内消旋-二氨基庚二酸脱氢酶突变体及其应用

摘要

本发明公开了内消旋‑二氨基庚二酸脱氢酶突变体及其应用，属于生物工程技术领域。本发明的改造方法通过组合突变设计出最佳突变体，对PvDAPDH的蛋白质进行改造，克服了之前野生型的酶因为活性低而导致的转化率低的局限，最终得到最佳突变体L7(PvDAPDHW121A/H227I/R180S)，其酶活为野生型的85倍；将该突变体L7进一步与L‑氨基酸脱氨酶(PmLAAD)和葡萄糖脱氢酶(BmGDH)级联，以L‑苯丙氨酸为底物，D‑苯丙氨酸产量达到48.5g/L，因此大大降低了之前的高菌体量以及昂贵的底物成本，为D‑苯丙氨酸的工业化生产奠定了基础。