三重一步法RT-PCR同时检测烟草上三种病毒的方法

摘要

三重一步法RT-PCR同时检测烟草上三种病毒的方法，其特征在于：是同时检测烟草普通花叶病毒、马铃薯Y病毒和黄瓜花叶病毒的方法，该方法包括甄别比对病毒基因组中保守区域，人工筛选合成适用于三种病毒病复合RT-PCR特异性引物；分析获得TMV、PVY、CMV侵染烟叶样本；整合反转录和PCR反应所需酶和缓冲液，通过反应条件优化，建立基于一步法RT-PCR复合检测烟叶感染TMV、PVY、CMV的方法。本发明所采用的三重一步法RT-PCR反应，具有操作简便、省时省力、结果可靠、成本低廉的优点，同时可有效减少操作过程中造成样品交叉污染的可能性，对于烟草农业生产中TMV、PVY、CMV的监测监控具有广泛的应用前景。