一种基于纳米孔测序仪的23种呼吸道RNA病毒快速鉴定方法

摘要

本发明公开了一种基于纳米孔测序仪的23种呼吸道RNA病毒快速鉴定方法，包括如下步骤：步骤一，对23种RNA病毒进行全基因组核酸提取，提取所需的RNA浓度不低于2ng/ul且纯度合格，进行RNA逆转录；步骤二，对目的片段进行第一轮PCR扩增富集、第一轮纯化；步骤三，使用二次扩增Index引物，稀释至10uM，对纯化产物进行第二轮PCR扩增，第二轮纯化、质控；步骤四，构建测序文库；步骤五，文库质控合格后，进行纳米孔测序；本发明通过设计能够与该23种呼吸道病毒种类的遗传物质特异性结合的引物组合，再通过多重PCR与纳米孔测序技术相结合的方法实现对人呼吸道RNA病毒的高精度、高敏感性、高通量检测。