脱氨酶介导的DNA中N4-甲基胞嘧啶的单碱基分辨率定位分析方法

摘要

本发明公开了一种脱氨酶介导的DNA中N4‑甲基胞嘧啶的单碱基分辨率定位分析方法，属于生物技术领域。本发明方法利用胞嘧啶脱氨酶A3A蛋白对DNA中正常的胞嘧啶和5‑甲基胞嘧啶进行脱氨基，随后在后续聚合酶链式反应扩增形成胸腺嘧啶，而目标分析物N4‑甲基胞嘧啶能够抵抗胞嘧啶脱氨酶A3A的脱氨作用，因此在随后的聚合酶链式反应中扩增为胞嘧啶。这样，只有N4‑甲基胞嘧啶修饰才能在最终的测序中被读为胞嘧啶。本发明方法选择性高，准确性好，无需对DNA样品进行亚硫酸氢盐的处理，可直接获得DNA中N4‑甲基胞嘧啶的单碱基分辨率图谱。