细胞色素P450酶人源化大鼠模型及其构建方法和应用

摘要

本发明属于生物医药技术领域，公开了一种用于药物代谢研究的CYP酶人源化大鼠动物模型的构建方法及其应用。所述构建方法包括基因型鉴定，人源基因表达鉴定，人源基因功能验证。本发明首先利用CRISPR系统进行CYP酶人源化大鼠的构建，包括基因编辑靶点的选择、sgRNA与Cas9 mRNA的体外合成与转录、同源重组模板构建、假孕母鼠的制备、单细胞胚胎的体外显微注射与移植、大鼠的繁殖，最后得到纯合子CYP基因人源化大鼠。然后对纯合子人源化大鼠从蛋白水平进行CYP酶表达检测，以及进行其代谢功能验证，以证明该CYP人源化大鼠构建成功。本发明构建的CYP1A2人源化大鼠具有和人更相似的代谢特征，消除了大鼠与人之间CYP1A2介导药物代谢的种属差异，为CYP介导的药物代谢研究提供了新的大鼠动物模型。