一种获得人类基底板Floor Plate细胞的方法及其应用

摘要

本发明提供了一种体外获得人类基底板Floor Plate(FP)细胞的方法，是通过基因修饰人胚胎干细胞系H9，在人19号染色体插入NKX2.2‑CDS区域和可诱导Tet‑on表达系统，得到NKX2.2表达水平精确依赖于外源性DOX剂量的人胚胎干细胞系H9‑iOE‑NKX2.2；在H9‑iOE‑NKX2.2基础上，使用特定神经诱导培养基培养12天，同时在前6天低水平诱导NKX2.2表达。本发明能够快速得到分泌SHH的功能性人Floor Plate细胞，分化得到的人类基底板细胞在体外研究人神经环路构成、FP细胞异常导致的多种脑发育异常疾病的治疗以及体外分化脑区细胞方法的拓展都有应用。