一种通过5’端丙烯酰胺化的PCR产物在固相介质中制备单链DNA的方法

摘要

本发明一种通过5’端丙烯酰胺化的PCR产物在固相介质中制备单链DNA的方法，属于分子生物学领域。制备过程：（1）通过PCR反应扩增出大量5’端丙烯酰胺化的目的片段；（2）制备聚丙烯酰胺凝胶固相分离介质；（3）高剪切乳化分散机高速匀质将固相介质分散成细小颗粒；（4）DNA双链高温解螺旋，分离固/液相获得DNA单链，即得产物。该方法将5’丙烯酰胺化的PCR产物与聚丙烯酰胺凝胶聚合，将此DNA双链束缚在固相凝胶介质中，通过高温DNA双链解螺旋，5’‑丙烯酰胺化的DNA链被束缚在聚丙烯酰胺凝胶中，另一条单链扩散在上清中。运用本发明制备的单链DNA可用于探针制备和标记、固相DNA测序、肿瘤微环境等领域。