一种基因定点突变方法及其胁迫抗性育种应用

摘要

本发明公开了一种基因定点突变方法及其胁迫抗性育种应用。本发明方法首次应用胞苷脱氨酶碱基编辑技术定点突变酿酒酵母基因组上的全局转录调控因子Spt15，扩大了转录因子Spt15的突变范围，实现了转录因子Spt15的精确突变，获得了36株突变体；在高糖高渗、高温和乙醇胁迫条件下成功且高效地筛选到14株、18株和19株耐受性明显提高的菌株，其中14株菌株在这三种胁迫下均是抗性菌株。本发明可解决实际工业发酵中酵母细胞胁迫耐受性不足的缺陷。本发明的方法操作简单方便，选育效率高，为今后耐性机制研究和菌株分子改造与应用奠定了良好基础。