。残余物通过制备型-HPLC(色谱柱：Waters Xbridge 150×25mm×5μm；流动相：[水(10mMNH

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：593.2(计算值：592.37)

化合物34：

将中间体化合物9(100mg，190.82微摩尔，1当量)和2-((2-甲氧基乙基)氨基)乙烷-1-醇(90mg，755.27微摩尔，3.96当量)的NMP(0.5mL)和DIEA(62mg，479.72微摩尔，83.56μL，2.51当量)溶液密封，并在微波中于180℃加热2小时，于200℃加热4.5小时。反应混合物用50mL水稀释，用乙酸乙酯(20mL，3次)萃取。合并的有机层用Na

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：607.5(计算值：606.39)

化合物37：

将中间体化合物10(69mg，147.64微摩尔，1当量)和双(2-甲氧基乙基)胺(176mg，1.32毫摩尔，195.12μL，8.95当量)的NMP(1mL)和DIEA(48mg，371.40微摩尔，64.69μL，2.52当量)溶液密封，并在微波中于180℃加热2小时和于200℃加热2小时。反应混合物用50mL水稀释，用乙酸乙酯(20mL，3次)萃取。合并的有机层用Na

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：661.3(计算值：660.27)

化合物38：

将中间体化合物13(100mg，176.97微摩尔，1当量)和2,2’-氮杂二基双(乙烷-1-醇)(73.87mg，702.59微摩尔，67.77升，3.97当量)、DIEA(70.87mg，548.37微摩尔，95.51μL，3.10当量)的NMP(0.5mL)溶液的混合物在微波下于150℃搅拌2小时。混合物通过制备型-HPLC(色谱柱：Phenomenex luna C18 150×25mm×10μm；流动相：[水(0.1％TFA)-ACN]；B％：18％-48％，10分钟)纯化，得到黄色胶状的化合物38(40.4mg，18％产率，94％纯度)。

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：617.4(计算值：616.33)

化合物39：

将中间体化合物15(0.24mg，461.49微摩尔，1当量)、双(2-甲氧基乙基)胺(245mg，1.84毫摩尔，271.62μL，3.99当量)和DIEA(184mg，1.42毫摩尔，247.98μL，3.08当量)的NMP(1mL)溶液的混合物在微波下于180℃搅拌2小时。混合物通过制备型-HPLC(色谱柱：WatersXbridge C18 150×50mm×10μm；流动相：[水(10mM NH

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：617.2(计算值：616.33)。

1

一般工艺I

将中间体化合物16(30mg，95.49微摩尔，1当量)、BOP(1.3当量)和DBU(1.5当量)的DMF(0.4mL)溶液在20℃搅拌1小时，然后加入所需的胺(3.00当量)的DMF(0.1mL)溶液。将反应混合物在20℃下搅拌14小时。用水5mL稀释反应混合物，用乙酸乙酯(2mL，3次)萃取。合并的有机层用Na

根据一般工艺I获得的化合物列于表2中。

表2

/>

/>

/>

/>

一般工艺II

在与胺反应的情况下：

在与乙醇反应的情况下：

将中间体化合物16、BOP(1.3当量)和DBU(3当量)的DMF(0.4mL)溶液在10℃下搅拌30分钟。加入后，在10℃下向混合物中加入表3中所列的胺或醇的DMF(0.1mL)溶液。将所得混合物在10℃下搅拌1.5小时。按照纯化方法A、B或C，残余物通过制备型HPLC纯化，得到如表3所示的所需化合物。

根据一般工艺II获得的化合物列于表3中。

表3

/>

/>

化合物183：

在N

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：743.5(计算值：742.44)。

1

化合物184：

在N

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：743.3(计算值：742.44)

化合物185：

在N

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：729.4(计算值：728.42)。

1

化合物186：

在N

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：729.3(计算值：728.42)

化合物195：

将中间体化合物5(200mg，455.34微摩尔，1当量)和双(2-甲氧基乙基)胺(546mg，4.10毫摩尔，605.32μL，9当量)的NMP(0.5mL)溶液密封，并在微波中于180℃下加热2小时。反应混合物通过在25℃下加入30mL水来猝灭，并用60mL的EtOAc(20mL，3次)萃取。合并的有机层用Na

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：633.3(计算值：633.3)。

化合物197：

将中间体化合物45(50mg，68.6微摩尔，1当量)和NH

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：634.3(计算值：634.4)。

1HNMR：(400MHz，CHLOROFORM-d)δppm6.57-6.56(m，1H)，5.19–5.18(m，1H)，4.68-4.61(m，4H)，3.92(m，2H)，3.77(m，6H)，3.61-3.57(m，10H)，3.40(m，2H)，3.39(s，6H)，3.36(s，9H)，2.62-2.61(m，2H)，2.02(m，4H)，1.68(m，4H)。

化合物201：

将中间体化合物32(75mg，120.82微摩尔，1当量)和氢化钠(15mg，375.04微摩尔，60％纯度，3.10当量)的DMF(0.5mL)溶液在50℃下搅拌30分钟，然后在30℃下加入碘甲烷(52mg，366.36微摩尔，22.81μL，3.03当量)。将反应混合物在30℃下搅拌1.5小时，通过加入20mL饱和NH4Cl水溶液淬灭，并用乙酸乙酯(10mL，2次)萃取。合并的有机层用Na

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：649.4(计算值：649.4)

化合物202：

将中间体化合物46(90mg，148.33微摩尔，1当量)和氢化钠(9mg，225.02微摩尔，60％纯度，1.52当量)的DMF(0.2mL)的溶液在50℃下搅拌30分钟，然后在30℃下加入1-溴-2-甲氧基乙烷(27mg，194.26微摩尔，18.24μL，1.31当量)。将混合物在30℃下搅拌1.5小时，并通过加入水(30mL)淬灭。用柠檬酸将水相酸化至pH＝7，并在16℃下搅拌30分钟，用乙酸乙酯(20mL，3次)萃取。合并的有机层用Na

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：665.6(计算值：665.4)。

1

化合物231：

将中间体化合物38(70mg，100.47微摩尔，1当量)的DMF(2mL)溶液冷却至0℃，加入氢化钠(4.82mg，200.93微摩尔，2当量)，然后将反应物在0℃下搅拌20分钟，然后一次性加入碘甲烷(42.78mg，301.40微摩尔，18.76μL，3当量)，然后将反应物加热至15℃并搅拌2小时。用饱和NH4Cl水溶液(2mL)猝灭反应，用DCM(20mL)稀释并用盐水(20mL，3次)洗涤。将有机层用Na

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：711.3(计算值：711.4)

化合物232：

在20℃下，向N-甲基-1-苯基甲胺(31.41mg，259.20微摩尔)和中间体化合物37(50mg，86.40微摩尔)的DMF(0.5mL)溶液中加入六氟磷酸1H-苯并三唑-1-基氧基三(二甲氨基)

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：682.5(计算值：682.4)。

1

化合物240：

在20℃下，向化合物237(90mg，138.30微摩尔)的异丙醇(1mL)溶液中加入KOH(23.28mg，414.89微摩尔)。将反应混合物在70℃下搅拌2小时。反应混合物用水(10mL)淬灭，用乙酸乙酯(5mL，2次)萃取。合并的有机相用盐水(5mL，2次)洗涤，用Na

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：669.3(计算值：669.4)

化合物249：

在20℃下，向化合物244(90mg，127.87微摩尔)的异丙醇(1mL)溶液中加入KOH(21.52mg，383.61微摩尔)。将反应混合物在80℃下搅拌16小时。反应混合物通过制备型-TLC(二氧化硅，用乙酸乙酯/甲醇＝5/1洗脱，Rf＝0.44)处理和纯化，得到粗产物。粗产物通过制备型-HPLC(方法A)纯化，得到黄色固体的化合物249(7.2mg，产率8％)。

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：722.3(计算值：722.4)。

一般工艺III

将所需的中间体化合物(30mg，95.49微摩尔，1当量)、BOP(1.3当量)和DBU(1.5当量)的DMF(0.4mL)溶液在20℃下搅拌1小时，然后加入所需的胺(3.00当量)的DMF(0.1mL)溶液。将反应混合物在20℃下搅拌14小时。反应混合物用5mL水稀释，用乙酸乙酯(2mL，3次)萃取。合并的有机层用Na

根据一般工艺III获得的化合物列于表4中。

表4

/>

/>

/>

/>

一般工艺IV

将中间体化合物9(100mg，190.82微摩尔，1当量)、DIEA(62mg，479.73微摩尔，83.56μL，2.51当量)和相应的胺(9.00当量)的NMP(1mL)的溶液密封，并在微波中于180℃加热2小时。反应混合物用5mL水稀释，用6mL乙酸乙酯(2mL×3次)萃取。合并的有机层用Na

根据一般工艺IV获得化合物30至32和132至134：

化合物30：所用的胺是1-(甲基磺酰基)哌嗪(9当量，1.717毫摩尔，283mg)。残余物通过制备型-HPLC(色谱柱：3_Phenomenex Luna C18 75×30mm×3μm；流动相：[水(0.05％HCl)-ACN]；B％：29％-49％，6.5分钟)纯化，得到黄色油状的化合物30(48.8mg，38％产率，96.5％纯度)。

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：652.2(计算值：651.35)

化合物31：所用的胺是哌嗪-1-羧酸乙酯(9当量，1.717毫摩尔，272mg)。残余物通过制备型-HPLC纯化(色谱柱：3_Phenomenex Luna C18 75×30mm×3μm；流动相：[水(0.05％HCl)-ACN]；B％：29％-49％，6.5分钟)，得到黄色油状的化合物31(68mg，55％产率，100％纯度)。

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：646.2(计算值：645.40)

化合物32：所用的胺是2-(1H-吡唑-1-基)乙烷-1-胺(9当量，1.717毫摩尔，191mg)。残余物通过制备型-HPLC(色谱柱：3_Phenomenex Luna C18 75×30mm×3μm；流动相：[水(0.05％HCl)-ACN]；B％：28％-48％，6.5分钟)纯化，得到黄色油状的化合物32(16.8mg，14.5％产率，98％纯度)。

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：599.3(计算值：598.37)

化合物132：所用的胺是N-乙基-2-(吡咯烷-1-基)乙烷-1-胺(9当量，1.717毫摩尔，244mg)。残余物通过制备型-HPLC(色谱柱：Phenomenex luna C18 150×25mm×10μm；流动相：[水(0.05％HCl)-ACN]；B％：12％-42％，10分钟)纯化，得到黄色油状的化合物132(90.9mg，76％产率，100％纯度)。

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：630.4(计算值：629.44)

化合物133：所用的胺是N-乙基-2-(哌啶-1-基)乙烷-1-胺(9当量，1.717毫摩尔，269mg)。残余物通过制备型-HPLC(色谱柱：Phenomenex luna C18 150×25mm×10μm；流动相：[水(0.05％HCl)-ACN]；B％：17％-47％，10分钟)纯化，得到黄色油状的化合物133(58.2mg，48％产率，100％纯度)。

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：644.5(计算值：643.45)

化合物134：所用的胺是3-(1H-咪唑-1-基)丙烷-1-胺(9当量，1.717毫摩尔，215mg)。残余物通过制备型-HPLC(色谱柱：3_Phenomenex Luna C18 75×30mm×3μm；流动相：[水(0.05％HCl)-ACN]；B％：17％-37％，7分钟)纯化，得到黄色油状的化合物134(45.4mg，39％产率，98％纯度)。

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：613.2(612.39)

一般工艺V

向中间体化合物52或中间体化合物53(50mg，1当量)的NMP(1.5mL)溶液中加入胺(8当量)和DIEA(5当量)。将该混合物在230℃下搅拌2小时。LCMS显示起始材料被完全消耗，并检测到期望的质量。过滤反应混合物。蒸发滤液。

根据一般工艺V获得化合物267至272和275、276、278、279、281至284、287、288、292至298、302、303、327、333：

化合物267：

使用中间体化合物52和N-乙基-2-(吡咯烷-1-基)乙烷-1-胺(9当量，1.717毫摩尔，283mg)。残余物通过制备型-HPLC(色谱柱：Phenomenex luna C18 150×25mm×10μm；流动相：[水(0.225％FA)-ACN]；B％：13％-43％，10分钟)纯化，得到黄色油状的化合物267(48.8mg，38％产率)。

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：629.3(计算值：628.42)

化合物268：

使用中间体化合物52和2-甲氧基-N-(3,4,5-三甲氧基苄基)乙烷-1-胺(9当量，1.717毫摩尔，283mg)。残余物通过制备型-HPLC(色谱柱：Phenomenex Gemini-NX C18 75×30mm×3μm；流动相：[水(10mM NH

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：742.4(计算值：741.41)

化合物269：

使用中间体化合物53和2-甲氧基-N-(3,4,5-三甲氧基苄基)乙烷-1-胺(9当量，1.717毫摩尔，283mg)。残余物通过制备型-HPLC(色谱柱：Phenomenex Gemini-NX C18 75×30mm×3μm；流动相：[水(10mM NH

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：742.4(计算值：741.41)

化合物270：

使用中间体化合物52和2,2’-氮杂二烷基双(乙烷-1-醇)(9当量，1.717毫摩尔，283mg)。残余物通过制备型-HPLC(色谱柱：Phenomenex luna C18 150×25mm×10μm；流动相：[水(0.225％FA)-ACN]；B％：12％-42％，10分钟)纯化。

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：592.2(计算值：591.35)

化合物271：

使用中间体化合物53和2,2’-氮杂二烷基双(乙烷-1-醇)(9当量，1.717毫摩尔，283mg)。残余物通过制备型-HPLC(色谱柱：Phenomenex luna C18 150×25mm×10μm；流动相：[水(0.225％FA)-ACN]；B％：12％-42％，10分钟)纯化。

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：592.3(计算值：591.35)

化合物272：

使用中间体化合物52和N-乙基-2-(哌啶-1-基)乙烷-1-胺(9当量，1.717毫摩尔，283mg)。残余物通过制备型-HPLC(色谱柱：Phenomenex luna C18 150×25mm×10μm；流动相：[水(0.225％FA)-ACN]；B％：12％-42％，10分钟)纯化。

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：643.3(计算值：642.43)

化合物275：

使用中间体化合物52和2-((2-甲氧乙基)氨基)乙烷-1-醇(9当量，1.717毫摩尔，283mg)。残余物通过制备型-HPLC(色谱柱：Waters Xbridge 150×25mm×5μm；流动相：[水(10m M NH

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：606.2(计算值：605.36)

化合物276：

使用中间体化合物53和2-((2-甲氧乙基)氨基)乙烷-1-醇(9当量，1.717毫摩尔，283mg)。残余物通过制备型-HPLC(色谱柱：Phenomenex Gemini-NX C18 75×30mm×3μm；流动相：[水(0.225％FA)-ACN]；B％：15％-45％，7分钟)纯化。

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：606.4(计算值：605.36)

化合物278：

使用中间体化合物53和哌嗪-2-酮(9当量，1.717毫摩尔，283mg)。残余物通过制备型-HPLC(色谱柱：Phenomenex Gemini-NX C18 75×30mm×3μm；流动相：[水(0.225％FA)-ACN]；B％：15％-45％，7分钟)纯化。

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：587.3(计算值：586.33)

化合物279：

使用中间体化合物53和1-(甲基磺酰基)哌嗪(9当量，1.717毫摩尔，283mg)。残余物通过制备型-HPLC(色谱柱：Phenomenex luna C18 150×25mm×10μm；流动相：[水(0.225％FA)-ACN]；B％：26％-57％，10分钟)纯化。

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：651.3(计算值：650.33)

化合物281：

使用中间体化合物53和1-(哌嗪-1-基)乙烷-1-酮(9当量，1.717毫摩尔，283mg)。残余物通过制备型-HPLC(色谱柱：Phenomenex luna C18 150×25mm×10μm；流动相：[水(0.225％FA)-ACN]；B％：21％-51％，10分钟)纯化。

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：615.3(计算值：614.36)

化合物282：

使用中间体化合物52和5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪(9当量，1.717毫摩尔，283mg)。残余物通过制备型-HPLC(色谱柱：Phenomenex Gemini-NX C18 75×30mm×3μm；流动相：[水(0.225％FA)-ACN]；B％：22％-52％，7分钟)纯化。

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：611.2(计算值：610.34)

化合物283：

使用中间体化合物53和5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪(9当量，1.717毫摩尔，283mg)。残余物通过制备型-HPLC(色谱柱：Phenomenex Gemini-NX C18 75×30mm×3μm；流动相：[水(0.225％FA)-ACN]；B％：25％-55％，7分钟)纯化。

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：611.3(计算值：610.34)

化合物284：

使用中间体化合物53和哌嗪-1-羧酸甲酯(9当量，1.717毫摩尔，283mg)。残余物通过制备型-HPLC(色谱柱：Phenomenex Gemini-NX C18 75×30mm×3μm；流动相：[水(0.225％FA)-ACN]；B％：20％-50％，7分钟)纯化。

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：631.3(计算值：630.36)

化合物287：

使用中间体化合物52和4,5,6,7-四氢-[1,2,3]三唑并[1,5-a]吡嗪(9当量，1.717毫摩尔，283mg)。残余物通过制备型-HPLC(色谱柱：Waters Xbridge 150×25mm×5μm；流动相：[水(10mM NH

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：611.2(计算值：610.34)

化合物288：

使用中间体化合物53和4,5,6,7-四氢-[1,2,3]三唑并[1,5-a]吡嗪(9当量，1.717毫摩尔，283mg)。残余物通过制备型-HPLC(色谱柱：Phenomenex luna C18 150×25mm×10μm；流动相：[水(0.225％FA)-ACN]；B％：22％-52％，10分钟)纯化。

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：611.3(计算值：610.34)

化合物292：

使用中间体化合物53和4-(甲基磺酰基)哌啶(9当量，1.717毫摩尔，283mg)。残余物通过制备型-HPLC(色谱柱：Phenomenex luna C18 150×25mm×10μm；流动相：[水(0.225％FA)-ACN]；B％：21％-51％，10分钟)纯化。

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：650.3(计算值：649.33)

化合物293：

使用中间体化合物52(50mg，95.60微摩尔，1当量)和中间体化合物75(160.79mg，717.00微摩尔，50.90μL，7.5当量)。残余物先后通过制备型-HPLC(色谱柱：PhenomenexGemini-NX C18 75×30mm×3μm；流动相：[水(0.225％FA)-ACN]；B％：25％-45％，7分钟)和制备型-HPLC(色谱柱：Waters Xbridge 150×25mm×5μm；流动相：[水(0.225％FA)-ACN]；B％：13％-43％，10分钟)纯化，得到黄色胶状的化合物293(18.3mg，28％产率)。

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：665.3(计算值：664.39)

化合物294：

使用中间体化合物53(50mg，95.60微摩尔，1当量)和中间体化合物75(160.79mg，717.00微摩尔，50.90μL，7.5当量)。残余物先后通过制备型-HPLC(色谱柱：PhenomenexGemini-NX C18 75×30mm×3μm；流动相：[水(0.225％FA)-ACN]；B％：25％-45％，7分钟)和制备型-HPLC(色谱柱：Waters Xbridge 150×25mm×5μm；流动相：[水(10mM NH

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：665.4(计算值：664.39)

化合物295：

使用中间体化合物52和5,6,7,8-四氢咪唑并[1,2-a]吡嗪(9当量，1.717毫摩尔，283mg)。残余物通过制备型-HPLC(色谱柱：Waters Xbridge 150×25mm×5μm；流动相：[水(10mM NH

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：610.2(计算值：609.35)

化合物296：

使用中间体化合物53和5,6,7,8-四氢咪唑[1,2-a]吡嗪(9当量，1.717毫摩尔，283mg)。残余物通过制备型-HPLC(色谱柱：Waters Xbridge 150×25mm×5μm；流动相：[水(10mM NH

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：610.3(计算值：609.35)

化合物297：

使用中间体化合物52和5,6,7,8-四氢咪唑并[1,5-a]吡嗪(9当量，1.717毫摩尔，283mg)。残余物通过制备型-HPLC(色谱柱：Waters Xbridge 150×25mm×5μm；流动相：[水(10mM NH

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：610.2(计算值：609.35)

化合物298：

使用中间体化合物53和5,6,7,8-四氢咪唑并[1,5-a]吡嗪(9当量，1.717毫摩尔，283mg)。残余物通过制备型-HPLC(色谱柱：Phenomenex Gemini-NX C18 75×30mm×3μm；流动相：[水(0.225％FA)-ACN]；B％：12％-42％，7分钟)纯化。

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：610.3(计算值：609.35)

化合物299：

使用中间体化合物53(50mg，95.60微摩尔，1当量)和中间体化合物76(94.94mg，764.80微摩尔，50.90μL，8当量)。残余物先后通过制备型-HPLC(色谱柱：Phenomenex lunaC18 150×25mm×10μm；流动相：[水(0.225％FA)-ACN]；B％：16％-46％，10分钟)和制备型-HPLC(色谱柱：Waters Xbridge 150×25mm×5μm；流动相：[水(10mM NH

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：611.4(计算值：610.34)

化合物302：

使用中间体化合物52(50mg，95.60微摩尔，1当量)和中间体化合物17(244.07mg，955.97微摩尔，10当量)。残余物通过制备型-HPLC(色谱柱：Phenomenex Gemini-NX C1875×30mm×3μm；流动相：[水(0.225％FA)-ACN]；B％：30％-60％，7分钟)，得到黄色胶状的化合物302(33.9mg，46％产率)纯化。

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：742.5(计算值：741.42)

化合物303：

使用中间体化合物53(50mg，95.60微摩尔，1当量)和中间体化合物18(244.07mg，955.97微摩尔，10当量)。残余物通过制备型-HPLC(色谱柱：Phenomenex Gemini-NX C18 75×30mm×3μm；流动相：[水(0.225％FA)-ACN]；B％：30％-60％，7分钟)纯化，得到黄色胶状的化合物303(32.4mg，44％产率)。

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：742.4(计算值：741.42)

化合物327：

使用中间体化合物52(80mg，152.96微摩尔，1当量)和1,1’-氮杂二烷基双(丙烷-2-醇)(162.98mg，1.22毫摩尔，162.98μL，8当量)。残余物通过制备型-HPLC纯化两次(色谱柱：Phenomenex Gemini-NX C18 75×30mm×3μm；流动相：[水(0.225％FA)-ACN]；B％：15％-45％，7分钟)，随后再通过制备型-HPLC(色谱柱：Waters Xbridge 150×25mm×5μm；流动相：[水(10mM NH

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：620.5(计算值：619.38)

一般工艺VI

在0℃下，向中间体化合物87或88(1当量)的DMF(1mL)溶液中加入DIPEA(1.5当量)和BOP(1.3当量)，将混合物搅拌0.5小时。然后向混合物中加入胺。将混合物在20℃下搅拌2小时。过滤并真空浓缩反应混合物。

化合物307：

使用中间体化合物88(80mg，161.43微摩尔，1当量)和1-甲基哌嗪-2,6-二酮(62.05mg，484.29微摩尔，3当量)。残余物先后通过制备型-HPLC(色谱柱：PhenomenexGemini-NX C18 75×30mm×3μm；流动相：[水(0.225％FA)-ACN]；B％：15％-45％，7分钟)和制备型-HPLC(色谱柱：Phenomenex luna C18 150×25mm×10μm；流动相：[水(0.225％FA)-ACN]；B％：14％-44％，10分钟)纯化，得到黄色胶状的化合物307(33mg，33％产率)。

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：606.4(计算值：605.33)

化合物308：

使用中间体化合物87(50mg，100.89微摩尔，1当量)和1-甲基哌嗪-2,6-二酮(38.78mg，302.68微摩尔，3当量)。残余物通过制备型-HPLC(色谱柱：Phenomenex luna C18150×25mm×10μm；流动相：[水(0.225％FA)-ACN]；B％：15％-45％，10分钟)纯化，得到黄色胶状的化合物308(15mg，24％产率)。

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：606.4(计算值：605.33)

化合物309：

使用中间体化合物88(60mg，121.07微摩尔，1当量)和中间体化合物89(48.89mg，205.82微摩尔，1.70当量)。残余物通过制备型-HPLC(色谱柱：Phenomenex Gemini-NX C1875×30mm×3μm；

流动相：[水(10mM NH

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：606.5(计算值：605.36)

化合物310：

使用中间体化合物87(60mg，121.07微摩尔，1当量)和中间体化合物89(48.89mg，205.82微摩尔，1.70当量)。残余物通过制备型-HPLC(色谱柱：Waters Xbridge 150×25mm×5μm；流动相：[水(10mM NH

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：606.5(计算值：605.36)

化合物311：

使用中间体化合物88(60mg，121.07微摩尔，1当量)和中间体化合物90(51.65mg，205.30微摩尔，1.70当量)。残余物通过制备型-HPLC(色谱柱：Shim-pack C18 150×25×10μm；流动相：[水(0.225％FA)-ACN]；B％：15％-48％，11分钟)纯化，得到为黄色胶状的化合物311(45mg，57％产率)。

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：620.6(计算值：619.38)

化合物312：

使用中间体化合物87(60mg，121.07微摩尔，1当量)和中间体化合物90(51.78mg，205.82微摩尔，1.70当量)。残余物通过制备型-HPLC(色谱柱：Phenomenex Synergi C18150×25mm×10μm；流动相：[水(0.225％FA)-ACN]；B％：13％-46％，11分钟)纯化，得到黄色胶状的化合物312(43.8mg，58％产率)。

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：620.4(计算值：619.38)

化合物313：

使用中间体化合物88(60mg，121.07微摩尔，1当量)和六氢吡咯[1,2-a]吡嗪-4(1H)-酮(53.46mg，302.67微摩尔，3当量)。残余物通过制备型-HPLC(色谱柱：Shim-packC18 150×25×10μm；流动相：[水(0.225％FA)-ACN]；B％：12％-45％，11分钟)纯化，得到黄色胶状的化合物313(31mg，48％产率)。

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：618.4(计算值：617.36)

化合物314：

使用中间体化合物87(50mg，100.89微摩尔，1当量)和六氢吡咯[1,2-a]吡嗪-4(1H)-酮(42.43mg，240.20微摩尔，2.38当量)。残余物通过制备型-HPLC(色谱柱：Phenomenex Gemini-NX C18 75×30mm×3μm；流动相：[水(0.225％FA)-ACN]；B％：15％-45％，7分钟)纯化，得到黄色胶状的化合物314(29.7mg，48％产率)。

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：618.6(计算值：617.36)

化合物315：

使用中间体化合物88(40mg，80.71微摩尔，1当量)和中间体化合物77(60.00mg，428.01微摩尔，5.30当量)。残余物通过制备型-HPLC(色谱柱：Phenomenex Gemini-NX C1875×30mm×3μm；流动相：[水(10mM NH

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：618.3(计算值：617.36)

化合物316：

使用中间体化合物87(40mg，80.71微摩尔，1当量)和中间体化合物77(60mg，428.01微摩尔，5.30当量)。残余物通过制备型-HPLC(色谱柱：Waters Xbridge 150×25mm×5μm；流动相：[水(10mM NH

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：618.3(计算值：617.36)

化合物321：

使用中间体化合物91(50mg，213.90微摩尔，1当量)和1-甲基哌嗪-2-酮(60mg，428.01微摩尔，5.30当量)。残余物通过制备型-HPLC(色谱柱：Shim-pack C18 150×25×10μm；流动相：[水(0.225％FA)-ACN]；B％：9％-31％，11分钟)纯化，得到黄色固体的化合物321(37.0mg，31％产率)。

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：564.4(计算值：563.32)

化合物322：

使用中间体化合物88(50mg，100.89微摩尔，1当量)和2-甲基-4,5,6,7-四氢

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：616.4(计算值：615.35)

化合物323：

使用中间体化合物87(50mg，100.89微摩尔，1当量)和2-甲基-5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪(41.82mg，302.68微摩尔，3当量)。残余物通过制备型-HPLC(色谱柱：Phenomenex Gemini-NX C18 75×30mm×3μm；流动相：[水(0.225％FA)-ACN]；B％：15％-45％，7分钟)纯化，得到黄色胶状的化合物323(27.5mg，44％产率)。

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：616.4(计算值：615.36)

化合物324：

使用中间体化合物87(50mg，100.89微摩尔，1当量)和(3-氟苯基)甲胺(37.88mg，302.68微摩尔，3当量)。残余物通过制备型-HPLC(色谱柱：Phenomenex Gemini-NX C18 75×30mm×3μm；流动相：[水(0.225％FA)-ACN]；B％：22％-52％，7分钟)纯化，得到黄色固体的化合物324(26.6mg，43％产率)。

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：603.5(计算值：602.33)

化合物325：

使用中间体化合物87(50mg，100.89微摩尔，1当量)和3-(氨甲基)苯甲腈(40.00mg，302.68微摩尔，3当量)。残余物通过制备型-HPLC(色谱柱：Phenomenex Gemini-NX C18 75×30mm×3μm；流动相：[水(0.225％FA)-ACN]；B％：20％-50％，7分钟)纯化，得到黄色固体的化合物325(27.4mg，43％产率)。

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：610.6(计算值：609.34)

化合物326：

使用中间体化合物87(50mg，100.89微摩尔，1当量)和3-(三氟甲基)氮杂环丁烷-3-醇(53.74mg，302.68微摩尔，3当量)。残余物通过制备型-HPLC(色谱柱：PhenomenexGemini-NX C18 75×30mm×3μm；流动相：[水(0.225％FA)-ACN]；B％：18％-48％，2分钟)纯化，得到黄色胶状的化合物326(27.7mg，44％产率)。

LCMS(ESI离子峰位置)m/z：(M+H)+：619.4(计算值：618.31)

其他分析数据：

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

II.生物学实施例

实施例II.1.ENT1活性的实验

实施例II.1.a结合实验

目的。本实验旨在表明本发明的化合物能与人ENT1结合。该实验的原理是本发明的化合物和Sahenta-DY647之间的竞争，Sahenta-DY647是一种发射荧光(Ex＝630nm，Em＝670nm)的ENT1抑制剂。通过在实验结束时测量荧光，我们可以评估本发明化合物的结合能力。

方法。表达ENT1的JAR细胞购自

该实验在以下缓冲液中进行：在实验当天补充有10mM Hepes(

将JAR细胞重悬于所述缓冲液中。将本发明的化合物和Sahenta-DY647在所述缓冲液中稀释200倍。

在加入Sahenta-DY647(100nM)的相应IC90之前，将总共50000个细胞与本发明的化合物在4℃预孵育30分钟，并在4℃再孵育30分钟。在U形底的96孔板(

结果。从该方案获得的结果总结在表5中。

实施例II.1.b功能实验：尿苷转运抑制实验

目的。本研究的目的是通过测量细胞摄取实验中ENT1介导的转运来确定平衡核苷转运蛋白1(ENT1)抑制剂的效力。通过转导，人ENT1转运蛋白可以通过转导在马达犬肾II(MDCKII)细胞中稳定表达。尿苷被ENT1有效转运，并作为3H-尿苷在实验中用作探针。这种相互作用被检测为人ENT1对向稳定表达ENT1摄取转运蛋白的MDCKII-ENT1-LV细胞转运的3H-尿苷的初始速率的调节。

结果。从该方案获得的结果总结在表6中。

实验参数

实施例II.1.c功能实验：T细胞增殖实验

目的。本研究的目的是确定平衡核苷转运蛋白1(ENT1)抑制剂在以下条件下挽救经刺激的在100μm三磷酸腺苷(ATP)存在下孵育的原代人T细胞的增殖的效力：

条件A：X-VIVO15

条件B：X-VIVO15，2％人血清白蛋白(HSA)和0.1％的α-1-酸性糖蛋白(AAG)

材料

方法。将冷冻保存的经纯化的人CD3+ T细胞解冻，用含10％hiFBS的超级谷氨酰胺的RPMI1640培养基洗涤两次。

细胞悬浮在含有10％hiFBS的PBS中。通过在PBS中加入2μm溶液，用CFSE对细胞进行染色，得到最终的1μM CFSE溶液。细胞在旋转的同时孵育5分钟。通过加入含10％FBS的PBS终止反应，并以1500rpm离心细胞5分钟。

将细胞以1.6×10

在X-VIVO15中由DMSO中的10mM储备溶液制备ENT1抑制剂的系列稀释液，并向孔中加入50μL。

将ATP粉末稀释在X-VIVO15中，并将50μL该化合物加入孔中，以达到100μm的最终实验浓度。最终体积为200μL。

实验也在384孔板中进行-所有体积减少4倍(12.5μL)，最终体积为50μL。

实验重复两次进行。对于96孔板，将细胞置于含5％CO

结果。结果详见下表6。本发明的化合物具有良好的ENT1抑制特性。

实施例II.2.AAG结合实验–HPLC实验

目的。本实验旨在表明本发明的化合物并不积极地与人α1-酸性糖蛋白(AAG)结合，这与以前观察到的潘生丁相反。该实验的原理是在固定在根据化合物与AAG蛋白的亲和力分离化合物的硅胶载体上的人AAG蛋白上进行液相色谱。通过测量保留时间，可以相对于参比确定与AAG的结合。

方法。用于HPLC的仪器是SHIMADZU Nexera X2(LC-30AD)，配备有

样品顺序：潘生丁，普萘洛尔(Propranolol)，化合物2然后是15个测试样品然后又是参比。

参比：潘生丁(rt＝8.64分钟)，普萘洛尔(rt＝14.05分钟)，化合物2(rt＝5.2分钟)。

结果。结果详见下表5。与潘生丁相比，本发明的化合物与AAG的结合较低。

实施例II.3.ENT1抑制实验和AAG结合实验的结果

结果：测试化合物的未结合部分通过色谱方法进行估计，并且如表5中报告的那样测定了效力。与潘生丁相比，本发明的化合物提供了组合的改进部分(未结合部分)，同时保持或提高了对ENT1的效力。

IC

HPLC中的AAG结合已经按照以下范围分类：rt低于6分钟：--，rt为6分钟至8分钟：-，NA：无。

表5

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

/>

对表6中结果的讨论：表6中报告了两种功能性试验的效力，以及在TME(肿瘤微环境)中使用代表性浓度的AAG的挑战性条件下的效力。在所有功能实验中，与潘生丁相比，本发明的化合物表现出相同或提高的效力。具体而言，与潘生丁相比，本发明的化合物在AAG蛋白存在下(条件B)的T细胞增殖实验中表现出显著提高的效力，这意味着这些化合物在TME条件下表现出比潘生丁显著更高的效力。

表6

实施例II.4.AAG结合实验–透析实验

目的。该实验的目的是使用稳健的透析方法来测定感兴趣的化合物与人AAG蛋白的结合。

材料。HT-透析板(型号HTD 96b，货号1006)和透析膜(分子量截止值12kDa至14kDa，货号1101)购自HT Dialysis LLC(Gales Ferry，CT)。通过将28.56g Na

方法。将透析膜浸泡在4℃的透析缓冲液中过夜。第二天，将膜分成两条，然后浸泡在体积比为20∶80的乙醇/水混合溶剂中20分钟。然后用超纯水冲洗膜3次至4次。通过用适当体积的DMSO稀释储备溶液(10mM)制备400μM工作溶液。将每种工作溶液的5μL等分样品加入1000μL空白蛋白(基质)中，以达到作为上样液的2μM最终浓度。充分混合上样液的板。将150μL上样液的等分样品分成三份装载到每个透析孔的供体侧，并使用等体积的透析缓冲液进行透析。然后将板密封，并在37℃、含5％CO

使用分析物和内标物的峰面积比计算浓度。

结果：测定测试化合物的未结合部分，如表7所示。与潘生丁相比，本发明的化合物提供了更重要的游离分数(未结合分数)，因此生物利用度更高。

表7

实施例II.5.PDE实验

目的。评估化合物对下列磷酸二酯酶(PDE)活性的影响，已知这些酶是潘生丁的重要非靶标。

方法。

·通过使用在Sf9细胞中表达的人重组酶测量cGMP的5’GMP形成来量化人磷酸二酯酶-1B。

将测试化合物(化合物72)、参比物或水(对照)加入到含有40mM Tris/HCl(pH7.4)、8mM MgCl

·通过在Eurofins-Cerep使用从人血小板中分离的酶测量cGMP的5’GMP形成来量化人磷酸二酯酶-5。

将测试化合物(化合物72)、参比物或水(对照)加入到含有40mM Tris/HCl(pH7.8)、3mM MgCl

·通过使用在Sf9细胞中表达的人重组酶测量cAMP的5’AMP形成来量化人磷酸二酯酶-2A1。

将测试化合物(化合物72)、参比物或水(对照)加入到含有40mM Tris/HCl(pH7.4)、8mM MgCl

·通过使用在Sf9细胞中表达的人重组酶测量cAMP的5’AMP形成来量化人磷酸二酯酶-7A1。

将测试化合物(化合物72)、参比物或水(对照)加入到含有40mM Tris/HCl(pH7.4)和8mM MgCl

·通过使用在Sf9细胞中表达的人重组酶测量cAMP的5’AMP形成来量化人磷酸二酯酶-8A1。

将测试化合物(化合物72)、参比物或水(对照)加入到含有40mM Tris/HCl(pH7.4)和8mM MgCl

·通过使用在Sf9细胞中表达的人重组酶测量cAMP的5’AMP形成来量化人磷酸二酯酶-10A2。

将测试化合物(化合物72)、参比物或水(对照)加入到含有40mM Tris/HCl(pH7.4)和8mM MgCl

·通过使用在Sf9细胞中表达的人重组酶测量cAMP的5’AMP形成来量化人磷酸二酯酶-3A。

将测试化合物(化合物72)、参比物或水(对照)加入到含有40mM Tris/HCl(pH7.4)和8mM MgCl

·通过使用在Sf9细胞中表达的人重组酶测量cAMP的5’AMP形成来量化人磷酸二酯酶-11A。

将测试化合物(化合物72)、参比物或水(对照)加入到含有40mM Tris/HCl(pH7.4)和8mM MgCl

·通过使用在Sf9细胞中表达的人重组酶测量cAMP的5’AMP形成来量化人磷酸二酯酶-4A1A。

将测试化合物(化合物72)、参比物或水(对照)加入到含有40mM Tris/HCl(pH7.4)和8mM MgCl

·通过使用在Sf9细胞中表达的人重组酶测量cAMP的5’AMP形成来量化人磷酸二酯酶-4B1。

将测试化合物(化合物72)、参比物或水(对照)加入到含有40mM Tris/HCl(pH7.4)、8mM MgCl

·通过使用在Sf9细胞中表达的人重组酶测量cAMP的5’AMP形成来量化人磷酸二酯酶-4D2。

将测试化合物(化合物72)、参比物或水(对照)加入到含有40mM Tris/HCl(pH7.4)和8mM MgCl

·通过在Eurofins-Cerep使用从牛视网膜中分离的酶测量cGMP的5’GMP形成来量化磷酸二酯酶-6。

将测试化合物(化合物72)、参比物或水(对照)加入到含有40mM Tris/HCl(pH7.8)、3mM MgCl

·通过使用在Sf9细胞中表达的人重组酶测量cAMP的5’AMP形成来量化人磷酸二酯酶-3B。

将测试化合物(化合物72)、参比物或水(对照)加入到含有40mM Tris/HCl(pH7.4)和8mM MgCl

结果。由于A2A受体拮抗剂可能与ENT1抑制剂组合使用，因此重要的是不要干扰A2A受体信号传导(即抑制cAMP PDE，这可能导致A2A受体信号传导的延长)。在化合物72的临床相关剂量下，可能轻微触及的两种磷酸二酯酶(PDE)是PDE5(IC50 1.08E-06M)和PDE6(IC50 3.23E-06M)。这些是cGMP PDE，因此用化合物72处理不会干扰A2A受体信号通路。

此外，临床相关浓度的潘生丁与PDE11A接触，PDE11A是一种cAMP/cGMP双重PDE，与A2A受体抑制剂组合可能会产生问题。与潘生丁相比，化合物72对PDE11A的效力降低。

IC

表8

/>