一种利用大豆分离蛋白-茶皂素复合乳化剂制备纳米乳液的方法

摘要

本发明公开了一种利用大豆分离蛋白‑茶皂素复合乳化剂制备纳米乳液的方法，属于大豆蛋白产品开发领域，该方法包括以下步骤：(1)制备茶皂素与大豆分离蛋白(2)茶皂素与大豆分离蛋白和复合乳化剂溶于磷酸盐缓冲液作水相(3)制备粗乳液并测定平均粒径、PDI、ζ－电位和浊度。本发明明确了大豆分离蛋白‑茶皂素复合乳化剂制备纳米乳液的工艺，该乳液具有乳液稳定性高，操作便捷，绿色健康，贮藏期长的特点。

说明书

技术领域

本发明属于大豆蛋白产品开发领域，主要涉及一种利用大豆分离蛋白-茶皂素复合乳化剂制备纳米乳液的方法。

背景技术

山茶油又名茶油，与橄榄油的脂肪酸组成相似，素有“东方橄榄油”的美誉。联合国粮农组织已将山茶油作为一种健康型高级食用植物油。大量研究发现，山茶油所含不饱和脂肪酸高达80％以上，主要为油酸，其含量占60％以上。此外，山茶油富含维生素E、植物甾醇和角鲨烯等多种有益于人体健康的生物活性成分，具有降血脂、预防高血压和血管硬化、抗癌以及调节肠道致病菌群等作用，有较高的医用价值。然而，山茶油因含80％以上的不饱和脂肪酸，极易受环境中的空气、光照和水等影响而发生氧化酸败并产生醛酮类等有害物质，使得山茶油的产品形式和推广应用受到极大限制。

纳米乳液能够较好地载运和保护脂溶性活性成分，具有较高的生物利用度和环境耐受性。同时纳米乳液具有粒度小、尺度均一、稳定性好、黏度低等优点，在制备乳液的过程中，有时会使用一些小分子表面活性剂作为乳化剂，但这种化学合成表面活性剂存在一定的安全隐患。

大豆分离蛋白是一种廉价易得的优质植物蛋白质。由于其具有两亲性、乳化性等功能特性，因此非常适用于稳定油－水界面以制备水包油型纳米乳液。但是单独使用蛋白质包被的纳米乳液具有较差的环境稳定性，研究通常将大豆分离蛋白和其它乳化剂复配使用。为了解决单独使用大豆分离蛋白制备乳液环境稳定性差的问题，考虑将其与茶皂素进行复合使用。

本发明使用大豆分离蛋白-茶皂素作为复合天然乳化剂，通过高压均质乳化技术制备山茶油纳米乳液，使山茶油均匀的分布于纳米液滴中，以提高其稳定性及吸收利用率。同时对复配比例、乳化剂添加量、山茶油质量分数、均质压力等因素进行优化，为制备均一、稳定的山茶油纳米乳液，提供一定的理论基础。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是克服上述现有技术的不足，提供一种利用大豆分离蛋白- 茶皂素复合乳化剂制备纳米乳液的方法，达到制备均一、稳定的山茶油纳米乳液，优化乳液稳定性的效果。实现乳液均一稳定；提高乳液稳定性；延长贮藏期的目的。

本发明所要解决的技术问题是通过以下技术方案来实现的：

一种利用大豆分离蛋白-茶皂素复合乳化剂制备纳米乳液的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将茶皂素与大豆分离蛋白按比例为1∶4、1∶2、1∶1、2∶1、4∶1、6∶1制备； (2)茶皂素与大豆分离蛋白、质量分数分别为1.0％、1.5％、2.0％、2.5％、3.0％、3.5％的复合乳化剂溶于磷酸盐缓冲液(0.04mol/L、pH7.0)中，室温下连续搅拌2h，放入4℃冰箱过夜，作为水相；(3)取出后分别加入相对于水相5％、10％、15％、20％、25％、 30％的山茶油，制备粗乳液，设置高压均质机均质压力为100MPa，均质次数为7次，测定平均粒径、PDI、ζ－电位和浊度。

根据权利要求1所述的一种利用大豆分离蛋白-茶皂素复合乳化剂制备纳米乳液的方法，其特征在于:茶皂素∶大豆分离蛋白比例为2∶1作为制备山茶油纳米乳液的条件。

根据权利要求1所述的一种利用大豆分离蛋白-茶皂素复合乳化剂制备纳米乳液的方法，其特征在于:复合乳化剂质量分数3％是制备山茶油纳米乳液的最佳选择。

根据权利要求1所述的一种利用大豆分离蛋白-茶皂素复合乳化剂制备纳米乳液的方法，其特征在于:确保纳米乳液的稳定性，选择山茶油质量分数为10％。

具体实施方式

实施例1：

一种利用大豆分离蛋白-茶皂素复合乳化剂制备纳米乳液的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将茶皂素与大豆分离蛋白按比例为2∶1制备；(2)茶皂素与大豆分离蛋白、质量分数分别为3.0％的复合乳化剂溶于磷酸盐缓冲液(0.04mol/L、pH7.0)中，室温下连续搅拌2h，放入4℃冰箱过夜，作为水相；(3)取出后分别加入相对于水相10％的山茶油，制备粗乳液，设置高压均质机均质压力为100MPa，均质次数为7次，测定平均粒径、PDI、ζ－电位和浊度，在此条件下得到的乳液稳定性好。并通过透射电子显微镜验证了山茶油纳米乳液以小液滴的状态均匀分散在乳液体系中，同时流变学特性结果说明了山茶油纳米乳液具有良好的动力学稳定性。

实施例2：

一种利用大豆分离蛋白-茶皂素复合乳化剂制备纳米乳液的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将茶皂素与大豆分离蛋白按比例为2∶1制备；(2)茶皂素与大豆分离蛋白、质量分数分别为3.0％的复合乳化剂溶于磷酸盐缓冲液(0.04mol/L、pH7.0)中，室温下连续搅拌2h，放入4℃冰箱过夜，作为水相；(3)取出后分别加入相对于水相20％的山茶油，制备粗乳液，设置高压均质机均质压力为100MPa，均质次数为7次，测定平均粒径、PDI、ζ－电位和浊度，在此条件下粒度分布过宽，不利于乳液的稳定性。

实施例3：

一种利用大豆分离蛋白-茶皂素复合乳化剂制备纳米乳液的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将茶皂素与大豆分离蛋白按比例为2∶1制备；(2)茶皂素与大豆分离蛋白、质量分数分别为2.0％的复合乳化剂溶于磷酸盐缓冲液(0.04mol/L、pH7.0)中，室温下连续搅拌2h，放入4℃冰箱过夜，作为水相；(3)取出后分别加入相对于水相10％的山茶油，制备粗乳液，设置高压均质机均质压力为100MPa，均质次数为7次，测定平均粒径、PDI、ζ－电位和浊度，在此条件下乳化剂不足以覆盖在所有油滴表面，不利于乳液的稳定性。

实施例4：

一种利用大豆分离蛋白-茶皂素复合乳化剂制备纳米乳液的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将茶皂素与大豆分离蛋白按比例为1∶4制备；(2)茶皂素与大豆分离蛋白、质量分数分别为3.0％的复合乳化剂溶于磷酸盐缓冲液(0.04mol/L、pH7.0)中，室温下连续搅拌2h，放入4℃冰箱过夜，作为水相；(3)取出后分别加入相对于水相10％的山茶油，制备粗乳液，设置高压均质机均质压力为100MPa，均质次数为7次，测定平均粒径、PDI、ζ－电位和浊度，在此条件下乳液的浊度越大，较大粒径的液滴分布越多，不利于乳液的稳定性。