一种液态发酵制备莱鲍迪苷A的方法

摘要

本发明涉及一种液态发酵制备莱鲍迪苷A的方法，其特征在于：（1）糖基转移酶UGT76G1基因接到pUC18质粒载体上，导转到DH5α大肠杆菌感受态细胞中，接入LB培养基，30～37°C、200～250 rpm下培养10～18h；（2）按0.1%～10%体积比的接种量接入到种子罐，100～400 rpm，通气比0.2～1 V/V.min，30～37°C下培养5～12 h；（3）按1%～15%体积比的接种量接入发酵罐，100～800 rpm，通气比0.5～2 V/V.min，30～37°C，pH6.6～8.0，培养20～30h；（4）菌体浓度OD600达20～60时加入诱导剂，浓度在0.05～1 mmol/L；（5）压滤、重悬、高压均质破碎、压滤得粗酶液；（6）将甜菊糖苷、尿苷二磷酸葡萄糖、磷酸缓冲液、粗酶液混合，25‑40°C反应12‑48 h。本发明优点：酶活性高，可催化底物浓度高，转化率高，发酵过程易控，步骤简单，发酵成本低廉。