可视化CRISPR/Cas9基因编辑系统及使用方法

摘要

本发明公开了一种可视化CRISPR/Cas9基因编辑系统，包括基因编辑元件、外源T‑DNA可视化追踪元件和转基因花粉失活元件，转基因花粉失活元件为玉米α‑淀粉酶基因ZMAA1的表达框；基因编辑元件为CRISPR/Cas9表达结构，CRISPR/Cas9表达结构包括Cas9基因表达框和gRNA表达框；外源T‑DNA可视化追踪元件为红色荧光蛋白基因DsRed的表达框。本发明利用胚乳荧光蛋白标记携带外源Cas9基因T‑DNA区的转基因种子，以筛选不含转基因的突变体种子。同时，利用花粉失活技术使携带Cas9基因的花粉失活，增加无转基因成分种子的比例，且避免因转基因花粉漂移带来的生物安全隐患。