一种基于解旋酶和切刻酶的等温扩增核酸检测方法及试剂盒

摘要

本发明公开了一种基于解旋酶和切刻酶的等温扩增核酸检测方法，包括如下步骤：S1.根据目标核酸序列设计特异性扩增引物和带有切刻酶识别位点的Taqman探针；S2.将样本核酸经酶处理得到单链目标核酸模板；S3.将S1所得Taqman探针与S2所得单链目标核酸模板特异性结合，得到特异性结合产物，使用切刻酶酶切特异性结合产物，并实时检测荧光信号。本发明将解旋酶与切刻酶联合使用，设计带有切刻酶切割位点的Taqman探针，无需扩增出大量核酸产物，只需要产生适量单链模板，然后用切刻酶不断切割与靶位点结合的探针即可进行检测，可以避免等温扩增容易造成实验室污染的缺点，操作简便、快速，适用于现场快速检测。