组蛋白乙酰化修饰酶的HAT和/或HCT活性的检测方法和抑制剂筛选方法

摘要

本发明公开了组蛋白乙酰化修饰酶的HAT和/或HCT活性的检测方法和抑制剂筛选方法，包括如下步骤：将组蛋白乙酰化修饰酶、AcCoA或/和CrCoA、缓冲液以及肽底物的混合物在设定温度下反应，得反应产物溶液；将反应产物溶液、磁珠溶液和PBS溶液在混匀仪中孵育设定时间后，向其中加入牛血清白蛋白溶液孵育设定时间，然后采用PBS洗涤后重悬，得反应混合液；在反应混合液中加入DyLight 488标记的抗组蛋白H3抗体和/或DyLight 650标记的抗组蛋白H3抗体，孵育；磁分离后，将得到的固体混合物采用SDS溶液重悬，将重悬混合物反应后，固液分离，上清液通过单分子检测，得到HAT和/或HCT活性。