一种消化道肿瘤PDX模型及标准化模型库的构建方法

摘要

本发明提供了一种消化道肿瘤PDX模型及标准化模型库的构建方法，消化道肿瘤PDX模型取样，采集的消化道肿瘤外周血样本处理，取得肿瘤细胞，处理，培养，将肿瘤细胞稳定传代至n代，构建消化道肿瘤的PDX模型，模型评价，消化道肿瘤PDX标准化模型库建立中国人群人源消化道肿瘤移植动物模型和对应的原代肿瘤细胞系，为肿瘤的生物学研究、诊断标志物的寻找和药物筛选提供了一个重要的体内模型，避免用药随意性和盲目性，避免受到原组织样本等因素的扰动，消化道肿瘤PDX模型可稳定传代至三代以上，构建消化道肿瘤PDX模型标准样本库为探索新靶标和寻找分析消化道肿瘤临床特征提供生物信息学，辅助消化道肿瘤致命机制研究并辅助患者肿瘤治疗。

说明书

技术领域

本发明涉及生物与医学模型和模型库构建技术领域，尤其涉及到一种消化道肿瘤PDX模型及标准化模型库的构建方法。

背景技术

据统计，我国消化道肿瘤占全部癌症发病率的43.3％，几乎占据了半壁江山，是肿瘤界里数一数二的杀手锏。人源性组织异种移植模型，也称为PDX模型，是一种将肿瘤患者的肿瘤组织移植至重症免疫缺陷型小鼠(NSG)体内，并使肿瘤组织在小鼠体内生长而构建成的一种肿瘤模型，辅助进行肿瘤治疗。PDX模型保留了原代肿瘤的微环境和细胞的基本特性，形成第一代移植瘤，待其生长到一定大小时取该移植瘤组织无菌操作再移植到新一批鼠体内，形成第二代移植瘤，如此重复操作形成移植瘤第三代、第四代等。此种模型尽可能保留了亲代肿瘤生长的微环境，例如肿瘤细胞周围浸润的淋巴细胞、细胞外基质、微血管等，利于更好的表现亲代肿瘤性状，并且维持了肿瘤的异质性，常见的PDX模型移植方法为皮下移植、肾包膜下异种移植和原位移植，相比于CDX模型能够保持原发肿瘤的分子学、基因学和病理学特征，但目前的研究现状在消化道肿瘤PDX模型的研究较少，由于PDX模型具有差异化特征没有较为统一的标准，利用免疫缺陷型小鼠(NSG)进行移植传代构建PDX模型易受到原组织样本因素的扰动，流程规范性较差，影响模型构建的成功率，且没有构建消化道肿瘤PDX模型标准样本库，无法为探索新靶标和寻找分析消化道肿瘤临床特征提供生物信息学。

发明内容

本发明的目的是提供一种消化道肿瘤PDX模型及标准化模型库的构建方法，利于对患者的消化道肿瘤辅助治疗，为肿瘤的生物学研究、诊断标志物的寻找和药物筛选提供了一个重要的体内模型，避免用药随意性和盲目性，避免受到原组织样本等因素的扰动，消化道肿瘤PDX模型可稳定传代至三代以上，扩大临床样品规模进行多重检测，规范消化道肿瘤PDX模型流程，提升PDX模型构建成功率，构建消化道肿瘤PDX模型标准样本库为探索新靶标和寻找分析消化道肿瘤临床特征提供生物信息学，对药物抗消化道肿瘤作用进行临床评价，预测患者对治疗药物反应，辅助消化道肿瘤致命机制研究并辅助患者肿瘤治疗。

本发明采用的技术方案如下：一种消化道肿瘤PDX模型，其特征在于：包括如下步骤：

(1)取样：临床筛选并取来自消化道肿瘤患者的外周血样本及组织样本置于含组织液的离心管中；结合临床病理数据库按照规范制备消化道肿瘤患者的外周血样本及组织样本。

(2)对步骤(1)中采集的消化道肿瘤外周血样本处理，取得生长旺盛、无溃疡坏死的肿瘤细胞；

(3)对步骤(1)中采集的组织样本进行处理，进行方法学层面的比对；

(4)对步骤(2)中分离获得的肿瘤细胞放入含RPMI-1640的培养皿中进行培养(含10％胎牛血清、10％二甲亚砜的RPMI-1640的培养皿)，并放置在液氮中保存，培养的标本经75％酒精消毒后装入穿刺针，进针穿刺处为小鼠腋下中部位置，缓慢推入肿瘤细胞，进针深度为1.2cm-1.8cm，停留2-4s后拔出，将进针穿刺处缝合后消毒，依靠小鼠提供的生物微环境进行生长，为P1代小鼠，将肿瘤细胞稳定传代至n代，取出肿瘤，剪碎，移植到新的小鼠体内，为Pn代小鼠，将Pn代小鼠内的肿瘤构建消化道肿瘤的PDX模型，其中n为不小于3的整数。

(5)对步骤(3)中所构建的消化道肿瘤PDX模型进行评价，根据药物及给药方案筛选出药物和/或放化疗敏感的消化道肿瘤PDX模型。

优选的，步骤(4)中所述肿瘤细胞传代至n代时体积为200-1000mm

优选的，所述消化道肿瘤PDX模型评价具体为：

S1：对所构建的消化道肿瘤PDX模型中肿瘤生长界限进行记录和判定，肿瘤生长界限即移植瘤在小鼠体内生长时坏死或出现液化现象时的肿瘤细胞体积临界值；

S2：对所构建的消化道肿瘤PDX模型中肿瘤细胞进行病理学和免疫组化染色评价；

S3：对所构建的消化道肿瘤PDX模型中肿瘤细胞的关键基因进行突变检测，根据突变情况筛选出药物/放化疗敏感的消化道肿瘤PDX模型。

优选的，所述基因突变类型有：L858R、L861Q、G719C或Exon19缺失。

一种消化道肿瘤PDX标准化模型库的构建方法，消化道肿瘤PDX标准化模型库包括中国人群消化道肿瘤临床病理分型分期、消化道肿瘤特征指标，建立规模化、标准化的中国人群人源消化道肿瘤移植动物模型和对应的原代肿瘤细胞系，明确中国人群消化道肿瘤细胞疾病分型，发展个性化研发体系和治疗方案。

作为消化道肿瘤PDX标准化模型库的构建方法的优选方案，所述原代肿瘤细胞系是将所述消化道肿瘤PDX模型规模化覆盖消化道肿瘤。

作为消化道肿瘤PDX标准化模型库的构建方法的优选方案，所述中国人群人源消化道肿瘤移植动物模型将中国消化道肿瘤患者的外周血来源的肿瘤细胞分为三个部分：第一部分用于DNA/RNA提取；第二部分用于病理学检查，放在福尔马林中固定，石蜡包埋；第三部分用于植入免疫缺陷小鼠中或放进冷冻介质并在液氮中保存，使用生长因子，辅助消化道肿瘤细胞在免疫缺陷小鼠体内的生长，并进行病理切片检测鉴定、基因遗传检测鉴定。

作为消化道肿瘤PDX标准化模型库的构建方法的优选方案，所述中国人群人源消化道肿瘤移植模型包括具有完整的消化道肿瘤患者临床信息、病理分型分级、组织病理、基因突变和基因转录表达。

作为消化道肿瘤PDX标准化模型库的构建方法的优选方案，所述中国人群人消化道肿瘤移植模型将中国消化道肿瘤患者的外周血来源的肿瘤细胞或新鲜肿瘤组织移植到免疫缺陷小鼠上。

作为消化道肿瘤PDX标准化模型库的构建方法的优选方案，所述消化道肿瘤PDX标准化模型库建立药物体外快速筛选、贴近临床的体内评价方法体系和药物药效联合应用或毒副作用机制。

附图说明

为了更清楚地说明本申请实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明中记载的一些实施例。

图1是本发明实施例2的对照组A、实验组B的显微镜下放大图；

图2是本发明实施例2的实验组C、实验组D的显微镜下放大图。

有益效果：本发明涉及一种消化道肿瘤PDX模型及标准化模型库的构建方法，消化道肿瘤PDX模型保持原发肿瘤的分子学、基因学和病理学特征，利于对患者的消化道肿瘤辅助治疗，外周血来源的肿瘤细胞分化程度、形态特征、结构特点以及分子特征等与患者本身的肿瘤特点更为相近，为肿瘤的生物学研究、诊断标志物的寻找和药物筛选提供了一个重要的体内模型，应用于肿瘤细胞的靶向治疗的个性化用药指导，避免用药随意性和盲目性，对消化道肿瘤PDX模型的构建流程进行优化，模拟消化道肿瘤原有的微环境，小鼠成活率和成瘤率高，避免受到原组织样本等因素的扰动，消化道肿瘤PDX模型可稳定传代至三代以上，扩大临床样品规模进行多重检测，规范消化道肿瘤PDX模型流程，提升PDX模型构建成功率，构建消化道肿瘤PDX模型标准样本库为探索新靶标和寻找分析消化道肿瘤临床特征提供生物信息学，在细胞和动物水平上对药物抗消化道肿瘤作用进行临床评价，预测患者对治疗药物反应，包括疗效、毒副作用和吸收程度等，探究消化道肿瘤的靶向治疗必要性和临床途径，辅助消化道肿瘤致命机制研究并辅助患者肿瘤治疗。

具体实施方式

下面对本发明一种胆道肿瘤血清中CTC特异性分选及鉴定检测的方法作进一步详细描述。

实施例1

一种消化道肿瘤PDX模型，其特征在于：包括如下步骤：

(1)取样：临床筛选并取来自消化道肿瘤患者的外周血样本及组织样本置于含组织液的离心管中，结合临床病理数据库按照规范制备消化道肿瘤患者的外周血样本及组织样本；检查入组肿瘤患者，明确诊断，并做详细资料记录；

(2)对步骤(1)中采集的消化道肿瘤外周血样本处理，取得生长旺盛、无溃疡坏死的肿瘤细胞；

外周血来源的肿瘤细胞存在于肿瘤患者外周血液循环中能够逃离宿主免疫杀伤而存活下来的肿瘤细胞，与其他来源的肿瘤细胞系相比，外周血来源的肿瘤细胞的分化程度、形态特征、结构特点以及分子特征与消化道肿瘤患者本身的肿瘤特点更为一致，这为肿瘤的生物学研究、诊断标志物的寻找和药物筛选提供了一个重要的体内模型；

(3)对步骤(1)中采集的组织样本进行处理，进行方法学层面的比对；

(4)对步骤(2)中分离获得的肿瘤细胞放入含RPMI-1640的培养皿中进行培养，培养的标本经75％酒精消毒后装入穿刺针，进针穿刺处为小鼠腋下中部位置，缓慢推入肿瘤细胞，进针深度为1.2cmcm，停留4s后拔出，将进针穿刺处缝合后消毒，依靠小鼠提供的生物微环境进行生长，为P1代小鼠，将肿瘤细胞稳定传代至3代，取出肿瘤，剪碎，移植到新的小鼠体内，为P3代小鼠，将P3代小鼠内的肿瘤构建消化道肿瘤的PDX模型。

(5)对步骤(3)中所构建的消化道肿瘤PDX模型进行评价，根据药物及给药方案筛选出药物和/或放化疗敏感的消化道肿瘤PDX模型，消化道肿瘤PDX模型保持原发肿瘤的分子学、基因学和病理学特征，利于对患者的消化道肿瘤辅助治疗，外周血来源的肿瘤细胞分化程度、形态特征、结构特点以及分子特征等与患者本身的肿瘤特点更为相近，为肿瘤的生物学研究、诊断标志物的寻找和药物筛选提供了一个重要的体内模型，应用于肿瘤细胞的靶向治疗的个性化用药指导，避免用药随意性和盲目性。

优选的，步骤(4)中所述肿瘤细胞传代至3代时体积为200mm

优选的，所述消化道肿瘤PDX模型评价具体为：

S1：对所构建的消化道肿瘤PDX模型中肿瘤生长界限进行记录和判定，肿瘤生长界限即移植瘤在小鼠体内生长时坏死或出现液化现象时的肿瘤细胞体积临界值；

S2：对所构建的消化道肿瘤PDX模型中肿瘤细胞进行病理学和免疫组化染色评价；

S3：对所构建的消化道肿瘤PDX模型中肿瘤细胞的关键基因进行突变检测，根据突变情况筛选出药物/放化疗敏感的消化道肿瘤PDX模型。

优选的，所述基因突变类型有：L858R、L861Q。

为了验证理论依据的科学性和评估本专利申请的消化道肿瘤PDX模型的实际效果，小鼠20只被分成对照组A、实验组B、实验组C和实验组D，每组5只小鼠，实验组B、实验组C和实验组D采用本申请专利的方法构建消化道肿瘤PDX模型，对照组A小鼠5只采用传统方法在小鼠背部开设创口，在伤患处移植分离获得的肿瘤细胞，将肿瘤细胞稳定传代至3代，其他试验方法与实验组B、C、D相同，对消化道肿瘤PDX模型的构建流程进行优化，模拟消化道肿瘤原有的微环境，小鼠成活率和成瘤率高，避免受到原组织样本等因素的扰动，从而影响传代效果。消化道肿瘤PDX模型可稳定传代至三代以上，扩大临床样品规模进行多重检测，规范消化道肿瘤PDX模型流程，提升PDX模型构建成功率。

对照组和实验组的小鼠分别在动物房笼具中持续观察2月，观察第二周开始将小鼠送检PET-CT检查，观察肿瘤的成瘤和转移情况，对照组A作为未注射药物的对比试验，将小鼠处死取瘤，对瘤体进行评价发现成瘤异型性较差，一部分进行冻存，另一部分进行病理检测和基因测序，可见显微镜下观察到肿瘤细胞增殖过度，形态异常；实验组B作为未注射药物的对比试验，但其采用本申请专利的方法构建消化道肿瘤PDX模型，将小鼠处死取瘤，对瘤体进行评价发现成瘤异型性较好，一部分进行冻存，另一部分进行病理检测和基因测序，可见显微镜下观察到肿瘤细胞增殖正常，形态完整，未明显见细胞死亡，可见采用模拟消化道肿瘤原有的微环境的实验组小鼠相比对照组A更能够模拟真实的消化道肿瘤环境，模拟消化道肿瘤细胞增殖，察看观察记录对照组A、实验组B小鼠饮食饮水无影响，个体无明显差异，小鼠行为无明显异常，活动能力正常，毛色未出现变化，未造成功能异常和感染等不良反应，排便正常，实验组C采用表柔比星药物对小鼠进行腹腔注射，每只给药剂量浓度为20ug/ml，表柔比星为作用于消化道肿瘤的药物，一部分进行冻存，另一部分进行病理检测和基因测序，可见显微镜下观察到肿瘤细胞多数细胞裂解死亡，可见表柔比星药物抑制作用较为明显，实验组D采用依托泊苷药物对小鼠进行腹腔注射，每只给药剂量浓度为20ug/ml，依托泊苷为作用于消化道肿瘤的药物，一部分进行冻存，另一部分进行病理检测和基因测序，可见显微镜下观察到肿瘤细胞绝大多数细胞裂解、凋亡，可见依托泊苷对消化道肿瘤细胞的抑制作用比表柔比星更为明显，详见表1。

表1 消化道肿瘤PDX模型的对比方案表

消化道肿瘤PDX模型保持原发肿瘤的分子学、基因学和病理学特征，利于对患者的消化道肿瘤辅助治疗，外周血来源的肿瘤细胞分化程度、形态特征、结构特点以及分子特征等与患者本身的肿瘤特点更为相近，为肿瘤的生物学研究、诊断标志物的寻找和药物筛选提供了一个重要的体内模型，应用于肿瘤细胞的靶向治疗的个性化用药指导，避免用药随意性和盲目性，对消化道肿瘤PDX模型的构建流程进行优化，模拟消化道肿瘤原有的微环境，小鼠成活率和成瘤率高，避免受到原组织样本等因素的扰动，消化道肿瘤PDX模型可稳定传代至三代以上，扩大临床样品规模进行多重检测，规范消化道肿瘤PDX模型流程，提升PDX模型构建成功率。

实施例2

一种消化道肿瘤PDX模型，其特征在于：包括如下步骤：

(1)取样：临床筛选并取来自消化道肿瘤患者的外周血样本及组织样本置于含组织液的离心管中；检查入组肿瘤患者，明确诊断，并做详细资料记录；

(2)对步骤(1)中采集的消化道肿瘤外周血样本处理，取得生长旺盛、无溃疡坏死的肿瘤细胞；

外周血来源的肿瘤细胞存在于肿瘤患者外周血液循环中能够逃离宿主免疫杀伤而存活下来的肿瘤细胞，与其他来源的肿瘤细胞系相比，外周血来源的肿瘤细胞的分化程度、形态特征、结构特点以及分子特征与消化道肿瘤患者本身的肿瘤特点更为一致，这为肿瘤的生物学研究、诊断标志物的寻找和药物筛选提供了一个重要的体内模型；

(3)对步骤(1)中采集的组织样本进行处理，进行方法学层面的比对；

(4)对步骤(2)中分离获得的肿瘤细胞放入含RPMI-1640的培养皿中进行培养，培养的标本经75％酒精消毒后装入穿刺针，进针穿刺处为小鼠腋下中部位置，缓慢推入肿瘤细胞，进针深度为1.8cm，停留2s后拔出，将进针穿刺处缝合后消毒，依靠小鼠提供的生物微环境进行生长，为P1代小鼠，将肿瘤细胞稳定传代至4代以上，取出肿瘤，剪碎，移植到新的小鼠体内，为Pn代小鼠，将Pn代小鼠内的肿瘤构建消化道肿瘤的PDX模型，对消化道肿瘤PDX模型的构建流程进行优化，模拟消化道肿瘤原有的微环境，小鼠成活率和成瘤率高，避免受到原组织样本等因素的扰动，从而影响传代效果。消化道肿瘤PDX模型可稳定传代至三代以上，扩大临床样品规模进行多重检测，规范消化道肿瘤PDX模型流程，提升PDX模型构建成功率。

(5)对步骤(3)中所构建的消化道肿瘤PDX模型进行评价，根据药物及给药方案筛选出药物和/或放化疗敏感的消化道肿瘤PDX模型，消化道肿瘤PDX模型保持原发肿瘤的分子学、基因学和病理学特征，利于对患者的消化道肿瘤辅助治疗，外周血来源的肿瘤细胞分化程度、形态特征、结构特点以及分子特征等与患者本身的肿瘤特点更为相近，为肿瘤的生物学研究、诊断标志物的寻找和药物筛选提供了一个重要的体内模型，应用于肿瘤细胞的靶向治疗的个性化用药指导，避免用药随意性和盲目性。

优选的，步骤(4)中所述肿瘤细胞传代至P4代时体积为500mm

优选的，步骤(4)中所述肿瘤细胞传代至P5代时体积为1000mm

优选的，所述消化道肿瘤PDX模型评价具体为：

S1：对所构建的消化道肿瘤PDX模型中肿瘤生长界限进行记录和判定，肿瘤生长界限即移植瘤在小鼠体内生长时坏死或出现液化现象时的肿瘤细胞体积临界值；

S2：对所构建的消化道肿瘤PDX模型中肿瘤细胞进行病理学和免疫组化染色评价；

S3：对所构建的消化道肿瘤PDX模型中肿瘤细胞的关键基因进行突变检测，根据突变情况筛选出药物/放化疗敏感的消化道肿瘤PDX模型。

优选的，所述基因突变类型有：L858R、L861Q和G719C。

为了验证理论依据的科学性和评估本专利申请的消化道肿瘤PDX模型的实际效果，小鼠20只被分成对照组A、实验组B、实验组C和实验组D，每组5只小鼠，实验组B、实验组C和实验组D采用本申请专利的方法构建消化道肿瘤PDX模型，对照组A小鼠5只采用传统方法在小鼠背部开设创口，在伤患处移植分离获得的肿瘤细胞，将肿瘤细胞稳定传代至4代以上，其他试验方法与实验组B、C、D相同，对消化道肿瘤PDX模型的构建流程进行优化，模拟消化道肿瘤原有的微环境，小鼠成活率和成瘤率高，避免受到原组织样本等因素的扰动，从而影响传代效果。消化道肿瘤PDX模型可稳定传代至三代以上，扩大临床样品规模进行多重检测，规范消化道肿瘤PDX模型流程，提升PDX模型构建成功率。

参照图1-2，对照组和实验组的小鼠分别在动物房笼具中持续观察2月，观察第二周开始将小鼠送检PET-CT检查，观察肿瘤的成瘤和转移情况，对照组A作为未注射药物的对比试验，将小鼠处死取瘤，对瘤体进行评价发现成瘤异型性较差，一部分进行冻存，另一部分进行病理检测和基因测序，可见显微镜下观察到肿瘤细胞增殖过度，形态异常；实验组B作为未注射药物的对比试验，但其采用本申请专利的方法构建消化道肿瘤PDX模型，将小鼠处死取瘤，对瘤体进行评价发现成瘤异型性较好，一部分进行冻存，另一部分进行病理检测和基因测序，可见显微镜下观察到肿瘤细胞增殖正常，形态完整，未明显见细胞死亡，可见采用模拟消化道肿瘤原有的微环境的实验组小鼠相比对照组A更能够模拟真实的消化道肿瘤环境，模拟消化道肿瘤细胞增殖，察看观察记录对照组A、实验组B小鼠饮食饮水无影响，个体无明显差异，小鼠行为无明显异常，活动能力正常，毛色未出现变化，未造成功能异常和感染等不良反应，排便正常，实验组C采用表柔比星药物对小鼠进行腹腔注射，每只给药剂量浓度为40-100ug/ml，表柔比星为作用于消化道肿瘤的药物，一部分进行冻存，另一部分进行病理检测和基因测序，可见显微镜下观察到肿瘤细胞多数细胞裂解死亡，可见表柔比星药物抑制作用较为明显，实验组D采用依托泊苷药物对小鼠进行腹腔注射，每只给药剂量浓度为40-100ug/ml，依托泊苷为作用于消化道肿瘤的药物，一部分进行冻存，另一部分进行病理检测和基因测序，可见显微镜下观察到肿瘤细胞绝大多数细胞裂解、凋亡，可见依托泊苷对消化道肿瘤细胞的抑制作用比表柔比星更为明显，详见表2。

表2 消化道肿瘤PDX模型的对比方案表

消化道肿瘤PDX模型保持原发肿瘤的分子学、基因学和病理学特征，利于对患者的消化道肿瘤辅助治疗，外周血来源的肿瘤细胞分化程度、形态特征、结构特点以及分子特征等与患者本身的肿瘤特点更为相近，为肿瘤的生物学研究、诊断标志物的寻找和药物筛选提供了一个重要的体内模型，应用于肿瘤细胞的靶向治疗的个性化用药指导，避免用药随意性和盲目性，对消化道肿瘤PDX模型的构建流程进行优化，模拟消化道肿瘤原有的微环境，小鼠成活率和成瘤率高，避免受到原组织样本等因素的扰动，消化道肿瘤PDX模型可稳定传代至三代以上，扩大临床样品规模进行多重检测，规范消化道肿瘤PDX模型流程，提升PDX模型构建成功率。

实施例3

一种消化道肿瘤PDX标准化模型库的构建方法，消化道肿瘤PDX标准化模型库包括中国人群消化道肿瘤临床病理分型分期、消化道肿瘤特征指标、建立规模化、标准化的中国人群人源消化道肿瘤移植动物模型和对应的原代肿瘤细胞系，建立消化道肿瘤临床表型数据库。

作为消化道肿瘤PDX标准化模型库的构建方法的优选方案，所述原代肿瘤细胞系是将所述消化道肿瘤PDX模型规模化覆盖消化道肿瘤。

作为消化道肿瘤PDX标准化模型库的构建方法的优选方案，所述中国人群人源消化道肿瘤移植动物模型将中国消化道肿瘤患者的外周血来源的肿瘤细胞分为三个部分：第一部分用于DNA/RNA提取；第二部分用于病理学检查；第三部分用于植入免疫缺陷小鼠中或放进冷冻介质并在液氮中保存，使用生长因子，辅助消化道肿瘤细胞在免疫缺陷小鼠体内的生长，并进行病理切片检测鉴定、基因遗传检测鉴定。

作为消化道肿瘤PDX标准化模型库的构建方法的优选方案，所述中国人群人源消化道肿瘤移植模型包括具有完整的消化道肿瘤患者临床信息、病理分型分级、组织病理、基因突变和基因转录表达，同时构建与消化道肿瘤CDX模型对应的患者原代肿瘤细胞系，能够在细胞和动物水平上对药物抗消化道肿瘤作用进行贴近临床的全方位评价。

作为消化道肿瘤PDX标准化模型库的构建方法的优选方案，所述中国人群人消化道肿瘤移植模型将中国消化道肿瘤患者的外周血来源的肿瘤细胞或新鲜肿瘤组织移植到免疫缺陷小鼠上，建立消化道肿瘤PDX标准化动物模型库。

作为消化道肿瘤PDX标准化模型库的构建方法的优选方案，所述消化道肿瘤PDX标准化模型库建立药物体外快速筛选、贴近临床的体内评价方法体系和药物药效联合应用或毒副作用机制，应用消化道肿瘤PDX试验进行药敏检测，为患者提供用药指导，通过影像学检测评估临床治疗效果，建立统一的药效数据库。

目前对于消化道肿瘤PDX模型标准样本库的构建方法尚不统一，缺乏统一的标准，构建消化道肿瘤PDX模型标准样本库为探索新靶标和寻找分析消化道肿瘤临床特征提供生物信息学，在细胞和动物水平上对药物抗消化道肿瘤作用进行临床评价，预测患者对治疗药物反应，包括疗效、毒副作用和吸收程度等，探究消化道肿瘤的靶向治疗必要性和临床途径，辅助消化道肿瘤致命机制研究并辅助患者肿瘤治疗。

以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包括在本发明的保护范围之内。